Hurtigpåvisning av bakterier og resistens Ingvild Orlien
24.03.2015 BD Phoenix BD Phoenix Automatisk identifikasjon og resistensbestemmelse av bakterier • • • • • Phoenix i bruk på Ullevål siden april 2012 Automatisering av ID og resistensbestemmelse 2014: 10 441 prøver Paneler Instrumenter - BD Phoenix - BD Phoenix AP • EpiCenter Panel • • • • • • Kombinasjonspanel Identifikasjon og resistensbestemmelse 136 mikrobrønner Ukentlig kontroll ID Broth AST Broth Panel - Identifikasjon • • • • BD Phoenix Panel - resistensbestemmelse • 85 brønner • Buljongbasert mikrofortynningstest • Seriell tofoldsfortynning, minimum tre fortynninger per antibiotikum • Redox-indikator for deteksjon av vekst • Måling av indikatorforandringer og bakteriell turbiditet 51 brønner Kromogene og fluorogene biokjemiske tester Både vekstbaserte og enzymatiske substrater Deteksjon ved to forskjellige måter: - Visuell lysdeteksjon med rød, grønn og blå LEDlampe - UV-lys deteksjon Automatisk system for identifikasjon og resistensbestemmelse • • • • Avlesning av prøvene hvert 20. min Identifikasjon: 3-5 timer Resistensbestemmelse: 9-10 timer Vedlikehold - Daglig: sjekk av temperatur - Ukentlig: sjekk av lamper og lydalarm 1 24.03.2015 BD Phoenix AP BD Phoenix AP • Standardiserer inokulumet til ID røret • Tilsetter AST indikator til AST røret • Lager riktig fortynning av inokulatet i ID røret, enten 0,5 McF eller 0,25 McF • Overfører riktig volum fra ID røret til AST-rørene • Vedlikehold - Neflometer (densitometer) sjekkes daglig, kalibreres månedlig - Plastslangesett til ID Broth skiftes månedlig BD EpiCenter Datastyringssystem BD EpiCenter • Innsamling og behandling av data fra BD Phoenix • Validering av resultater • Analyserer data - Brytningspunkter - Ekspertregler, EUCAST-og CLSI-standard og egendefinerte • Overfører data til laboratoriedatasystemet Klebsiella pneumoniae ESBL Aktiverte regler: • #1505 (CLSI) ”Isolate is confirmed positive for ESBL. Alert clinician and infection control practitioner. Verify results if uncommon.” • #1529 (CLSI) ”When ESBL is detected, an interpretation of susceptible or intermediate for penicillins, cephalosporins (other than cephamycins) and aztreonam is reported as resistant.” • #8015 (EpiCARE) ”Ved ESBL skal mecillinam rapporteres som (det er) funnet. Sjekk derfor mecillinam.” Prøvens gang Prøvens gang • Renkultur av en stor gram negativ stavbakterie • Prøvenummeret registreres i EpiCenter • ID rør og blodskål til renhetskontroll merkes • Oppslemming av bakterien i ID rør (0,25-4,0 McF) Ekspertregler eksempel • • • • ID rør settes i rack sammen med AST rør Rack settes inn i Phoenix AP, 5-7 min Ferdige rack settes i inokuleringsstasjonen Prøvenummer og panelnummer kobles sammen 2 24.03.2015 Prøvens gang • • • • Prøvemateriale overføres til panelene 1μl spres fra ID rør til blodskål Panelene inkuberes i Phoenix instrumentet Resultatene hentes fra EpiCenter neste morgen Oppsummering • Fordeler - Standardisering av inokulat - Automatisk avlesning - Ekspertregler • Ulemper - Feil ved scanning - Mye avfall • Fremtidig bruk - Gram positive bakterier 3
© Copyright 2024