1. No category

U N IV E R S ID A D D E S A N C A R L O S D E G U A T E M A L A
F A C U L T A D D E C I E N C I A S Q U Í M I C A S Y F A R M A C IA
V a lid a c ió n d e l M é t o d o d e D e t e rm in a c ió n d e c o b r e e n s a n g re p o r
E s p e c t r o f o t o m e t ría d e A b s o r c ió n A t ó m ic a e n e l L a b o r a t o r io d e l
D e p a r t a m e n t o d e T o x i c o l o g í a d e l a F a c u l t a d d e C i e n c i a s Q u í m ic a s y F a r m a c i a
d e l a U n i v e r s id a d d e S a n C a r l o s d e G u a t e m a l a .
I n f o r m e d e T e s is
P re se n tad o p o r
A n a K a re n G ó m e z H e rn á n d e z
Q u ím ic a F a r m a c é u t ic a
G u a t e m a la , M a y o 2 0 1 3
ÍN D IC E
1 . R E S U M E N … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ..p á g 1
2 . I N T R O D U C C I Ó N … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .p á g 3
3 . A N T E C E D E N T E S … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .p á g 5
4 . J U S T I F I C A C I Ó N … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .p á g 7
5 . O B J E T IV O S … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … p á g 8
6 . H I P Ó T E S I S … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ..p á g 9
7 . M A T E R IA L E S Y M É T O D O S … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … p á g 10
8 . R E S U L T A D O S .… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … . p á g 1 7
9 . D I S C U S I Ó N D E R E S U L T A D O S … … … … … … … .… … … … … … … … … … … … … p á g 3 5
1 0 . C O N C L U S I O N E S … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ..p á g 4 2
1 1 . R E C O M E N D A C I O N E S … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ..p á g 4 4
1 2 . A N E X O S … … … … … .. … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … p á g 4 5
13 . R E F E R E N C IA S B IB L IO G R Á F IC A S … … … … … … … … … … … … … … … … … … … p á g 6 4
J U N T A D IR E C T IV A
Ó s c a r C ó b a r P in t o , P h .D
D e ca n o
L ic . P a b lo E r n e s t o O liv a S o t o , M .A .
S e c r e t a r io
L ic d a . L ilia n a V id e s d e U r iz a r
Vocal I
D r . S e r g io A le ja n d r o M e lg a r V a lla d a r e s V o c a l I I
L ic . L u is A n t o n io G á lv e z S a n c h in e lli
V o c a l III
B r. F a y v e r M a n u e l d e L e ó n M a y o rg a
V o c a l IV
B r . M a id y G r a c ie la C ó r d o b a A u d o n
Vocal V
D E D IC A T O R IA
A D io s , e l m o t o r y la in s p ir a c ió n d e m i v id a , p o r h a b e r m e p e r m it id o lle g a r h a s t a a q u í
y m o stra rm e su a m o r e n ca d a p a so q u e d o y .
A m i p a d r e p o r a p o y a r m e y d a r m e á n im o s , p o r e n s e ñ a r m e a lu c h a r , a p e r s e v e r a r y a
d a r lo m e jo r d e m í e n t o d o m o m e n t o .
A m i m e jo r a m ig a , a m i m a d r e , p o r s u s c o n s e jo s , p o r s u a m o r y p o r s e r e l m e jo r
r e g a lo q u e la v id a m e h a d a d o .
A m is h e r m a n a s , p o r c o m p a r t ir t a n t o s m o m e n t o s c o n m ig o , p o r s u a p o y o y s u
e je m p lo p a r a lle g a r s e r u n a g r a n m u je r .
A G R A D E C IM IE N T O S
A m i A lm a M a t e r , la U n iv e r s id a d d e S a n C a r lo s d e G u a t e m a la y a la F a c u lt a d d e
C ie n c ia s Q u ím ic a s y F a r m a c ia .
A m i r e v is o r a J u lia A m p a r o G a r c ía y a m is a s e s o r a s C a r o lin a G u z m á n y F a b io la P r a d o
d e M ic h e o p o r d a r m e la o p o r t u n id a d , f a c ilit a r m e y a p o y a r m e e n la r e a liz a c ió n d e e s t a t e s is ,
d e la c u a l t a m b ié n n a c ió u n a a m is t a d q u e s ie m p r e lle v a r é c o n m ig o .
A m is a m ig o s . T o d o s lo s q u e f o r m a n o h a n f o r m a d o p a r t e d e m i v id a e n a lg ú n
m o m e n t o , p o r a y u d a r m e a s e r m e jo r y lle n a r m i v id a d e a le g r ía . E s p e c ia lm e n t e a m is a m ig o s
A lla n V á s q u e z y L u is P e d r o H e r r e r a p o r e s t a r p a r a m í e n lo s m o m e n t o s m á s d if íc ile s y
a y u d a rm e g ra n d e m e n te .
A l r e s t o d e la f a m ilia y a la s p e r s o n a s q u e c o m p a r t e n c o n m ig o e s t e é x it o , p o r s u s
m u e s t r a s d e c a r iñ o y a p o y o y a m i f ie l c o m p a ñ ía S h a k i.
A m is a m ig o s Q F ’s M ir n a y C h r is t y , K e v in , F a b io la , A n d r e a . J u d it h , C a r lo s , N o e m í y
P a b lo , a G e r b e r p o r t o d a s u a y u d a y p o r lle n a r e s t o s a ñ o s d e e x p e r ie n c ia s in o lv id a b le s , p o r
a c o m p a ñ a r m e e n e l a r d u o c a m in o p a r a lle g a r h a s t a a q u í, e n s e ñ á n d o m e d ia r ia m e n t e q u e
v a lía la p e n a .
1
1. R E S U M E N
L a d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n s u e r o e s im p o r t a n t e e n e l d ia g n ó s t ic o d e la e n f e r m e d a d
d e W ils o n y e l S ín d r o m e d e M e n k e s , a m b o s e r r o r e s in n a t o s d e l m e t a b o lis m o d e l c o b r e .
C o n c e n t r a c io n e s a n o r m a le s d e c o b r e e n s u e r o s e d e t e c t a n t a m b ié n e n p a c ie n t e s c o n
a r t r it is r e u m a t o id e , e m b a r a z o s a n o r m a le s y c ie r t o s t ip o s d e c á n c e r e n t r e o t r a s
e n fe rm e d a d e s
( L ig h t m a n , A ., B r a n d e s , J .M ., B in u r , N ., 1 9 8 6 ) . L o s
m é to d o s
e s p e c t r o f o t o m é t r ic o s s o n lo s d e e le c c ió n p a r a la d e t e r m in a c ió n d e c o b r e y a q u e
p r e s e n t a n a lt a s e n s ib ilid a d , p u e d e n s e r a p lic a d o s d ir e c t a m e n t e a la m u e s t r a s in s u f r ir
in t e r f e r e n c ia s o v a r ia c io n e s d e e s t a b ilid a d , y n o s e u t iliz a n r e a c t iv o s d if íc ile s d e a d q u ir ir
( A b e , A ., Y a m a s h it a , S ., N o m a , A ., 1 9 8 9 ) .
E n G u a t e m a la , e l la b o r a t o r io d e l D e p a r t a m e n t o d e T o x ic o lo g ía d e la F a c u lt a d d e
C ie n c ia s Q u ím ic a s y F a r m a c ia d e la U n iv e r s id a d d e S a n C a r lo s d e G u a t e m a la , r e a liz a
d ic h a s d e t e r m in a c io n e s , c o la b o r a n d o a s í
a l d ia g n ó s t ic o d if e r e n c ia l p a r a d e t e c t a r
d is t in t a s p a t o lo g ía s o e x p o s ic io n e s e n d o n d e s e p r e s e n t e a lt e r a c ió n d e lo s n iv e le s d e
c o b r e e n la s a n g r e .
S e v a lid ó e l m é t o d o d e d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n s u e r o s a n g u ín e o a t r a v é s d e
e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a p o r t é c n ic a d e lla m a , c o n e l o b je t iv o d e
e v a lu a r y v e r if ic a r lo s r e s p e c t iv o s p a r á m e t r o s c o n q u e d e b e c o n t a r t o d a v a lid a c ió n d e
m é to d o s
a n a lít ic o s . E s t o s
p a rá m e tro s
fu e ro n
lin e a lid a d , e x a c t it u d , p r e c is ió n ,
r e p e t ib ilid a d , lím it e d e d e t e c c ió n , lím it e d e c u a n t if ic a c ió n y r a n g o ; y a s í a s e g u r a r q u e lo s
r e s u lt a d o s s e a n v á lid o s y c o n f ia b le s s e g ú n lo q u e s u a p lic a c ió n r e q u ie r a .
P a r a e s t a v a lid a c ió n s e u t iliz ó e l e q u ip o , e l m é t o d o y la s c o n d ic io n e s p r o p u e s t a s p o r
P e r k in E lm e r , u t iliz a n d o e s t á n d a r e s d e c o b r e a d is t in t a s c o n c e n t r a c io n e s , p a r a lu e g o
e v a lu a r m u e s t r a s s é r ic a s c o n t a m in a d a s c o n c o b r e e n r a n g o s n o r m a le s y p o r d e b a jo y
e n c im a d e e s t o s .
2
S e e n c o n t r a r o n r e s u lt a d o s s a t is f a c t o r io s e n t o d o s lo s p a r á m e t r o s e v a lu a d o s , p u e s e l
m é t o d o e x p r e s ó u n a a d e c u a d a lin e a lid a d e n la c u r v a d e c a lib r a c ió n , a s í c o m o e n la
m e d ic ió n d e la s m u e s t r a s s é r ic a s .
T a m b ié n
p re se n tó
e x a c t it u d
en
lo s
r e s u lt a d o s
o b t e n ié n d o s e
p o r c e n t a je s
de
r e c u p e r a c ió n d e 9 8 .5 1 a 1 0 0 .7 5 % p a r a c o n c e n t r a c io n e s a p a r t ir d e 5 0 μ g / d L .
L o s d a t o s s e p r e s e n t a r o n p r e c is o s e n c o n c e n t r a c io n e s a p a r t ir d e 5 0 µ g / d L c o n
c o e f ic ie n t e s d e v a r ia c ió n e n u n r a n g o 0 .4 a 3 .0 %
e n c o n t r á n d o s e d e n t r o d e l lím it e
a c e p t a d o < 5 .0 % a l ig u a l q u e p a r a la r e p e t ib ilid a d e n d o n d e s e e n c o n t r ó u n c o e f ic ie n t e
d e v a r ia c ió n d e 3 .6 4 % p a r a la m u e s t r a e v a lu a d a .
E l lím it e d e d e t e c c ió n s e e s t a b le c ió e n 4 .0 3 µ g / d L y e l lím it e d e c u a n t if ic a c ió n e n 1 2 .2 2
µ g / d L . P a r a e l r a n g o d e d e t e r m in a c io n e s d e l m é t o d o , s e e s t a b le c ió q u e e s t e p u e d e
r e a liz a r le c t u r a s d e h a s t a 6 0 0 µ g / d L p r e s e n t a n d o d a t o s e x a c t o s c o n p o r c e n t a je s d e
r e c u p e r a c ió n d e h a s t a 1 0 2 .7 6 % . S e e n c o n t r ó t a m b ié n p r e c is ió n y lin e a lid a d h a s t a e s t a s
c o n c e n t r a c io n e s c o n u n c o e f ic ie n t e d e d e t e r m in a c ió n id e a l d e 1 .
P o r lo t a n t o s e c o n s id e r a q u e e s t e m é t o d o e s a d e c u a d o p a r a s u a p lic a c ió n s in r e a liz a r
n in g u n a m o d if ic a c ió n d e l m is m o , e n lo s c a s o s n e c e s a r io s y d e t e c t a r a s í la s a lt e r a c io n e s
d e l m e t a b o lis m o d e l c o b r e q u e p u e d e n p r e s e n t a r s e c lín ic a m e n t e .
3
2 . I N T R O D U C C IÓ N
E l c o b r e e s u n e le m e n t o in d is p e n s a b le e n la n u t r ic ió n h u m a n a , c o n t r ib u y e a la
f o r m a c ió n
de
g ló b u lo s
r o jo s
y
al
m a n t e n im ie n t o
de
lo s
vasos
s a n g u ín e o s , n e r v io s , s is t e m a in m u n it a r io y h u e s o s . S u d e f ic ie n c ia s u e le p r o d u c ir
a n e m ia , n e u t r o p e n ia y d e s m in e r a liz a c ió n ó s e a ; s e c a r a c t e r iz a p o r s e r u n o d e lo s
m e jo r e s c o n d u c t o r e s d e e le c t r ic id a d ( A r n a l N , C r is t a lli D O , d e A la n iz M J y M a r r a C A ,
20 10 ).
A la v e z , e s t e m e t a l in t e g r a e l g r u p o d e lo s m e t a le s d e in t e r é s t o x ic o ló g ic o , c u a n d o s e
e n c u e n t r a e n c o n c e n t r a c io n e s e le v a d a s . L a in h a la c ió n d e n iv e le s a lt o s p u e d e p r o d u c ir
ir r it a c ió n d e la s v ía s r e s p ir a t o r ia s ; p o r in g e s t ió n p u e d e p r o d u c ir n á u s e a s , v ó m it o s y
d ia r r e a . U n e x c e s o d e c o b r e e n la s a n g r e p u e d e d a ñ a r e l h íg a d o y lo s r iñ o n e s , e in c lu s o
c a u s a r la m u e r t e ( B á r a n y E , B e r g d a h l I , y O s k a r s s o n A , 2 0 1 0 ) . E x is t e n p a t o lo g ía s c o m o
la e n f e r m e d a d d e M e n k e s , la e n f e r m e d a d d e W ils o n , la e s c le r o s is m ú lt ip le ,
h ip o t ir o id is m o y la in s u f ic ie n c ia s u p r a r r e n a l, e n d o n d e s e o b s e r v a n v a lo r e s a n o r m a le s
d e c o b r e e n s a n g r e , o r in a y e n ó r g a n o s c o m o h íg a d o , c e r e b r o , e t c . ( C la r k e , J . T , 1 9 9 8 ) .
P o r lo a n t e r io r y c o m o u n a p r u e b a p a r a e l d ia g n ó s t ic o d if e r e n c ia l e n lo s c a s o s
in d ic a d o s , a s í c o m o e n la s in t o x ic a c io n e s a g u d a s p o c o f r e c u e n t e s p o r e s t e m e t a l, e s
im p o r t a n t e la d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n s u e r o y o t r o s f lu id o s b io ló g ic o s . E s n e c e s a r io
p o r t a n t o , c o n t a r c o n m e t o d o l o g ía s a n a lít ic a s e s t a n d a r iz a d a s q u e c u m p la n c o n
p a r á m e t r o s d e e x a c t it u d , p r e c is ió n , s e n s ib ilid a d y s e le c t iv id a d . E l p r o c e s o p o r e l c u a l
s e e v a lú a n e s t o s a t r ib u t o s s e c o n o c e c o n e l n o m b r e d e v a lid a c ió n y e s u n a s p e c t o c la v e
e n e l a s e g u r a m ie n t o d e la c a lid a d d e lo s r e s u lt a d o s a n a lít ic o s ( B la n e s , P . S ., B e n ít e z , M .
E ., G im é n e z , M .C ., 2 0 0 4 )
D e la s m e t o d o lo g ía s e x is t e n t e s p a r a la d e t e r m in a c ió n d e m e t a le s e n m u e s t r a s
b io ló g ic a s , la e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a e n lla m a e s u n a t é c n ic a d e f á c il
o p e r a c ió n , s e n s ib le y s e le c t iv a , e n d o n d e la c a n t id a d d e e n e r g ía a b s o r b id a e n la lla m a a
4
u n a d e t e r m in a d a lo n g it u d d e o n d a e s p r o p o r c io n a l a la c o n c e n t r a c ió n d e l a n a lit o e n la
m u e s t r a ( D a w s o n , J .B ., E llis , D .J ., y N e w t o n , H .J , 1 9 6 8 ) ( B la n e s , P . S ., B e n ít e z , M . E .,
G im é n e z , M .C ., 2 0 0 4 ) .
E n e l la b o r a t o r io d e l D e p a r t a m e n t o d e T o x ic o lo g ía d e la F a c u lt a d d e C ie n c ia s Q u ím ic a s
y F a r m a c ia d e la U n iv e r s id a d d e S a n C a r lo s d e G u a t e m a la s e h a
im p le m e n t a d o e l
m é t o d o a n a lít ic o d e c o b r e e n m u e s t r a s d e s u e r o p o r m e d io d e e s t a t é c n ic a
a m p lia m e n t e u s a d a y s ie n d o e l c o b r e u n n u t r ie n t e e s e n c ia l, s u c u a n t if ic a c ió n s e h a c e
in d is p e n s a b le c o m o p r u e b a d e d ia g n ó s t ic o d if e r e n c ia l. P o r lo t a n t o , s e c o n s id e r ó
im p o r t a n t e y n e c e s a r ia la v a lid a c ió n d e l m é t o d o a f in d e o b t e n e r r e s u lt a d o s c o n f ia b le s
y se g u ro s.
E s t e p r o y e c t o s e lle v ó a c a b o
m e d ia n t e la d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n m u e s t r a s
p r e p a r a d a s a p a r t ir d e u n a m e z c la d e s u e r o s p r o v e n ie n t e s d e d if e r e n t e s p e r s o n a s ,
f o r t if ic á n d o la s c o n e s t á n d a r d e c o b r e a d if e r e n t e s n iv e le s d e a c u e r d o a l p la n d e t r a b a jo ,
e l s u e r o t a l c u a l s e u s ó c o m o c o n t r o l. S e s ig u ió e l m é t o d o d e e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e
a b s o r c ió n a t ó m ic a p o r t é c n ic a d e lla m a , c o n e l e q u ip o y e l m é t o d o d e P e r k in E lm e r , d e
a c u e r d o a l m a n u a l: P e r k in E lm e r 1 9 6 4 -2 0 0 0 L if e a n d A n a ly t ic a l S c ie n c e s ; e v a lu a n d o
p a r á m e t r o s q u e p e r m it ie r o n v e r if ic a r y v a lid a r e l u s o d e l m é t o d o .
5
3. AN TECED ENTES
Se han
r e a liz a d o y a v a r io s e s t u d io s , y e s t a b le c id o n u e v o s m é t o d o s o b ie n
m o d if ic a c io n e s d e l m é t o d o
t r a d ic io n a l p o r e s p e c t r o f o t o m e t r ía
v is ib le
p a r a la
d e t e r m in a c ió n d e c o b r e . A d e m á s d e l m é t o d o u t iliz a d o e n e l la b o r a t o r io d e l
D e p a r t a m e n t o d e T o x ic o lo g ía d e la F a c u lt a d d e C ie n c ia s Q u ím ic a s y F a r m a c ia d e la
U n iv e r s id a d d e S a n C a r lo s d e G u a t e m a la , e x t r a íd o d e l M a n u a l d e P e r k in E lm e r
m e n c io n a d o a n t e r io r m e n t e , s e e n c u e n t r a n a lg u n o s o t r o s m é t o d o s c o n v a r ia c io n e s e n
c u a n t o a c o n d ic io n e s d e l e q u ip o o m a n e jo d e la s m u e s t r a s b io ló g ic a s u o t r a s m a t r ic e s ,
p a r a d e t e r m in a r la s c o n c e n t r a c io n e s d e l a n a lit o r e q u e r id o , e n e s t e c a s o e l c o b r e .
P e r e ir a , A .S ., e n e l 2 0 1 1 , u t iliz a d e ig u a l m a n e r a e l m é t o d o d e e s p e c t r o m e t r ía p o r
a b s o r c ió n a t ó m ic a c o n la m o d if ic a c ió n d e la f a s e s ó lid a y la s c o n d ic io n e s d e la is o t e r m a
e n e l e q u ip o , a d e m á s d e la p r e c o n c e n t r a c ió n d e la m u e s t r a a n t e s d e in y e c t a r la e n e l
e q u ip o . ( P e r e ir a , A .S . 2 0 1 1 ) .
S e r e a liz ó u n e s t u d io e n d o n d e s e u t iliz a n t é c n ic a s d e e s t a b iliz a c ió n d e la m u e s t r a e n e l
a ñ o 2 0 1 0 , p o r S a r d a n s , J ., e n e s t e s e p r e c o n c e n t r a n lo s a n a lit o s a f in d e in c r e m e n t a r la
s e n s ib ilid a d y d is m in u ir in t e r f e r e n c ia s e n e l e q u ip o d e a b s o r c ió n a t ó m ic a y p o r lo t a n t o
a u m e n t a r la r e p r o d u c ib ilid a d d e lo s r e s u lt a d o s . ( S a r d a n s , J . 2 0 1 0 ) .
J u á r e z , J .G . r e a liz ó e n e l 2 0 0 3 la v a lid a c ió n d e d o s m é t o d o s e s p e c t r o f o t o m é t r ic o s p a r a
c u a n t if ic a r c o b r e e n
su e ro , e l d e
d ie t ild it io c a r b a m a t o
de
s o d io
y el de
la
o x a lid ih id r a z in a , e n e l la b o r a t o r io d e l D e p a r t a m e n t o d e T o x ic o lo g ía d e la F a c u lt a d d e
C ie n c ia s Q u ím ic a s y F a r m a c ia . ( J u a r e z , J .G . 2 0 0 3 ) .
E n e l a ñ o 2 0 0 1 , R a h m a n , M . y R o b e r t , A .K ., im p le m e n t a r o n e l m é t o d o b a s a d o e n la
e x t r a c c ió n d e a c e t a t o d e c o b r e -p ir r o lid in a y e n la p u lv e r iz a c ió n a la lla m a d e l e x t r a c t o
o r g á n ic o , n o u t iliz a m u e s t r a s b io ló g ic a s , p e r o s í e l m é t o d o d e e s p e c t r o m e t r ía d e
a b s o r c ió n a t ó m ic a y t r a t a n d o la s m u e s t r a s d e e s t a m a n e r a p r o p o r c io n a u n a u m e n t o
s ig n if ic a t iv o d e la s e n s ib ilid a d d e l e q u ip o . ( R a h m a n , M ., R o b e r t , A .K . 2 0 0 1 ) .
6
D a w s o n , J .B ., E llis , D .J ., y N e w t o n , H .J ., e n 1 9 6 8 im p le m e n t a r o n u n a v a r ia n t e d e l
m é t o d o t r a d ic io n a l d e d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n e l q u e la c o n c e n t r a c ió n d e l m e t a l e n
la m u e s t r a o r ig in a l s e d e t e r m in a a p a r t ir d e u n a e x t r a p o la c ió n d e la a b s o r b a n c ia f r e n t e
a l a n a lit o a ñ a d id o ; e n e s t a v a r ia n t e , la c a n t id a d d e c o b r e s e d e t e r m in a p o r a d ic io n e s
e s t á n d a r d e d if e r e n t e s c o n c e n t r a c io n e s d e la m u e s t r a e n in v e s t ig a c ió n . ( D a w s o n , J .B .,
E llis , D .J ., y N e w t o n , H .J . 1 9 6 8 ) .
E n 1 9 6 7 s e r e a liz ó la d e t e r m in a c ió n d e c o b r e p o r m e d io d e s o lu c io n e s e s t á n d a r y
d is t in t a s d ilu c io n e s p a r a lu e g o u t iliz a r e l m é t o d o d e e s p e c t r o m e t r ía d e a b s o r c ió n
a t ó m ic a . ( P a r k e r , M .M ., H u m o lle r , F .L . y M a h le r , D .J . 1 9 6 7 ) .
7
4 . J U S T IF IC A C IÓ N
E l a n á lis is d e la b o r a t o r io e n lo s c a s o s d e in t o x ic a c io n e s d e o r ig e n a c c id e n t a l a m b ie n t a l,
a c c id e n t a l o c u p a c io n a l o b ie n e n f e r m e d a d e s a s o c ia d a s a s u s t a n c ia s q u ím ic a s c o m o e l
c o b r e , p e r m it e a l m é d ic o p r o p o r c io n a r e l t r a t a m ie n t o a d e c u a d o a l p a c ie n t e q u e lle g a a l
s e r v ic io h o s p it a la r io .
E s f u n d a m e n t a l c o n t a r c o n m e t o d o lo g ía s v a lid a d a s , y a q u e e s la ú n ic a m a n e r a e n q u e
p u e d e c o n f ir m a r s e m e d ia n t e e v id e n c ia o b je t iv a , q u e e l m é t o d o c u m p le c o n lo s
r e q u is it o s p a r a s u u t iliz a c ió n o a p lic a c ió n e s p e c íf ic a p r e v is t a .
P o r lo t a n t o , la p r in c ip a l f in a lid a d d e la v a lid a c ió n q u e s e lle v ó a c a b o , f u e v e r if ic a r ,
c o n f ir m a r y a s e g u r a r q u e lo s r e s u lt a d o s o b t e n id o s p o r e l m é t o d o e v a lu a d o , e n e s t e
c a s o la d e t e r m in a c ió n d e c o b r e p o r e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a , s o n
c o n f ia b le s , e x a c t o s y p r e c is o s , in f o r m a c ió n in d is p e n s a b le p a r a e l m é d ic o a l e m it ir u n
d ia g n ó s t ic o d if e r e n c ia l e n lo s c a s o s e n q u e s e e n c u e n t r e n v a lo r e s a n o r m a le s d e e s t e
e le m e n t o .
8
5 . O B J E T IV O S
4 .1 O B J E T I V O G E N E R A L :
V a lid a r e l m é t o d o d e d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n m u e s t r a s d e s u e r o p o r m e d io d e
e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a c o n t é c n ic a d e lla m a .
4 .2 O B J E T I V O S E S P E C Í F I C O S :
4 .2 .1 E v a lu a r la s c a r a c t e r ís t ic a s d e d e s e m p e ñ o : lin e a lid a d , e x a c t it u d , r e p e t ib ilid a d ,
p r e c is ió n , lím it e d e d e t e c c ió n , lím it e d e c u a n t if ic a c ió n y r a n g o d e l m é t o d o p a r a
m e d ir c o b r e e n s u e r o p o r m e d io d e e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a .
4 .2 .2 D e f in ir la s c o n d ic io n e s ó p t im a s d e l m é t o d o y d e l e q u ip o p a r a lo g r a r
r e s u lt a d o s a d e c u a d o s q u e c u m p la n c o n lo s p a r á m e t r o s r e q u e r id o s .
9
6 . H IP Ó T E S IS
E l m é t o d o p a r a d e t e r m in a r c o b r e p o r e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a
u t iliz a d o e n e l L a b o r a t o r io d e l D e p a r t a m e n t o d e T o x ic o lo g ía d e la F a c u lt a d d e C ie n c ia s
Q u ím ic a s y F a r m a c ia d e la U n iv e r s id a d d e S a n C a r lo s d e G u a t e m a la c u m p le c o n lo s
p a r á m e t r o s d e lin e a lid a d , e x a c t it u d , r e p e t ib ilid a d y p r e c is ió n , p a r a s e r c o n s id e r a d o
c o m o u n m é t o d o d e a n á lis is v á lid o y c o n f ia b le .
10
7 . M A T E R IA L E S Y M É T O D O S
6 .1 U N I V E R S O D E T R A B A J O :
M e t o d o lo g ía s p a r a m e d ic ió n d e c o b r e e n s u e r o p o r e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e
a b s o r c ió n a t ó m ic a e n t é c n ic a d e lla m a .
6 .2 M U E S T R A :
M u e s t r a s d e s u e r o f o r t if ic a d a s c o n e s t á n d a r d e c o b r e e n lo s n iv e le s e s t a b le c id o s .
6 .3 M A T E R I A L E S Y E Q U I P O
6 .3 .1 M A T E R I A L E S
•
H o ja s
•
Ú t ile s d e o f ic in a
•
C o m p u ta d o ra
•
Im p re s o ra
•
M a n u a l P e r k in E lm e r 1 9 6 4 -2 0 0 0 L if e a n d A n a ly t ic a l S c ie n c e s .
6 .3 .2 C R I S T A L E R Í A Y E Q U I P O
•
E s p e c t r o f o t ó m e t r o d e a b s o r c ió n a t ó m ic a m a r c a P e r k in E lm e r , M o d e lo A A n a ly s t 7 0 0 c o n t é c n ic a d e lla m a .
•
B a la n z a A n a lít ic a S h im a d z u .
•
V a s o s d e p r e c ip it a r .
•
P ro b e ta s.
•
B a lo n e s a f o r a d o s d e 1 0 , 5 0 y 1 0 0 m L .
•
P ip e t a s v o lu m é t r ic a s a u t o m á t ic a s d e 0 .1 -1 m L y 0 .0 1 -0 .1 m L
•
P u n t a s p a r a p ip e t a s a u t o m á t ic a s .
11
•
P ip e t a s s e r o ló g ic a s .
•
B u lb o s p a r a p ip e t a s .
•
G u a n t e s d e lá t e x .
•
G r a d illa s .
•
T u b o s d e v id r io .
•
E s p á t u la s .
•
A g it a d o r e lé c t r ic o .
•
C e n t r íf u g a .
•
C a m p a n a d e e x t r a c c ió n .
6 .3 .3 R E A C T I V O S
•
A g u a d e s t ila d a e n v id r io .
•
E s t á n d a r c o m e r c ia l d e c o b r e : 1 0 0 0 m g /L
•
S o lu c i ó n G lic e r o l 1 0 % v / v e n a g u a .
•
G a s e s : a c e t ile n o y a ir e c o m p r im id o .
6 .4 M É T O D O
6 .4 .1 P r e p a r a c i ó n d e la m u e s t r a :
D ilu ir la m u e s t r a d e s u e r o c o n a g u a d e s t ila d a e n v id r io 1 :1
6 .4 .2 S o lu c i ó n e s t á n d a r d e c o b r e e n g li c e r o l p a r a c u r v a d e c a li b r a c i ó n : 1 0 0 m g / L
T r a n s f e r ir 1 m L d e la s o lu c ió n e s t á n d a r ( 1 0 0 0 m g /L ) a u n b a ló n v o lu m é t r ic o
d e 1 0 m L y lle v a r a v o lu m e n c o n g lic e r o l a l 1 0 % v / v .
12
6 .4 .3 S o lu c i ó n e s t á n d a r d e c o b r e e n a g u a p a r a f o r t i f i c a r la s m u e s t r a s d e s u e r o :
10 0 m g /L :
T r a n s f e r ir 1 m L d e la s o lu c ió n e s t á n d a r ( 1 0 0 0 m g /L ) a u n b a ló n v o lu m é t r ic o
d e 1 0 m L y lle v a r a v o lu m e n c o n a g u a d e s t ila d a .
6 .4 .4 B la n c o :
U t iliz a r c o m o b la n c o u n a s o lu c ió n d e g lic e r o l 1 0 % v / v e n a g u a .
6 .4 .5 P r e p a r a c i ó n d e la C u r v a d e C a li b r a c i ó n :
T r a n s f e r ir la c a n t id a d e n µ L n e c e s a r ia d e la s o lu c ió n d e c o b r e e n g lic e r in a
1 0 0 m g / L e n b a lo n e s d e 1 0 m L y a f o r a r c o n g lic e r o l 1 0 % v / v , s e g ú n la t a b la q u e
s e p r e s e n t a a c o n t in u a c ió n :
T a b la N o . 1 N iv e le s p a r a C u r v a d e C a lib r a c ió n
N iv e l
C o n c e n t r a c ió n
D im e n s io n a l
µ L d e s o l. d e c o b r e
1 0 0 m g / L e n g li c e r o l a l
10 % v /v
1
10
µ g /d L
10
2
25
µ g /d L
25
3
50
µ g /d L
50
4
10 0
µ g /d L
10 0
5
15 0
µ g /d L
15 0
6
200
µ g /d L
200
7
250
µ g /d L
250
8
300
µ g /d L
300
9
400
µ g /d L
400
F u e n t e : D a t o s E x p e r im e n t a le s
13
6 .4 .6 P r e p a r a c i ó n d e la s m u e s t r a s f o r t i f i c a d a s :
S e a n a liz a r o n m u e s t r a s s é r ic a s c o n c o n c e n t r a c io n e s d e c o b r e e s t a b le c id a s
d e lo s n iv e le s
s e ñ a la d o s a c o n t in u a c ió n ,
a f in d e d e t e r m in a r lo s
p a r á m e t r o s n e c e s a r io s p a r a la v a lid a c ió n .
T r a n s f e r ir 1 m L d e l s u e r o a t u b o s d e v id r io y f o r t if ic a r c o n 1 m L d e lo s
e s t á n d a r e s p r e p a r a d o s e n a g u a ( s o lu c ió n e s t á n d a r d e c o b r e e n a g u a 1 0 0
m g /L ).
T a b la N o . 2 R a n g o d e c o n c e n t r a c io n e s d e c o b r e a e v a lu a r .
N i v e l E s t a b le c i d o
C o n c e n t r a c ió n d e
D im e n s io n a l
c o b r e e n la M u e s t r a
µ L d e s o l. d e
co b re
10 0 m g /L e n
agua
D e b a j o d e lo
10
µ g /d L
10
n o rm a l
25
µ g /d L
25
50
µ g /d L
50
75
µ g /d L
75
10 0
µ g /d L
10 0
125
µ g /d L
125
16 0
µ g /d L
16 0
A r r i b a d e lo
200
µ g /d L
200
n o rm a l
250
µ g /d L
250
300
µ g /d L
300
R a n g o n o rm a l
F u e n t e : D a t o s E x p e r im e n t a le s
14
6 .4 .7 C o n d i c i o n e s p a r a la D e t e r m i n a c i ó n d e C o b r e .
6 .4 .7 .1 L la m a r e c o m e n d a d a :
A ir e -a c e t ile n o , o x id a n t e ( m a g r a , a z u l) .
T a b la N o . 3 C o n d ic io n e s p a r a D e t e r m in a c ió n d e c o b r e
L o n g it u d d e
A b e rtu ra
R u id o
C o n c e n t ra c ió n
V e r if ic a c i ó n d e
Rango
onda
(n m )
R e la t iv o
C a r a c t e r ís t ic a
c o n c e n tra c ió n
lin e a l
m g /L
c a r a c t e r í s t ic a
m g /L
( nm )
m g /L
3 2 4 .8
0 .7
1 .0
0 .0 7 7
4 .0
5 .0
F u e n t e : M a n u a l P e r k in E lm e r 1 9 6 4 -2 0 0 0 L if e a n d A n a ly t ic a l S c ie n c e s
6 .5 D I S E Ñ O E S T A D Í S T I C O
6 .5 .1 L i n e a li d a d :
S e d e t e r m in ó a p a r t ir d e la r e la c ió n lin e a l e n t r e la s e ñ a l d e l e q u ip o y la
c o n c e n t r a c ió n d e c o b r e e n c o n t r a d a , m e d ia n t e la e v a lu a c ió n d e 9 e s t á n d a r e s
( v e r T a b la n o . 1 ) r e a liz a n d o t r e s r é p lic a s p o r c a d a u n o d e e llo s . L o s d a t o s
f u e r o n s o m e t id o s a u n a n á lis is r e g r e s ió n lin e a l la c u a l s e e v a lu ó p o r m e d io d e l
c o e f ic ie n t e d e d e t e r m in a c ió n r 2 y a n á lis is d e v a r ia n z a . ( D e p a r t a m e n t o f H e a lt h
a n d H u m a n S e r v ic e s , F o o d a n d D r u g A d m in is t r a t io n , C e n t e r f o r D r u g
E v a lu a t io n a n d R e s e a r c h a n d C e n t e r f o r V e t e r in a r y M e d ic in e , 2 0 0 1 ) . A d e m á s s e
g r a f ic a r o n lo s r e s id u a le s d e la r e g r e s ió n p a r a o b s e r v a r s i h u b o p o s ib ilid a d d e
e n c o n t r a r s e s g o y s i lo s d a t o s p o s e e n u n a d is t r ib u c ió n n o r m a l.
15
6 .5 .2 E x a c t it u d :
S e c a lc u ló m e d ia n t e e l p o r c e n t a je d e r e c u p e r a c ió n o b t e n id o a p a r t ir d e
m u e s t r a s a 1 0 c o n c e n t r a c io n e s d if e r e n t e s , c o m o s e o b s e r v a e n la T a b la n o .2 y
5 r é p lic a s d e c a d a u n a , a p lic a n d o la s ig u ie n t e f ó r m u la
C a n t id a d e n c o n t r a d a ( µ g / d L ) * ( 1 0 0 % ) / C a n t id a d o r ig in a l ( µ g / d L )
= % de
r e c u p e r a c ió n
S e e v a lu ó m e d ia n t e la p r u e b a d e h ip ó t e s is d e la s ig u ie n t e f o r m a , a p lic a n d o a
e s t e a n á lis is la P r u e b a d e T d e S t u d e n t p a r a u n a m u e s t r a , d e d o s c o la s c o n u n
n iv e l d e c o n f ia n z a d e l 9 5 % .
H o : µ = 1 0 0 % ( d e r e c u p e r a c ió n )
H a : µ ≠ 1 0 0 % ( d e r e c u p e r a c ió n )
T a m b ié n s e c a lc u la r o n lo s in t e r v a lo s d e c o n f ia n z a d e l 9 5 % d e la m e d ia d e l
p o r c e n t a je d e r e c u p e r a c ió n .
6 .5 .3 R e p e t i b i li d a d :
S e e v a lu ó u t iliz a n d o u n a s o la m u e s t r a c o n t a m in a d a , e v a lu á n d o la m e d ia n t e 1 0
r é p lic a s d e la m is m a , b a jo la s m is m a s c o n d ic io n e s , s o m e t ie n d o lo s r e s u lt a d o s
a l c á lc u lo d e m e d ia , d e s v ia c ió n e s t á n d a r y c o e f ic ie n t e d e v a r ia c ió n e l c u a l
d e b ió c o r r e s p o n d e r a u n v a lo r < 5 .0 % ( A m e r ic a n P u b lic H e a lt h A s s o c ia t io n ,
A m e r ic a n W a t e r w o r k s A s s o c ia t io n , W a t e r E n v ir o n m e n t F e d e r a t io n , 1 9 9 8 ) .
6 .5 .4 P e r f i l d e P r e c i s i ó n :
A p a r t ir d e la s m u e s t r a s c o n t a m in a d a s c o n c o b r e s e ñ a la d a s e n la T a b la n o . 2
c o n 5 r é p lic a s c a d a u n a , s e c a lc u ló e l c o e f ic ie n t e d e v a r ia c ió n p a r a c a d a u n a d e
la s c o n c e n t r a c io n e s e v a lu a d a s .
16
6 .5 .5 L í m i t e d e D e t e c c i ó n :
S e d e t e r m in ó a p a r t ir d e la m e n o r c o n c e n t r a c ió n d e c o b r e q u e p u e d o
d e t e c t a r s e p e r o n o n e c e s a r ia m e n t e c u a n t if ic a r s e m e d ia n t e la s ig u ie n t e
f ó r m u la :
Donde.
σ = d e s v ia c ió n e s t á n d a r d e la r e s p u e s t a d e l b la n c o
S = L a p e n d ie n t e d e la c u r v a d e c a lib r a c ió n ( H o lc o m b e , H ., T e d d in g t o n , L .G ,
1 9 9 8 .) ( A r g e n t in a . O r g a n is m o A r g e n t in o d e A c r e d it a c ió n O A A , 2 0 0 8 ) .
6 .5 .6 L ím i t e d e C u a n t i f i c a c i ó n :
S e c a lc u ló a p a r t ir d e l v a lo r m e n o r d e l a n a lit o e n la m u e s t r a , q u e p u e d e s e r
d e t e r m in a d o c o n a c e p t a b le p r e c is ió n y e x a c t it u d .
Donde.
σ = d e s v ia c ió n e s t á n d a r d e la r e s p u e s t a d e l b la n c o
S = L a p e n d ie n t e d e la c u r v a d e c a lib r a c ió n
C r it e r io d e p r e c is ió n d e u n C V = 1 0 % e n e l lím it e d e c u a n t if ic a c ió n . ( A r g e n t in a .
O r g a n is m o A r g e n t in o d e A c r e d it a c ió n O A A ., 2 0 0 8 ) .
6 .5 .7 R a n g o
S e d e t e r m in ó a p a r t ir d e la m e n o r a la c o n c e n t r a c ió n d e c o b r e q u e e l e q u ip o
p u d o d e t e c t a r ( A r g e n t in a . O r g a n is m o A r g e n t in o d e A c r e d it a c ió n O A A ., 2 0 0 8 ) .
17
8. RESU LTADO S
P a r a la d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n s u e r o p o r e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a
c o n t é c n ic a d e lla m a s e r e a liz ó in ic ia lm e n t e u n a c u r v a d e c a lib r a c ió n p r e p a r a n d o
e s t á n d a r e s d e c o b r e e n s o lu c ió n d e g lic e r o l 1 0 % v / v a c o n c e n t r a c io n e s d e 1 0 , 2 5 , 5 0 , 1 0 0 ,
1 5 0 , 2 0 0 , 2 5 0 y 4 0 0 µ g / d L , t r a b a ja n d o c a d a u n o p o r t r ip lic a d o .
L o s s ig u ie n t e s d a t o s s e s o m e t ie r o n a u n a n á lis is d e r e g r e s ió n lin e a l o b t e n ié n d o s e u n
c o e f ic ie n t e d e c o r r e la c ió n d e 0 .9 9 9 9 , u n c o e f ic ie n t e d e d e t e r m in a c ió n d e 0 .9 9 9 9 1 7 3 2 4
y u n v a lo r d e p c o r r e s p o n d ie n t e a 2 .6 5 E -5 1 s e g ú n e l a n á lis is d e v a r ia n z a . T a m b ié n s e
r e a liz ó u n a g r á f ic a d e r e s id u a le s d e la r e g r e s ió n m o s t r a d o s e n la g r á f ic a N o . 2 d o n d e s e
e n c o n t r ó q u e e l e r r o r s e d is t r ib u y e s im é t r ic a m e n t e , la d is t r ib u c ió n e s n o r m a l y n o h a y
s e s g o p a r a e l m o d e lo d e r e g r e s ió n .
T A B L A N o . 1 D A T O S O B T E N ID O S D E C U R V A D E C A L IB R A C IÓ N P A R A E S T Á N D A R E S D E
C O B R E L IN E A L ID A D
C o n c e n t r a c ió n
T e ó r ic a ( µ g /d L )
A b s o r b a n c ia
e n co n tra d a
S .D
C .V . %
S td . 10
0 .0 0 4 2
0 .0 0 0 6
1 4 .2 9
S td . 25
0 .0 1 0 2
0 .0 0 0 2
1 .9 6
S td . 5 0
0 .0 2 0 9
0 .0 0 0 2
0 .9 5
S td . 10 0
0 .0 4 1 7
0 .0 0 0 1
0 .2 4
S td . 15 0
0 .0 6 3 9
0 .0 0 0 2 5 2
0 .3 9
S td . 20 0
0 .0 8 3 9
0 .0 0 0 0 6
0 .0 7
S td . 25 0
0 .1 0 3 9
0 .0 0 0 3
0 .2 9
S td . 3 0 0
0 .1 2 5 0
0 .0 0 0 6
0 .4 8
S td . 4 0 0
0 .1 6 7 0
0 .0 0 0 4
0 .2 4
F u e n t e : b a s e d e d a t o s , m a n e jo d e d a t o s e n E x c e l
S .D .: D e s v ia c ió n E s t á n d a r
C .V .: C o e f ic ie n t e d e V a r ia c ió n
18
T A B L A N o . 2 E C U A C IÓ N D E L A R E C T A
C o e f ic ie n t e d e c o r r e la c ió n
r : 0 .9 9 9 9 5 8 6 6 1
C o e f ic ie n t e d e d e t e r m in a c ió n
r 2 :0 .9 9 9 9 1 7 3 2 4
M o d e lo d e r e g r e s ió n
Y = 0 .0 0 0 1 + 0 .0 0 0 4 X
V a lo r p a n á lis is d e v a r ia n z a d e la r e g r e s ió n
2 .6 5 E - 5 1
F u e n t e : B a s e d e d a t o s d e l e s t u d io , a n á lis is e n E x c e l
A c o n t in u a c ió n s e e v a lu a r o n m u e s t r a s , c o n d is t in t a s c o n c e n t r a c io n e s d e c o b r e e n
s u e r o , t o m a n d o e n c u e n t a lo s v a lo r e s n o r m a le s d e c o b r e e n s u e r o 7 0 -1 6 0 μ g / d L ( M e jia ,
O .R ., R u iz , M ., C la v ijo , D ., 2 0 0 6 ) , r e a liz a n d o d e t e r m in a c io n e s d e t r e s n iv e le s p o r d e b a jo
y p o r a r r ib a d e lo n o r m a l c o n 5 r é p lic a s d e c a d a n iv e l.
E n e l c u a d r o s ig u ie n t e s e e n c u e n t r a n lo s c á lc u lo s d e r e g r e s ió n lin e a l p a r a e v a lu a r
lin e a lid a d d e lo s r e s u lt a d o s d e la s m u e s t r a s d e s u e r o , e n c o n t r á n d o s e u n c o e f ic ie n t e d e
c o r r e la c ió n r d e : 0 .9 9 9 9 2 8 2 1 1 y u n c o e f ic ie n t e d e d e t e r m in a c ió n d e 0 .9 9 9 8 5 6 4 2 8 c o n
u n v a lo r d e p d e 2 .5 8 E - 9 2 . T a m b ié n s e m u e s t r a e l a n á lis is d e r e s id u o s e n la g r á f ic a N o . 4 ,
o b s e r v á n d o s e u n a d is t r ib u c ió n n o r m a l y s in s e s g o .
T A B L A N o . 3 D A T O S O B T E N ID O S D E M U E S T R A S S É R IC A S D E C O B R E L IN E A L ID A D
C o n c e n t r a c ió n
C o n c e n t r a c ió n
M u e stra
T e ó r ic a ( µ g /d L )
O b t e n id a ( µ g /d L )
1
10
4 .5 0
2
25
2 0 .1 5
3
50
4 9 .9 1
4
75
7 5 .0 3
5
10 0
9 8 .5 1
6
125
1 2 3 .9 9
7
16 0
1 6 0 .0 7
8
200
2 0 0 .2 3
9
250
2 5 1 .8 7
10
300
2 9 9 .2 7
F u e n t e : b a s e d e d a t o s , m a n e jo d e d a t o s e n E x c e l
S .D
C .V . %
A b s o r b a n c ia
1 .3 6
3 0 .0
0 .0 3 2
1 .4 4
7 .0
0 .0 3 6
1 .6 9
3 .0
0 .0 4 3
1 .5 8
2 .0
0 .0 4 9
2 .1 4
2 .0
0 .0 5 4
1 .2 5
1 .0
0 .0 6 0
2 .4 0
1 .5
0 .0 6 9
1
.3
9
0
.7
0 .0 7 8
3 .6 2
1 .4
0 .0 9 1
1 .1 2
0 .4
0 .1 0 2
S .D .: D e s v ia c ió n E s t á n d a r
C .V .: C o e f ic ie n t e d e V a r ia c ió n
19
T A B L A N o . 4 E C U A C IÓ N D E L A R E C T A
C o e f ic ie n t e d e c o r r e la c ió n
R : 0 .9 9 9 9 2 8 2 1 1
C o e f ic ie n t e d e d e t e r m in a c ió n
R 2 : 0 .9 9 9 8 5 6 4 2 8
M o d e lo d e r e g r e s ió n
y = 0 .0 0 0 2 x + 0 .0 3 1 3
V a lo r p a n á lis is d e v a r ia n z a d e la
r e g r e s ió n
2 .5 8 E - 9 2
F u e n t e : F u e n t e : B a s e d e d a t o s d e l e s t u d io , a n á lis is e n E x c e l
P a r a e v a lu a r la e x a c t it u d d e l m é t o d o s e c a lc u ló e l p o r c e n t a je d e r e c u p e r a c ió n d e c a d a
r e p e t ic ió n d e la s m u e s t r a s d e s u e r o , o b t e n ié n d o s e u n r a n g o d e 4 4 .9 6 % a 1 0 0 .7 5 % . S e
e n c o n t r ó q u e c o n c e n t r a c io n e s d e 1 0 y 2 5 μ g / d L p r e s e n t a r o n
u n p o r c e n t a je d e
r e c u p e r a c ió n d e 4 4 .9 6 y 8 0 .5 9 % r e s p e c t iv a m e n t e m ie n t r a s q u e p a r a c o n c e n t r a c io n e s a
p a r t ir d e 5 0 μ g / d L e l r a n g o d e p o r c e n t a je d e r e c u p e r a c ió n e s d e 9 8 .5 1 a 1 0 0 .7 5 % .
T a m b ié n s e o b s e r v a n d e s v ia c io n e s e s t á n d a r d e 0 .3 7 a 1 3 .6 0 o b ie n d e 0 .3 7 a 3 .3 8 s in
t o m a r e n c u e n t a la s c o n c e n t r a c io n e s d e 1 0 y 2 5 μ g / d L y c o e f ic ie n t e s d e v a r ia c ió n e n u n
r a n g o d e 0 .4 % a 3 0 % o d e 0 .4 % a 3 .0 % s in t o m a r e n c u e n t a la s p r im e r a s d o s
c o n c e n t r a c io n e s .
20
T A B L A N o . 5 D A T O S O B T E N ID O S D E M U E S T R A S S É R IC A S D E C O B R E E X A C T IT U D
M u e stra
C o n c e n t r a c ió n
T e ó r ic a ( µ g /d L )
C o n c e n t r a c ió n
O b t e n id a ( µ g /d L )
1
10
4 .5 0
2
25
2 0 .1 5
3
50
4 9 .9 1
4
75
7 5 .0 3
5
10 0
9 8 .5 1
6
125
1 2 3 .9 9
7
16 0
1 6 0 .0 7
8
200
2 0 0 .2 3
9
250
2 5 1 .8 7
10
300
2 9 9 .2 7
F u e n t e : b a s e d e d a t o s , m a n e jo d e d a t o s e n E x c e l
%
A b s o r b a n c ia
R e c u p e r a c ió n
4 4 .9 6 %
S .D .:1 3 .6 0
0 .0 3 2
C .V .:3 0 .0
8 0 .5 9 %
S .D .:5 .7 5
0 .0 3 6
C .V .: 7 .0
9 9 .8 2 %
S .D .:3 .3 8
0 .0 4 3
C .V : 3 .0
1 0 0 .0 4 %
S .D .: 2 .1 1
0 .0 4 9
C .V .: 2 .0
9 8 .5 1 %
S .D .:2 .1 4
0 .0 5 4
C .V .:2 .0
9 9 .1 9 %
S .D .:1 .0 0
0 .0 6 0
C .V .: 1 .0
1 0 0 .0 5 %
S .D .: 1 .5 0
0 .0 6 9
C .V .:1 .5
1 0 0 .1 2 %
S .D .:0 .7 0
0 .0 7 8
C .V .: 0 .7
1 0 0 .7 5 %
S .D .:1 .4 5
0 .0 9 1
C .V .: 1 .4
9 9 .7 6 %
S .D .:0 .3 7
0 .1 0 2
C .V . : 0 .4
S .D .: D e s v ia c ió n E s t á n d a r
C .V .: C o e f ic ie n t e d e V a r ia c ió n
21
S e a p lic ó a d e m á s u n a n á lis is d e v a r ia n z a a f in d e c o n t r a s t a r e l p o r c e n t a je d e
r e c u p e r a c ió n a lo s d if e r e n t e s n iv e le s d e c o n c e n t r a c ió n y s u v a r ia c ió n e n t r e g r u p o s
e n c o n t r á n d o s e u n v a lo r d e p d e 5 .8 5 5 7 E -2 1 .
T A B L A N o . 6 A N Á L IS IS D E V A R IA N Z A P A R A C O N T R A S T A R E L P O R C E N T A J E D E
R E C U P E R A C I Ó N A D I F E R E N T E S N I V E L E S D E C O N C E N T R A C I Ó N , N I V E L D E C O N F IA N Z A
D EL 95%
A n á li s i s d e v a r i a n z a
V a lo r p
V a r ia c ió n e n t r e g r u p o s
5 .8 5 5 7 E -2 1
F u e n t e : b a s e d e d a t o s , m a n e jo d e d a t o s e n E x c e l
S e a p lic ó t a m b ié n la p r u e b a T p a r a e v a lu a r la s d is t in t a s c o n c e n t r a c io n e s y s e o b t u v o u n
v a lo r d e p d e 0 .0 0 1 e v a lu a n d o c o n c e n t r a c io n e s d e s d e 1 0 a 3 0 0 μ g / d L y u n v a lo r d e p d e
0 .1 2 7 e v a lu á n d o s e c o n c e n t r a c io n e s ú n ic a m e n t e a p a r t ir d e 5 0 h a s t a 3 0 0 μ g / d L .
TA BLA N o. 7 VA LO RES P D E LA S PRU EBA S D E T D E U NA M U ESTRA CO N TRA U N VA LO R
C O N O C ID O , P A R A C O N T R A S T A R E L P O R C E N T A J E D E R E C U P E R A C IÓ N (µ = 10 0 % ), N IV E L
D E C O N F IA N Z A D E L 9 5 % .
R a n g o s d e c o n c e n t r a c ió n
V a lo r e s p
10 a 3 0 0 u g /d L (n = 5 0 )
0 .0 0 1
5 0 a 3 0 0 u g /d L (n = 4 0 )
0 .1 2 7
F u e n t e : b a s e d e d a t o s , a n á lis is e n S P S S 1 9
TA BLA N o. 8
R E C U P E R A C IÓ N
IN T E R V A L O S D E C O N F IA N Z A
R a n g o s d e c o n c e n t r a c ió n
10 a 3 0 0 u g /d L (n = 5 0 )
5 0 a 3 0 0 u g /d L (n = 4 0 )
D EL 95% D EL PO R CEN TA JE D E
IC %
8 7 .3 8 6 a 9 7 .3 7 0
9 9 .2 1 4 a 1 0 0 .3 4 4
F u e n t e : b a s e d e d a t o s , a n á lis is e n E P I D A T 3 .1
22
E n c u a n t o a l p e r f il d e p r e c is ió n d e lo s d a t o s s e o b s e r v a q u e lo s v a lo r e s r e s p e c t iv o s a
t o d a s la s c o n c e n t r a c io n e s e v a lu a d a s p r e s e n t a n r e s u lt a d o s e n u n r a n g o p a r a e l
c o e f ic ie n t e d e v a r ia c ió n d e 0 .4 % a 3 0 % y d e 0 .4 % a 3 .0 % s in t o m a r e n c u e n t a la s
c o n c e n t r a c io n e s d e 1 0 y 2 5 μ g / d L . E s t o s d a t o s p r e s e n t a n u n a d e s v ia c ió n e s t á n d a r d e
1 .1 2 a 3 .6 2 t o m a n d o e n c u e n t a t o d a s la s c o n c e n t r a c io n e s e v a lu a d a s y a q u e n o s e
p r e s e n t ó m a y o r d if e r e n c ia e n lo s v a lo r e s d e la s c o n c e n t r a c io n e s d e 1 0 y 2 5 μ g / d L .
T A B L A N o . 9 D A T O S O B T E N ID O S D E M U E S T R A S S É R IC A S D E C O B R E P R E C IS IÓ N
C o n c e n t r a c ió n
C o n c e n t r a c ió n
M u e stra
T e ó r ic a ( µ g /d L )
O b t e n id a ( µ g /d L )
1
10
4 .5 0
2
25
2 0 .1 5
3
50
4 9 .9 1
4
75
7 5 .0 3
5
10 0
9 8 .5 1
6
125
1 2 3 .9 9
7
16 0
1 6 0 .0 7
8
200
2 0 0 .2 3
9
250
2 5 1 .8 7
10
300
2 9 9 .2 7
F u e n t e : b a s e d e d a t o s , m a n e jo d e d a t o s e n E x c e l
S .D
C .V . %
A b s o r b a n c ia
1 .3 6
3 0 .0
0 .0 3 2
1
.4
4
7 .0
0 .0 3 6
1 .6 9
3 .0
0 .0 4 3
1 .5 8
2 .0
0 .0 4 9
2 .1 4
2 .0
0 .0 5 4
1 .2 5
1 .0
0 .0 6 0
2 .4 0
1 .5
0 .0 6 9
1 .3 9
0 .7
0 .0 7 8
3 .6 2
1 .4
0 .0 9 1
1
.1
2
0
.4
0 .1 0 2
S .D .: D e s v ia c ió n E s t á n d a r
C .V .: C o e f ic ie n t e d e V a r ia c ió n
L a p r e c is ió n t a m b ié n s e e x p r e s a e n t é r m in o s d e r e p e t ib ilid a d p a r a lo c u a l s e r e a liz a r o n
1 0 r é p lic a s d e u n a m is m a m u e s t r a , c o n t r e s le c t u r a s d e c a d a u n a a f in d e d e t e r m in a r la
m e d ia y la d e s v ia c ió n e s t á n d a r d e é s t a s , la s c u a le s f u e r o n d e 1 0 3 .1 4 μ g / d L y
r e s p e c t iv a m e n t e .
3 .7 6
23
T A B L A N o . 10 D A T O S O B T E N ID O S D E V A R IA S R É P L IC A S D E U N A S O L A M U E S T R A P A R A
E V A L U A R R E P E T IB IL ID A D
R e p e t ic ió n
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
F u e n te :
C o n c e n t r a c ió n
E v a lu a d a µ g / d L
10 0
10 0
10 0
10 0
10 0
10 0
10 0
10 0
10 0
10 0
C o n c e n t r a c ió n
A b s o r b a n c ia
O b t e n id a µ g /d L
1 0 4 .1
0 .0 4 9 1
1 0 4 .2
0 .0 4 9 1
9 9 .1 8
0 .0 4 6 8
9 8 .8 2
0 .0 4 6 6
9 8 .9 9
0 .0 4 6 7
9 9 .2 0
0 .0 4 6 8
1 0 5 .6
0 .0 4 9 8
1 0 5 .0
0 .0 4 9 5
1 0 8 .8
0 .0 5 1 3
1 0 6 .8
0 .0 5 0 4
X : 1 0 3 .1 4
X : 0 .0 4 9
S .D .: 3 .7 6
C .V .:3 .6 4
b a s e d e d a t o s , m a n e jo d e d a t o s e n E x c e l
S .D .: D e s v ia c ió n E s t á n d a r
C .V .: C o e f ic ie n t e d e V a r ia c ió n
E n la t a b la q u e s e p r e s e n t a a c o n t in u a c ió n , a f in d e e s t a b le c e r e l lím it e d e d e t e c c ió n , s e
d e t a lla n lo s d a t o s u t iliz a d o s p a r a r e a liz a r lo s c á lc u lo s d e e s t e , a p a r t ir d e la s m u e s t r a s
s é r ic a s e v a lu a d a s , u t iliz a n d o la d e s v ia c ió n e s t á n d a r r e s id u a l d e la lín e a d e r e g r e s ió n y la
p e n d ie n t e d e la c u r v a ; o b t e n ié n d o s e a s í u n lím it e d e d e t e c c ió n a u n a c o n c e n t r a c ió n d e
4 .0 3 4 2 6 6 4 5 μ g / d L .
T A B L A N o . 1 1 L ÍM IT E D E D E T E C C IÓ N D E L M É T O D O
D e s v ia c ió n
D e v ia c ió n
e s t á n d a r * 3 .3
E stá n d a r
r e s i d u o s d e la
P e n d i e n t e d e la
R e s id u a l
r e g r e s ió n
cu rv a
0 .0 0 0 2 8 7 9 4
0 .0 0 0 9 5 0 2 0 4
0 .0 0 0 2 3 5 5 3 3
F u e n t e : b a s e d e d a t o s , m a n e jo d e d a t o s e n E x c e l
L ím it e d e d e t e c c ió n
4 .0 3 4 2 6 6 4 5 μ g / d L
24
U t iliz a n d o d e ig u a l f o r m a la c u r v a d e c a lib r a c ió n p a r a la s m u e s t r a s s é r ic a s , y a n á lis is
r e s id u a l s e d e t e r m in ó e l lím it e d e c u a n t if ic a c ió n e n u n a c o n c e n t r a c ió n d e 1 2 .2 2 μ g / d L
q u e p o r d e f in ic ió n s e in d ic a q u e a p a r t ir d e e s t a c o n c e n t r a c ió n lo s d a t o s o b t e n id o s
s e r á n p r e c is o s y e x a c t o s .
T A B L A N o . 1 2 L ÍM IT E D E C U A N T IF IC A C IÓ N D E L M É T O D O
D e s v ia c ió n
D e s v ia c ió n
E stá n d a r
e s tá n d a r * 10
P e n d i e n t e d e la
r e s id u a l
s e g ú n f ó r m u la
cu rv a
0 .0 0 0 2 8 7 9 4
0 .0 0 0 9 5 0 2 0 4
0 .0 0 0 2 3 5 5 3 3
F u e n t e : b a s e d e d a t o s , m a n e jo d e d a t o s e n E x c e l
L ím it e d e d e t e c c ió n
1 2 .2 2 5 0 4 9 8 5 μ g / d L
A d e m á s d e e v a lu a r t r e s n iv e le s p o r e n c im a d e lo s v a lo r e s n o r m a le s p a r a c o b r e e n s u e r o
s e p r o c e d ió a d e t e r m in a r la p r e c is ió n y e x a c t it u d p a r a v a lo r e s m a y o r e s a 3 0 0 μ g / d L
lle g a n d o h a s t a v a lo r e s d e 6 0 0 μ g / d L y a s í d e t e r m in a r e l r a n g o d e c o n c e n t r a c io n e s d e
c o b r e q u e p u e d e n c u a n t if ic a r s e e n e l e q u ip o .
A l e v a lu a r c o n c e n t r a c io n e s d e h a s t a 6 0 0 μ g / d L s e e n c o n t r ó e x a c t it u d p a r a e l m é t o d o
c o m o s e o b s e r v a e n la s ig u ie n t e t a b la :
T A B L A N o .1 3 C O N T R A S T E D E L P O R C E N T A J E D E R E C U P E R A C I Ó N D E M U E S T R A S C O N
C O N C E N T R A C IÓ N D E H A S T A 6 0 0 μ g /d L , P O R M E D IO D E U N A P R U E B A D E T D E
S T U D E N T C O N N I V E L D E C O N F IA N Z A D E 9 5 %
E x a c t it u d
P ru e b a T 2
c o la s
v a lo r p
0 .5 9 9
F u e n t e : b a s e d e d a t o s , a n á lis is d e d a t o s e n S P S S 1 9
S e d e t e r m in ó la p r e c is ió n p a r a e s t a s c o n c e n t r a c io n e s s e g ú n lo q u e s e in d ic a e n la t a b la
s ig u ie n t e .
25
T A B L A N o . 14 D A T O S O B T E N ID O S D E C O N C E N T R A C IO N E S E V A L U A D A S P O R E N C IM A
D E V A L O R E S N O R M A L E S D E C O B R E E S T A B L E C ID O S R A N G O
M u e stra
C o n c e n t r a c ió n
T e ó r ic a μ g /d L
C o n c e n t r a c ió n
O b t e n id a μ g /d L
7
320
2 9 9 .9 0
8
400
4 6 6 .5 8
9
500
5 1 3 .8 2
10
600
6 0 8 .0 2
F u e n t e : b a s e d e d a t o s , m a n e jo d e d a t o s e n E x c e l
%
R e c u p e r a c ió n
9 3 .7 2 %
S .D :1 .3 5
0 .0 8 5 9
C .V .:1 .4 %
X : 9 9 .6 4 %
S .D :8 .4 5
0 .1 0 6 4
C .V .:8 .4 %
X : 1 0 2 .7 6 %
S .D :1 .2 7
0 .1 3 0 5
C .V .:1 .0 %
X : 1 0 1 .3 4 %
S .D :0 .7 6
0 .1 5 0 1
C .V .:0 .7 %
S .D .: D e s v ia c ió n E s t á n d a r
C .V .: C o e f ic ie n t e d e V a r ia c ió n
A b s o r b a n c ia
S e p r e s e n t a a c o n t in u a c ió n la e x p r e s ió n d e la lin e a lid a d d e lo s d a t o s m e d ia n t e e l
m o d e lo d e r e g r e s ió n :
C o e f ic ie n t e d e c o r r e la c ió n
r: 1
C o e f ic ie n t e d e d e t e r m in a c ió n
r2: 1
M o d e lo d e r e g r e s ió n
y = 0 .0 0 0 2 x + 0 .0 2 3 3
F u e n t e : b a s e d e d a t o s , m a n e jo d e d a t o s e n E x c e l
26
Fuente: DatosExperim
entales
27
Fuente: DatosExperim
entales
28
Fuente: DatosExperim
entales
29
Fuente: DatosExperim
entales
30
Fuente: DatosExperim
entales
31
Fuente: DatosExperim
entales
1: Seevaluaronm
uestrasa3concentracionespordebajo, 4dentrodel rangoy3porencim
adelosvaloresnorm
alesdecobreensuero
sanguíneo.
32
Fuente: DatosExperim
entales
33
Fuente: DatosExperim
entales
34
Fuente: DatosExperim
entales
1
9 . D IS C U S IÓ N D E R E S U L T A D O S
P a r a lle v a r a c a b o la v a lid a c ió n d e e s t e m é t o d o s e e v a lu a r o n p a r á m e t r o s d e lin e a lid a d ,
e x a c t it u d , r e p e t ib ilid a d , p r e c is ió n y s e e s t a b le c ie r o n e l lím it e d e d e t e c c ió n , lím it e d e
c u a n t if ic a c ió n y r a n g o a f in d e c u m p lir c o n lo s o b je t iv o s y la f in a lid a d d e e s t a
in v e s t ig a c ió n .
P a r a e v a lu a r la li n e a li d a d , s e p r e p a r ó u n a c u r v a d e c a lib r a c ió n c o n e s t á n d a r e s d e c o b r e
a d is t in t a s c o n c e n t r a c io n e s e n u n r a n g o d e 1 0 a 4 0 0 µ g / d L c u b r ie n d o a s í e l in t e r v a lo d e
c o n c e n t r a c io n e s a e v a lu a r p o s t e r io r m e n t e e n m u e s t r a s d e s u e r o s a n g u ín e o .
S e t r a b a ja r o n e s t o s e s t á n d a r e s e n s o lu c io n e s d e g lic e r o l 1 0 % v / v
a f in d e ig u a la r la
v is c o s id a d d e l s u e r o t r a b a ja d o p o s t e r io r m e n t e y r e d u c ir v a r ia c io n e s e n la s le c t u r a s d e l
e q u ip o .
L u e g o d e l a n á lis is d e c o r r e la c ió n y d e r e g r e s ió n lin e a le s s e o b t u v o u n r d e 0 .9 9 9 9 y u n
r 2 : 0 .9 9 9 9 c o m o s e o b s e r v a e n la g r á f ic a n o . 1 . L a a s o c ia c ió n e n t r e la c o n c e n t r a c ió n
t e ó r ic a y la r e s p u e s t a d e l in s t r u m e n t o ( a b s o r b a n c ia ) , f u e m u y f u e r t e e n la m u e s t r a
a n a liz a d a y a c e p t a b le s e g ú n lo s p a r á m e t r o s e s t a b le c id o s p a r a la v a lid a c ió n d e lo s
m é t o d o s d e a n á lis is ( e l c o e f ic ie n t e d e c o r r e la c ió n d e b e s e r m a y o r a 0 .9 9 8 ) ( W illa r d , H .
e t .a l, 1 9 9 1 ) . E n o t r o s e s t u d io s s e h a n e n c o n t r a d o c o e f ic ie n t e s d e c o r r e la c ió n d e 0 .9 8 5
( J im é n e z M ., S c h o s in s k y , K ., 2 0 0 2 ) y d e 0 .9 9 8 p a r a d e t e r m in a c io n e s d e c o b r e e n a g u a ,
p o r m e d io d e e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a c o m o s e u t iliz a e n e s t a
in v e s t ig a c ió n . ( B la n e s , P . S ., B e n ít e z , M . E ., G im é n e z , M .C ., 2 0 0 4 ) .
E l c o e f ic ie n t e d e d e t e r m in a c ió n , p o r s u p a r t e in d ic a q u e e l m o d e lo m a t e m á t ic o d e
r e g r e s ió n lin e a l, r e p r e s e n t a d o p o r la e c u a c ió n Y = 0 .0 0 0 1 + 0 .0 0 0 4 X q u e s e o b s e r v a e n
la t a b la n o . 2 , s e a ju s t a m u y b ie n a lo s d a t o s e x p e r im e n t a le s p u e s e s t e m o d e lo e x p lic a
m á s d e l 9 9 .8 d e l e r r o r y t a m b ié n e s u n v a lo r a c e p t a b le p a r a la v a lid a c ió n d e m é t o d o s
a n a lít ic o s ( e l c o e f ic ie n t e d e d e t e r m in a c ió n d e b e s e r m a y o r a 0 .9 9 5 ) ( W illa r d , H . e t .a l,
2
1 9 9 1 ) . D e ig u a l m a n e r a s e e n c o n t r ó u n c o e f ic ie n t e d e d e t e r m in a c ió n d e 0 .9 9 7 s e g ú n u n
e s t u d io d e v a lid a c ió n p a r a e x t r a c c ió n y d e t e r m in a c ió n d e c o b r e p o r e s t e m is m o
m é t o d o e n a g u a s n a t u r a le s s u b t e r r á n e a s . ( B la n e s , P . S ., B e n ít e z , M . E ., G im é n e z ,
M .C .2 0 0 4 ) .
F in a lm e n t e , a l r e a liz a r u n a n á lis is d e v a r ia n z a p a r a la r e g r e s ió n , s e g ú n e l v a lo r p
e n c o n t r a d o , q u e f u e d e 2 .6 5 E -5 1 , s e o b s e r v a q u e e l m o d e lo d e r e g r e s ió n p la n t e a d o
t ie n e u n a a s o c ia c ió n e s t a d ís t ic a m e n t e s ig n if ic a t iv a c o n lo s d a t o s e x p e r im e n t a le s ( v a lo r
p < n iv e l d e s ig n if ic a n c ia ) , e s d e c ir , q u e e n la p o b la c ió n d e la q u e s e e x t r a jo la m u e s t r a ,
la a s o c ia c ió n e n t r e la a b s o r b a n c ia y la c o n c e n t r a c ió n d e la m u e s t r a s e r e p r e s e n t a n
s ig n if ic a t iv a m e n t e p o r m e d io d e la e c u a c ió n c o r r e s p o n d ie n t e .
E n la g r á f ic a n o . 2 s e o b s e r v a e l a n á lis is r e s id u a l e n d o n d e e l e r r o r d e lo s d a t o s s e
d is t r ib u y e s im é t r ic a m e n t e , s e p u e d e d e c ir q u e e x is t e n v a r ia c io n e s c o n s t a n t e s a t r a v é s
d e la c o m b in a c ió n d e t o d o s lo s f a c t o r e s , la d is t r ib u c ió n e s n o r m a l y n o h a y s e s g o p a r a
e l m o d e lo d e r e g r e s ió n . P o r e llo , p a r a e l a n á lis is d e e s t o s d a t o s , s e ju s t if ic a la u t iliz a c ió n
d e m é t o d o s p a r a m é t r ic o s .
P o r lo a n t e r io r s e c o n s id e r ó , q u e e l m é t o d o p r e s e n t ó c o n d ic io n e s a d e c u a d a s a p a r t ir
d e la s c u a le s s e r e a liz a r o n la s d e t e r m in a c io n e s n e c e s a r ia s p a r a la s m u e s t r a s s é r ic a s .
P a r a la s d e t e r m in a c io n e s e n s u e r o s a n g u ín e o s e r e a liz a r o n le c t u r a s t o m a n d o e n c u e n t a
v a lo r e s n o r m a le s d e c o b r e e n s u e r o , e v a lu a n d o 4 n iv e le s d e n t r o d e e s t e r a n g o a d e m á s
d e 3 n iv e le s p o r d e b a jo y 3 p o r a r r ib a d e e s t o s v a lo r e s , a f in d e o b t e n e r u n r a n g o a m p lio
d e c o n c e n t r a c io n e s y d e t e r m in a r lo s p a r á m e t r o s n e c e s a r io s . E n la g r á f ic a n o . 3 s e
o b s e r v a la t e n d e n c ia lin e a l q u e p r e s e n t a n e s t o s r e s u lt a d o s e n d o n d e s e e n c o n t r ó u n r
d e : 0 .9 9 9 9 y u n r 2 d e : 0 .9 9 9 8 a d e m á s d e u n v a lo r p d e 2 .5 8 E -9 2 in d ic a d o e n la t a b la n o .
4 ; p o r lo q u e , e l m é t o d o p r e s e n t ó lin e a lid a d a la c o n c e n t r a c ió n d e t r a b a jo , c o n u n
c o e f ic ie n t e d e c o r r e la c ió n y d e d e t e r m in a c ió n m u y b u e n o s , y u n a a s o c ia c ió n
3
e s t a d ís t ic a m e n t e s ig n if ic a t iv a e n t r e e l m o d e lo y la v a r ia c ió n d e lo s d a t o s ( p < 0 .0 5 ) . E n
c u a n t o a l a n á lis is d e r e s id u o s r e a liz a d o s e o b s e r v a e n la g r á f ic a n o . 4 q u e e l e r r o r s e
d is t r ib u y e s im é t r ic a m e n t e , d e ig u a l m a n e r a q u e e n la c u r v a d e c a lib r a c ió n r e a liz a d a
a n t e r io r m e n t e .
P o r lo t a n t o s e c o n s id e r a la q u e la lin e a lid a d e s a d e c u a d a p a r a e s t e c o n ju n t o d e d a t o s y
p o r lo t a n t o p a r a e l m é t o d o , y a q u e t a n t o la c u r v a d e c a lib r a c ió n e n d o n d e s e e v a lu a r o n
c o n c e n t r a c io n e s d e 1 0 a 4 0 0 µ g / d L , c o m o la s d e t e r m in a c io n e s e n m u e s t r a s s é r ic a s
c u m p le n c o n lo s r e q u is it o s n e c e s a r io s p a r a a lc a n z a r u n a a d e c u a d a lin e a lid a d . S e g ú n
in d ic a J im é n e z M . y S c h o s in s k y , K ., e n e l 2 0 0 2 , e n la v a lid a c ió n d e la d e t e r m in a c ió n d e
c o b r e e n s u e r o e m p le a n d o e l á c id o b ic in c o n ín ic o s e c o m p r o b ó la lin e a lid a d d e l m é t o d o
a n a liz a n d o d ilu c io n e s d e u n c a lib r a d o r d e c o b r e , a l ig u a l q u e e n e s t e m é t o d o y la c u r v a
d e c a lib r a c ió n m o s t r ó u n a r e s p u e s t a lin e a l e n t r e 8 y 3 0 0 µ g /d L ( J im é n e z M ., S c h o s in s k y ,
K ., 2 0 0 2 ) .
L a e x a c t it u d s e d e t e r m in ó a p a r t ir d e l p o r c e n t a je d e r e c u p e r a c ió n o b t e n id o e n c a d a
m u e s t r a s é r ic a c o n t a m in a d a c o n c o b r e . S e o b s e r v a c la r a m e n t e e n la g r á f ic a n o . 5 c o m o
é s t e , e s m u c h o m e n o r p a r a c o n c e n t r a c io n e s d e 1 0 y 2 5 μ g / d L c o n 4 4 .9 6 y 8 0 .5 9 %
r e s p e c t iv a m e n t e , o b t e n ié n d o s e r e s u lt a d o s in s a t is f a c t o r io s p a r a c o n c e n t r a c io n e s b a ja s
y a q u e s e e s p e r a n v a lo r e s c e r c a n o s a l 1 0 0 % , s e g ú n e l in t e r v a lo d e c o n f ia n z a in d ic a d o
p o s t e r io r m e n t e . S in e m b a r g o p a r a c o n c e n t r a c io n e s d e s d e 5 0 μ g / d L s e o b s e r v a n
p o r c e n t a je s d e 9 8 .5 1 a 1 0 0 .7 5 % , s e g ú n lo s p r o m e d io s r e p o r t a d o s p a r a la s d is t in t a s
c o n c e n t r a c io n e s . A l c o m p a r a r e s t o s v a lo r e s c o n o t r o s e s t u d io s s e e n c o n t r ó q u e
W e in s t o c k , N . y U h le m a n n , M . m e d ia n t e la d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n s u e r o p o r e s t a
m is m a t é c n ic a o b t u v ie r o n p o r c e n t a je s d e r e c u p e r a c ió n 9 8 .5 a 1 0 3 .0 % . ( W e in s t o c k , N .
U h le m a n n , M ., 1 9 8 1 ) . S e g ú n in d ic a B la n e s , B e n ít e z y G im é n e z , e n e l a ñ o 2 0 0 4 e n s u
in v e s t ig a c ió n d e c o b r e e n a g u a s n a t u r a le s s u b t e r r á n e a s , e n t o d o s lo s c a s o s e v a lu a d o s
lo s v a lo r e s o b t e n id o s s e e n c u e n t r a n d e n t r o d e l r a n g o d e 8 5 a 1 1 5 % .
4
P a r a o t r a s t é c n ic a s s e in f o r m a n p o r c e n t a je s d e r e c u p e r a c ió n s im ila r e s . G a r c ía y
S c h o s in s k y in f o r m a n u n 1 0 2 % d e r e c u p e r a c ió n p r o m e d io ( G a r c ía M , H o ls t I , S c h o s in s k y
K , R o d r ig u e z R ., 1 9 9 3 ) , W illia m s y c o la b o r a d o r e s u n 9 5 % ( W illia m s , H .L ., J o h n s o n D .J .,
H a u t , M .J ., 1 9 7 7 ) y M a k in o e lt o h u n 1 0 1 ,7 % ( M a k in o , T . I t o h , J .I . 1 9 8 1 ) .
C o m o s e s u p o n e q u e e l p o r c e n t a je d e r e c u p e r a c ió n n o d e b e r ía v a r ia r a lo s d if e r e n t e s
n iv e le s d e c o n c e n t r a c ió n , s e e v a lu ó s i h a b ía u n a d if e r e n c ia e s t a d ís t ic a m e n t e
s ig n if ic a t iv a p u e s e n la t a b la n o . 5 s e o b s e r v a r o n d if e r e n c ia s e n la s m u e s t r a s m e n o s
c o n c e n tra d a s.
S e r e a liz ó u n a n á lis is d e v a r ia n z a p a r a c o n t r a s t a r e l p o r c e n t a je d e r e c u p e r a c ió n a
d if e r e n t e s n iv e le s d e c o n c e n t r a c ió n , c o n u n n iv e l d e c o n f ia n z a d e l 9 5 % e n c o n t r á n d o s e
u n v a lo r d e p d e 5 .8 5 5 7 E -
21
c o m o s e o b s e r v a e n la t a b la n o . 6 . C o n e s t e a n á lis is s e
o b s e r v a q u e s í h a y d if e r e n c ia s ig n if ic a t iv a e n t r e lo s p o r c e n t a je s d e r e n d im ie n t o a
d if e r e n t e s c o n c e n t r a c io n e s , p o r lo q u e s e p r e s e n t a n la s p r u e b a s d e T p a r a c o n t r a s t a r la
lo s p o r c e n t a je s d e r e n d im ie n t o c o n t r a e l v a lo r f ijo d e 1 0 0 % u s a n d o d o s r a n g o s , u n o d e
lo s c u a le s in c lu ía la s d o s c o n c e n t r a c io n e s m á s b a ja s .
C o m o s e o b s e r v a e n la t a b la n o . 7 , a u n n iv e l d e s ig n if ic a n c ia d e l 5 % s e r e c h a z a la
h ip ó t e s is n u la e n d o n d e e l p o r c e n t a je d e r e n d im ie n t o p o b la c io n a l e s ig u a l a l 1 0 0 % p a r a
e l r a n g o d e c o n c e n t r a c ió n d e 1 0 a 3 0 0 µ g / d L , m ie n t r a s q u e p a r a e l r a n g o d e 5 0 a 3 0 0
µ g / d L , n o p u e d e r e c h a z a r s e la h ip ó t e s is n u la , lo c u a l in d ic a q u e e n la p o b la c ió n , n o s e
p u e d e a f ir m a r q u e e l p o r c e n t a je d e r e n d im ie n t o p r o m e d io s e a d if e r e n t e d e 1 0 0 % .
A l r e a liz a r e l a n á lis is d e e x a c t it u d u s a n d o in t e r v a lo s d e c o n f ia n z a ( v e r t a b la n o .8 ) s e
o b s e r v a q u e c o m o e l r a n g o d e 1 0 a 3 0 0 µ g / d L , n o in c lu y e a l 1 0 0 % , e n t o n c e s e s t e m é t o d o
n o e s e x a c t o e n e s t e r a n g o p e r o s í e n e l q u e v a d e 5 0 a 3 0 0 µ g / d L c u y o in t e r v a lo
e s t im a d o s í in c lu y e a l 1 0 0 % d e r e n d im ie n t o .
5
T a m b ié n s e e v a lu ó la r e p e t i b i li d a d d e l m é t o d o , s ie n d o e s t a u n a m e d id a d e la p r e c is ió n
o b t e n id a b a jo la s m is m a s c o n d ic io n e s d e o p e r a c ió n e n u n in t e r v a lo c o r t o d e t ie m p o ,
p o r lo q u e s e r e a liz a r o n la s m e d ic io n e s e n e l m is m o d ía , p o r u n m is m o a n a lis t a , e n la
m is m a m u e s t r a h o m o g é n e a y e n e l m is m o e q u ip o o b t e n ié n d o s e lo s r e s u lt a d o s
o b s e r v a d o s e n la g r á f ic a n o . 7 c o n u n a m e d ia d e 1 0 3 .4 μ g / d L , u n a d e s v ia c ió n e s t á n d a r
d e 3 .7 6 y u n c o e f ic ie n t e d e v a r ia c ió n d e 3 .6 4 % e n c o n t r á n d o s e e s t e v a lo r d e n t r o d e l
lím it e e s t im a d o < 5 .0 % . E s t o s d a t o s p u e d e n o b s e r v a r s e e n la t a b la n o . 1 0 . E n e l e s t u d io
d e d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n a g u a s n a t u r a le s s u b t e r r á n e a s p o r e s p e c t r o m e t r ía d e
a b s o r c ió n a t ó m ic a , la p r e c is ió n e x p r e s a d a c o m o r e p e t it ib id a d s e f ijó a p a r t ir d e la
d e s v ia c ió n e s t á n d a r d e s e is r é p lic a s d e 0 ,2 5 m g .L -1 d e c o n c e n t r a c ió n , a r r o ja n d o u n v a lo r
d e d e s v ia c ió n e s t á n d a r d e d e 3 ,2 % ( B la n e s , P . S ., B e n ít e z , M . E ., G im é n e z , M .C .2 0 0 4 ) .
E n c u a n t o a la p r e c i s i ó n , la c u a l f u e e v a lu a d a p o r m e d io d e l c o e f ic ie n t e d e v a r ia c ió n d e
c a d a c o n c e n t r a c ió n , s e o b s e r v a q u e p a r a la s c o n c e n t r a c io n e s d e 1 0 y 2 5 μ g / d L , e s t e n o
c u m p lió p o r e s t a r p o r a r r ib a d e lo s lím it e s p e r m it id o s ( < 5 .0 % ) , s ie n d o e s t e v a lo r d e 3 0 .0
y 7 .0 % r e s p e c t iv a m e n t e , a d if e r e n c ia d e la s c o n c e n t r a c io n e s a p a r t ir d e 5 0 μ g / d L q u e s e
p r e s e n t a n e n u n r a n g o d e 0 .4 a 3 .0 % ; c o m o s e o b s e r v a e n la g r á f ic a n o . 6 , v a lo r e s q u e s i
r e p r e s e n t a n p r e c is ió n e n t r e s u s r e s u lt a d o s . D e ig u a l m a n e r a e n o t r o s e s t u d io s s e h a n
e n c o n t r a d o v a lo r e s im p r e c is o s a c o n c e n t r a c io n e s b a ja s s e g ú n m e n c io n a J im é n e z M . y
S c h o s in s k y , K . e n e l 2 0 0 2 e n s u v a lid a c ió n d e la d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n s u e r o
e m p le a n d o e l á c id o b ic in c o n ín ic o .
P a r a e s t a b le c e r e l lí m i t e d e d e t e c c i ó n , s e r e a liz a r o n lo s c á lc u lo s u t iliz a n d o d a t o s d e
d e s v ia c ió n e s t á n d a r y la p e n d ie n t e c o n r e s p e c t o a la c u r v a d e c a lib r a c ió n , la c u a l d e b e
r e a liz a r s e u t iliz a n d o m u e s t r a s q u e c o n t e n g a n e n a n a lit o d e n t r o d e l r a n g o d e l lím it e d e
d e t e c c ió n y c u a n t if ic a c ió n ( In t e r n a t io n a l C o n f e r e n c e o n H a r m o n it a t io n o f T e c h n ic a l
R e q u ir e m e n t s f o r R e g is t r a t io n o f P h a r m a c e u t ic a ls f o r H u m a n U s e , I C H , 1 9 9 4 ) . S e
r e a liz ó u t iliz a n d o e l v a lo r d e la d e s v ia c ió n e s t á n d a r d e lo s r e s id u a le s d e la r e g r e s ió n :
6
c a b e r e s a lt a r q u e lo s r e s id u a le s s o n la r e s t a d e c a d a v a lo r o b s e r v a d o d e lo s v a lo r e s
p r o n o s t ic a d o s p o r la r e c t a d e r e g r e s ió n . A s í s e o b t u v o e l lím it e d e d e t e c c ió n a u n a
c o n c e n t r a c ió n d e 4 .0 3 μ g / d L , c o m o s e e s p e c if ic a e n la t a b la n o . 1 1 , lo c u a l in d ic a q u e e n
e l m é t o d o u t iliz a d o , e l e q u ip o d e t e c t a h a s t a e s t a c o n c e n t r a c ió n d e c o b r e e n u n a
m u e s t r a . S m e y e r s -V e r b e k e e t a l. e n 1 9 7 3 , c o m p a r a r o n e l a n á lis is d e a c t iv a c ió n
n e u t r ó n ic a c o n la e s p e c t r o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a e n e l a n á lis is d e la s m u e s t r a s
b io ló g ic a s , in d ic a n d o e s t e lím it e e n 5 μ g / d L ( S m e y e r s , J ., M a s s a r t , D . L ., V e r s ie k , J .,
S p e e c k e , A . 1 9 7 3 ) . E s t e v a lo r e s d e 8 µ g / d L e n e l e s t u d io r e p o r t a d o p o r J im é n e z p a r a la
d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n s u e r o u t iliz a n d o á c id o b ic in c o n in ic o . ( J im é n e z M .,
S c h o s in s k y , K . 2 0 0 2 ) .
P a r a e l lí m i t e d e c u a n t i f i c a c i ó n s e d e t e r m in ó h a c ie n d o u s o t a m b ié n d e la m e d id a
p r o m e d io d e la s e ñ a l d e l b la n c o y la d e s v ia c ió n e s t á n d a r d e lo s r e s id u a le s d e la
r e g r e s ió n , o b t e n ié n d o s e u n a c o n c e n t r a c ió n d e 1 2 .2 2 μ g / d L c o m o s e o b s e r v a e n la t a b la
n o . 1 2 . S e h a e s t a b le c id o e s t e lím it e e n u n v a lo r d e 2 0 μ g / d L p a r a e l e s t u d io r e a liz a d o
p o r J u á r e z , J .G . e n e l 2 0 0 3 m e d ia n t e s u v a lid a c io n d e m é t o d o s p a r a c u a n t if ic a r c o b r e e n
s u e r o . S in e m b a r g o , e n e s t a in v e s t ig a c ió n , p a r a c o n c e n t r a c io n e s m á s a lt a s d e e s t e
v a lo r ( 1 2 . 2 2 μ g / d L ) , c o m o la d e 2 5 μ g / d L e v a lu a d a , n o s e o b t u v o e l p o r c e n t a je d e
r e c u p e r a c ió n e s p e r a d o s ie n d o e s t e d e 8 0 .5 9 % y u n a d e s v ia c ió n e s t á n d a r d e 5 .7 5 la c u a l
e s r e la t iv a m e n t e a lt a c o m p a r a d a c o n lo s v a lo r e s o b t e n id o s a p a r t ir d e 5 0 μ g / d L e n
d o n d e s e o b t ie n e n p o r c e n t a je s d e r e c u p e r a c ió n d e 9 9 .8 2 % a 1 0 0 .0 4 % c o m o s e o b s e r v a
e n la t a b la n o . 5 , p o r lo q u e a c o n c e n t r a c io n e s b a ja s d e 1 0 y 2 5 μ g / d L n o s e p u e d e d a r
c e r t e z a d e r e s u lt a d o s p r e c is o s y e x a c t o s .
C o n e l o b je t iv o d e d e t e r m in a r e l a lc a n c e d e l m é t o d o y p o r lo t a n t o e l r a n g o d e
c o n c e n t r a c io n e s d e c o b r e q u e p u e d e n d e t e c t a r s e a t r a v é s d e é l, s e r e a liz a r o n
d e t e r m in a c io n e s d e m u e s t r a s c o n t a m in a d a s c o n c o b r e a c o n c e n t r a c io n e s m a y o r e s a la s
e s t a b le c id a s d e n t r o d e la m e t o d o lo g ía d e t r a b a jo lle g a n d o a c o n c e n t r a c io n e s d e h a s t a
7
6 0 0 μ g / d L e n c o n t r á n d o s e p o r c e n t a je s d e r e c u p e r a c ió n d e 9 3 .7 2 h a s t a 1 0 2 .7 6 % c o m o s e
o b s e r v a e n la g r á f ic a n o . 8 .
S e e v a lu ó la e x a c t it u d p o r m e d io d e l c o n t r a s t e d e l p o r c e n t a je d e r e c u p e r a c ió n d e la s
m u e s t r a s p o r u n a p r u e b a d e T d e s t u d e n t c o n u n n iv e l d e c o n f ia n z a d e 9 5 %
e n c o n t r á n d o s e u n v a lo r d e p d e 0 .5 9 9 o b s e r v a d o e n la t a b la n o . 1 3 p o r lo q u e p u e d e
d e c ir s e q u e s i s e e n c o n t r ó e x a c t it u d a e s t a s c o n c e n t r a c io n e s a l ig u a l q u e p r e c is ió n , la
c u a l f u e e v a lu a d a m e d ia n t e e l c o e f ic ie n t e d e v a r ia c ió n d e lo s d a t o s p r e s e n t a d o s e n la
t a b la n o . 1 4
T a m b ié n s e e n c o n t r ó lin e a lid a d c o m o s e o b s e r v a e n la g r á f ic a n o .9 , e n d o n d e p u e d e
o b s e r v a r s e c la r a m e n t e u n c o e f ic ie n t e d e d e t e r m in a c ió n id e a l ( ig u a l a 1 ) y d o n d e la
p e n d ie n t e p r e s e n t a d a e s ig u a l a la p e n d ie n t e d e l m é t o d o .
P o r t o d o lo a n t e r io r , d a d o q u e e l m é t o d o s e d e m o s t r ó a d e c u a d o e n c u a n t o a l
f u n c io n a m ie n t o d e l e q u ip o , s ig u ie n d o la s c o n d ic io n e s y lin e a m ie n t o s e s t a b le c id o s y s in
r e a liz a r
m o d if ic a c io n e s
de
é l,
adem ás
de
que
lo s
r e s u lt a d o s
c u m p le n
s a t is f a c t o r ia m e n t e d e a c u e r d o a lo s p a r á m e t r o s e v a lu a d o s d e s d e 5 0 μ g / d L h a s t a
c o n c e n t r a c io n e s d e 6 0 0 μ g / d L , s e c o n s id e r a q u e e l m é t o d o e s a p t o p a r a s u a p lic a c ió n
e n la d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n m u e s t r a s d e s u e r o , p r e s e n t a n d o d a t o s v á lid o s y
c o n f ia b le s .
8
10 . C O N C L U S IO N E S
1 0 .1 E l m é t o d o e v a lu a d o p r e s e n t ó u n a a d e c u a d a lin e a lid a d t a n t o e n la c u r v a d e
c a lib r a c ió n c o m o e n la s le c t u r a s d e la s m u e s t r a s s é r ic a s o b t e n ié n d o s e u n r d e 0 .9 9 9 9
e n a m b o s c a s o s y u n r 2 d e 0 .9 9 9 9 y 0 .9 9 9 8 r e s p e c t iv a m e n t e , r e p r e s e n t a n d o u n a
e x c e le n t e a s o c ia c ió n e n t r e la c o n c e n t r a c ió n e v a lu a d a y la a b s o r b a n c ia p r o p o r c io n a d a
p o r e l in s t r u m e n t o .
1 0 .2 L a e x a c t it u d d e la s m u e s t r a s d e t e r m in a d a m e d ia n t e e l p o r c e n t a je d e r e c u p e r a c ió n
s e e s t a b le c ió a p a r t ir d e c o n c e n t r a c io n e s d e 5 0 µ g / d L e n d o n d e s e o b t ie n e n v a lo r e s d e
9 8 .5 1 % a 1 0 0 .7 5 % e n c o n c e n t r a c io n e s e v a lu a d a s h a s t a 3 0 0 µ g / d L , a d e m á s d e c o n t r a s t a r
e s t o s r e s u lt a d o s m e d ia n t e a n á lis is d e v a r ia n z a y la p r u e b a d e T d e s t u d e n t e n d o n d e s e
e n c o n t r ó q u e a u n n iv e l d e s ig n if ic a n c ia d e l 5 % s e r e c h a z a la h ip ó t e s is n u la p a r a
c o n c e n t r a c io n e s d e 1 0 a 3 0 0 µ g / d L m ie n t r a s q u e s e a c e p t a p a r a c o n c e n t r a c io n e s d e 5 0
a 3 0 0 µ g / d L , p o r lo q u e p u e d e d e c ir s e q u e e l m é t o d o e s e x a c t o p a r a e s t a s ú lt im a s
c o n c e n t r a c io n e s .
1 0 .3
E l m é t o d o e v a lu a d o c u m p le c o n e l p a r á m e t r o d e r e p e t ib ilid a d , y a q u e s e
e n c o n t r a r o n r e s u lt a d o s c o n u n a m e d ia d e 1 0 3 .4 µ g / d L , u n a d e s v ia c ió n e s t á n d a r d e 3 .7 6
y u n c o e f ic ie n t e d e v a r ia c ió n d e 3 .6 4 % e n c o n t r á n d o s e e s t e v a lo r d e n t r o d e l lím it e
e s t im a d o < 5 .0 % .
1 0 .4 S e d e m o s t r ó q u e e l m é t o d o e v a lu a d o c u m p le c o n e l p a r á m e t r o d e p r e c is ió n a
p a r t ir d e c o n c e n t r a c io n e s d e 5 0 µ g / d L e n d o n d e s e o b t u v ie r o n c o e f ic ie n t e s d e v a r ia c ió n
e n u n r a n g o d e 0 .4 a 3 .0 % ; v a lo r e s m e n o r e s a l lím it e e s t a b le c id o d e 5 .0 % .
1 0 .5 E l lím it e d e d e t e c c ió n e n c o n t r a d o f u e d e 4 .0 3 µ g / d L y e l lím it e d e c u a n t if ic a c ió n d e
1 2 .2 2 µ g / d L ; s in e m b a r g o , e s a p a r t ir d e c o n c e n t r a c io n e s d e 5 0 µ g / d L d o n d e s e p u e d e
d a r c e r t e z a d e r e s u lt a d o s e x a c t o s y p r e c is o s p a r a la m e t o d o lo g ía e m p le a d a .
9
1 0 .6 E l r a n g o d e l m é t o d o s e e s t a b le c ió e n c o n c e n t r a c io n e s 1 0 a 6 0 0 µ g / d L , d e s d e la
m ín im a c o n c e n t r a c ió n d e t e c t a d a p o r e l e q u ip o , h a s t a d o n d e s e p r e s e n t a a d e c u a d a
lin e a lid a d , e x a c t it u d y p r e c is ió n .
1 0 .7 E l m é t o d o c u m p li ó e f e c t iv a m e n t e c o n lo s p a r á m e t r o s d e lin e a lid a d , e x a c t it u d ,
r e p e t ib ilid a d y p r e c is ió n , p a r a s e r c o n s id e r a d o c o m o u n m é t o d o d e a n á lis is v á lid o y
c o n f ia b le .
1 0 .8 E l m é t o d o e v a lu a d o f u n c io n ó a d e c u a d a m e n t e e n la s c o n d ic io n e s e s t a b le c id a s , a
u n a lo n g it u d d e o n d a d e 3 2 4 .8 n m , c o n u n a lla m a d e a ir e -a c e t ile n o , u n a a lin e a c ió n d e l
e q u ip o e n 0 .2 1 6 y u n a e n e r g ía d e la lá m p a r a d e 6 7 a m p e r io s c o m o s e e s t a b le c ió d e n t r o
d e la m e t o d o lo g ía d e t r a b a jo .
1 0 .9 Y a q u e e l m é t o d o c u m p lió s a t is f a c t o r ia m e n t e c o n t o d o s lo s p a r á m e t r o s e v a lu a d o s
s e c o n s id e r a a d e c u a d o p a r a u t iliz a r lo y c o n t r ib u ir a l a n á lis is d e lo s n iv e le s d e c o b r e e n e l
s u e r o s a n g u ín e o e n la s p a t o lo g ía s o c a s o s e n q u e s e n e c e s it e .
10
11. R E C O M E N D A C IO N E S
1 1 .1 I m p le m e n t a r n u e v o s m é t o d o s p a r a e v a lu a r o t r o s f lu id o s b io ló g ic o s c o m o la o r in a o
t e jid o y e s t a b le c e r c lín ic a m e n t e q u e m e t o d o lo g ía e s m á s a d e c u a d a p a r a d e t e r m in a r lo s
n iv e le s d e c o b r e e n e l c u e r p o h u m a n o e n a lg ú n c a s o p a t o ló g ic o .
1 1 .2 R e a liz a r u n a v a lid a c ió n c o m p le t a d e l m é t o d o , e s d e c ir , a n iv e l in t e r in s t it u c io n a l, e n
lo s d is t in t o s la b o r a t o r io s , c o n d if e r e n t e s e q u ip o s y o p e r a r io s , a f in d e c o m p a r a r lo s
r e s u lt a d o s y e s t a b le c e r la r o b u s t e z d e l m é t o d o .
11
12. A N E X O S
9 .1 P R O P I E D A D E S F I S I C O Q U Í M I C A S D E L C O B R E
•
E s u n m e ta l p e sa d o
•
S ím b o lo : C u
•
N ú m e r o A t ó m ic o : 2 9
•
D e n s id a d d e 8 .9 6 g / c m 3 a 2 0 º C
•
P u n t o d e f u s ió n : 1 0 8 3 .0 ( + / -) 0 .1 º C ( 1 9 8 1 .4 + / - 0 .2 º F ) .
•
P u n t o d e e b u llic ió n :2 5 9 5 º C ( 4 7 0 3 º F ) .
•
C a lo r d e v a p o r iz a c ió n : 1 1 6 0 c a l / g .
•
R e s is t iv id a d : 1 .6 7 3
•
M a t e r ia l: n o m a g n é t ic o
•
C o lo r : R o jiz o , b r illa n t e
•
S o lu b ilid a d : s o lu b le e n a g u a
•
C o n s is t e n c ia : m a le a b le , s e e n f r e n t a n a la e s t r u c t u r a c ú b ic a c e n t r a d a , d is p o n ib le
c o m e r c ia lm e n t e e n f o r m a d e lin g o t e s , lá m in a s , a la m b r e s o e n p o lv o
•
C o n d u c t iv id a d t é r m ic a y e lé c t r ic a s o n m u y a lt a s .
•
S e d e b ilit a c u a n d o s e e x p o n e a l a ir e .
S e e n c u e n t r a e n la n a t u r a le z a e n s u e s t a d o n a t a l, t a m b ié n e n f o r m a c o m b in a d a e n
v a r io s m in e r a le s c o m o la c a lc o p ir it a . S e p r o d u c e e n lo s c o m p le jo s b io ló g ic o s , t a le s
c o m o f e o f it in a , h e m o c ia n in a , la t ir o s in a s a y c e r u lo p la s m in a ( M a r y a d e le , J ., O ’N e il,
20 0 6 ).
12
9 .2 G E N E R A L I D A D E S C O B R E
E l c o b r e e s u n o lig o e le m e n t o n e c e s a r io p a r a e l o r g a n is m o . S e c o m b in a c o n c ie r t a s
p r o t e ín a s q u e a c t ú a n c o m o c a t a liz a d o r e s p a r a a y u d a r a u n g r a n n ú m e r o
de
f u n c io n e s . P a r t ic ip a e n la t r a n s f o r m a c ió n d e la m e la n in a p a r a la p ig m e n t a c ió n d e la
p ie l, g e n e r a la f o r m a c ió n d e e n la c e s c r u z a d o s e n e l c o lá g e n o y la e la s t in a p a r a
m a n t e n e r y r e g e n e r a r lo s t e jid o s , s ir v e p a r a e l f u n c io n a m ie n t o c o r r e c t o d e l c o r a z ó n
y la s a r t e r ia s , y n o s lle g a a t r a v é s d e la a lim e n t a c ió n ( A r n a l N , C r is t a lli D O , d e A la n iz
M J y M a r r a C A , 2 0 1 0 ) . L o s a lim e n t o s n a t u r a le s c o m o c e r e a le s , c a r n e y p e s c a d o
c o n t ie n e n e l s u f ic ie n t e p a r a p r o v e e r lo s r e q u e r im ie n t o s c o n u n a d ie t a e q u ilib r a d a .
H a y a lg u n o s m á s r ic o s e n c o b r e c o m o s o n : n u e c e s , s e m illa s d e g ir a s o l, g a r b a n z o s ,
m a r is c o s , y e m a d e h u e v o , c h o c o la t e , p a s a s . E l r e q u is it o d e c o b r e d ia r io p a r a a d u lt o s
e s d e a p r o x im a d a m e n t e 1 -3 m g ( C r u b e lla t o , D ., D i R u s o , C ., 2 0 0 9 ) .
E l c o b r e s e t r a n s p o r t a e n s a n g r e u n id o a la p r o t e ín a c e r u lo p la s m in a . L a s c if r a s
n o r m a le s e n s a n g r e , o s c ila n e n t r e 7 0 -1 4 0 µ g / d L ( B á r a n y E , B e r g d a h l I , y O s k a r s s o n
A , 2 0 1 0 ) . L a E P A r e q u ie r e q u e e l a g u a p o t a b le n o c o n t e n g a m á s d e 1 .3 m ilig r a m o s
de
c o b re
por
lit r o
de
agua
( 1 .3
m g /L ).
E l M in is t e r io d e A g r ic u lt u r a d e E E . U U ., r e c o m ie n d a u n a d o s is d ia r ia d e 9 0 0
m ic r o g r a m o s d e c o b r e ( 9 0 0 µ g / d ía ) p a r a p e r s o n a s m a y o r e s d e 8 0 a ñ o s d e e d a d
( A g e n c ia p a r a S u s t a n c ia s T ó x ic a s y e l R e g is t r o d e E n f e r m e d a d e s ., 2 0 0 4 ) .
T a b la n o . 5 V a lo r e s n o r m a le s d e c o b r e e n s a n g r e
Sexo
V a lo r n o r m a l
D im e n s io n a l
H o m b re
7 0 -1 4 0
µ g /10 0 m L
M u je r e s
8 0 -1 5 5
µ g /10 0 m L
N iñ o s
N iv e le s s u p e r io r e s
F u e n t e : ( M e jia , O .R ., R u iz , M ., C la v ijo , D ., 2 0 0 6 )
13
9 .2 .1 C O B R E M E T Á L I C O
E l c o b r e s e u t iliz a t a n t o c o n u n g r a n n iv e l d e p u r e z a , c e r c a n o a l 1 0 0 % , c o m o
a le a d o c o n o t r o s e le m e n t o s c o m o e l e s t a ñ o p a r a p r o d u c ir b r o n c e , c o n c in c
p a r a p r o d u c ir la t ó n y c o n c in c , n íq u e l y c o b r e p a r a p r o d u c c ió n d e A lp a c a
( W illia m , N ., 2 0 0 7 ) . E l c o b r e p u r o s e e m p le a p r in c ip a lm e n t e e n la f a b r ic a c ió n
d e c a b le s e lé c t r ic o s , h ilo s c o n d u c t o r e s y b o b in a d o d e m o t o r e s ( D e p a r t a m e n t o
d e S a lu d y S e r v ic io s H u m a n o s d e E E .U U , 2 0 0 4 ) .
9 .2 .2 C O B R E N O M E T Á L I C O
E l s u lf a t o d e c o b r e ( I I ) t a m b ié n c o n o c id o c o m o s u lf a t o c ú p r ic o e s e l
c o m p u e s t o d e c o b r e d e m a y o r im p o r t a n c ia in d u s t r ia l y s e e m p le a c o m o a b o n o
y
p la g u ic id a
en
a g r ic u lt u r a , a lg u ic id a
en
la
d e p u r a c ió n
del agua
y
c o m o c o n s e r v a n t e d e la m a d e r a ( M a r t i, J .A ., M e r c a d a l, H .D ,2 0 0 2 ) .
9 .3 T O X I C O L O G Í A D E L C O B R E
E l c o b r e e n c o n c e n t r a c io n e s e le v a d a s p u e d e lle g a r a s e r d a ñ in o p a r a e l s e r h u m a n o .
Un
e n v e n e n a m ie n t o
de
c o b re
agudo
s u e le
se r u n a
c o n s e c u e n c ia
de
la
c o n t a m in a c ió n d e lo s a lim e n t o s e n lo s u t e n s ilio s d e c o b r e , o d e la in g e s t ió n
a c c id e n t a l o in t e n c io n a l d e s a le s d e c o b r e ( M a r t i, J .A ., M e r c a d a l, H .D ,2 0 0 2 ) .
L a s c o n c e n t r a c io n e s d e l c o b r e q u e s e e n c u e n t r a n e n e l a ir e , s o n u s u a lm e n t e
b a s t a n t e b a ja s , a s í q u e la e x p o s ic ió n a l c o b r e p o r r e s p ir a c ió n e s d e s c a r t a b le . P e r o
p o b la c io n e s q u e v iv e n c e r c a d e f u n d ic io n e s q u e p r o c e s a n e l m in e r a l c o b r e e n m e t a l
p u e d e n e x p e r im e n t a r e s t a c la s e d e e x p o s ic ió n , a s í c o m o la s q u e s e e n c u e n t r a n
c e r c a d e s u e lo s c e r c a d e f u n d ic io n e s d e c o b r e , c a ñ e r ía s d e c o b r e q u e t r a n s p o r t a n
a g u a y d e la g o s y r ío s t r a t a d o s c o n c o m p u e s t o s d e c o b r e p a r a c o n t r o la r a lg a s
( M a r t i, J .A ., M e r c a d a l, H .D ,2 0 0 2 ) .
14
L a m a y o r ía d e lo s c o m p u e s t o s d e c o b r e s e d e p o s it a r á n y s e e n la z a r á n t a n t o a lo s
s e d im e n t o s d e a g u a c o m o a la s p a r t íc u la s d e l s u e lo . C o m p u e s t o s s o lu b le s d e c o b r e
f o r m a n la m a y o r a m e n a z a p a r a la s a lu d h u m a n a . U s u a lm e n t e c o m p u e s t o s d e c o b r e
s o lu b le s e n a g u a o c u r r e n e n e l a m b ie n t e d e s p u é s d e lib e r a r s e a t r a v é s d e
a p lic a c io n e s e n la a g r ic u lt u r a ( A r n a l N , C r is t a lli D O , d e A la n iz M J y M a r r a C A , 2 0 1 0 ) .
L a e x p o s ic ió n p r o f e s io n a l a c o b r e o c u r r e a m e n u d o . E n e l a m b ie n t e d e t r a b a jo e l
c o n t a c t o c o n c o b r e p u e d e lle v a r a a d q u ir ir g r ip e c o n o c id a c o m o la f ie b r e d e l m e t a l.
E s t a f ie b r e p a s a r á d e s p u é s d e d o s d ía s y e s c a u s a d a p o r u n a s o b r e s e n s ib ilid a d
( D e p a r t a m e n t o d e S a lu d y S e r v ic io s H u m a n o s d e E E .U U , 2 0 0 4 ) .
L a e x p o s ic ió n in d u s t r ia l e s g e n e r a lm e n t e p o r la in h a la c ió n d e v a p o r e s o p o lv o s d e
c o b r e , a l c u a l s e h a n a s ig n a d o v a lo r e s u m b r a le s d e 0 ,2 y 1 ,0 m g / m 3 ,
r e s p e c t iv a m e n t e ( R a n d a ll, C . B a s e lt , 2 0 0 0 ) . S i e l C o b r e e s c a n c e r íg e n o n o h a s id o
d e t e r m in a d o a ú n ( C la r k e , J . T , 1 9 9 8 ) .
9 .3 .1 P A T O L O G Í A S A S O C I A D A S A L A T O X I C I D A D D E L C O B R E
D e b id o a la d e f ic ie n c ia o e x c e s o d e c o b r e e n e l o r g a n is m o , e x is t e n d is t in t a s
e n f e r m e d a d e s c o m o la e n f e r m e d a d d e M e n k e s , la c u a l e s u n a e n f e r m e d a d
g e n é t ic a d e l m e t a b o lis m o d e l c o b r e d e c o m ie n z o p r e n a t a l ( a n t e s d e l
n a c im ie n t o ) . E l c o b r e s e a c u m u la e n c a n t id a d e s e x c e s iv a s e n e l h íg a d o , p e r o
e x is t e u n d é f ic it d e c o b r e e n la m a y o r ía d e lo s r e s t a n t e s t e jid o s d e l
o r g a n is m o .
L o s c a m b io s e s t r u c t u r a le s a f e c t a n a l p e lo , c e r e b r o , h u e s o s ,
h íg a d o y a r t e r ia s ( C la r k e , J . T , 1 9 9 8 ) ( A ic a r d i J ., 1 9 9 8 ) .
C u a n d o e l c o b r e s e p r o d u c e e n f o r m a e x c e s iv a o c a s io n a u n a e n f e r m e d a d
h e p á t ic a
c o n o c id a
com o
e n f e r m e d a d d e W ils o n . E l o r ig e n
de
e sta
e n f e r m e d a d e s h e r e d it a r io y a p a r t e d e l t r a s t o r n o h e p á t ic o q u e o c a s io n a
15
t a m b ié n d a ñ a a l s is t e m a n e r v io s o . S e e n c u e n t r a n n iv e le s e le v a d o s d e c o b r e
e n la o r in a y b a jo s e n la s a n g r e .
P u e d e p r o d u c ir s e d e f ic ie n c ia d e c o b r e e n n iñ o s c o n u n a d ie t a p o b r e e n c a lc io ,
e s p e c ia lm e n t e
si
p re se n ta n
d ia r r e a s
o
d e s n u t r ic ió n .
T a m b ié n
hay
e n f e r m e d a d e s q u e d is m in u y e n la a b s o r c ió n d e c o b r e , c o m o la e n f e r m e d a d
c e lía c a , la f ib r o s is q u ís t ic a o a l lle v a r d ie t a s r e s t r ic t iv a s ( D e p a r t a m e n t o d e
S a lu d y S e r v ic io s H u m a n o s d e E E .U U , 2 0 0 4 ) .
9 .3 .2 M E C A N I S M O D E A C C I Ó N T Ó X I C A
E l c o b r e e s u n c o f a c t o r p a r a e l á c id o a s c ó r b ic o o x id a s a , c a t a la s a , p e r o x id a s a ,
la la c t a s a y la t ir o s in a s a , s e f ija a e s t a s p r o t e ín a s f o r m a n d o c o m p u e s t o s d e
c a p a c id a d a n t ig é n ic a p o r e n la c e c o n la h is t a m in a ( D r e is b a c h , H ., R o b e r , M .
1 9 9 9 ) . E l c o b r e p u e d e in d u c ir h e m ó lis is a t r a v é s d e la o x id a c ió n d e lo s g r u p o s
s u lf h id r ilo d e h e m o g lo b in a , lo q u e a u m e n t a la p e r m e a b ilid a d d e lo s
e r it r o c it o s . A c t ú a c o m o ir r it a n t e d e m u c o s a s . E l c o b r e t a m b ié n in h ib e lo s
r e s t o s s u lf h id r ilo d e G 6 P D y e l g lu t a t ió n , lo q u e r e d u c e s u s a c t iv id a d e s lib r e s
d e r a d ic a le s lib r e s ( J e r r o ld , B .L ., F r a n k , P .P , 2 0 0 2 ) .
9 .3 .3 T O X I C I D A D C R Ó N I C A :
G e n e r a lm e n t e n o s e p r o d u c e e n s u je t o s n o r m a le s , q u e s o n c a p a c e s d e
m a n t e n e r u n e q u ilib r io d e c o b r e n e u t r o e n u n a m p lio in t e r v a lo d e la in g e s t a
d ie t é t ic a y a m b ie n t a le s . E n la s p e r s o n a s c o n la e n f e r m e d a d d e W ils o n , s in
e m b a r g o , la t o x ic id a d
p r o g r e s iv a d e c o b r e s e d e s a r r o lla d e b id o a u n a
a lt e r a c ió n m e t a b ó lic a h e r e d it a r ia ( M e jia , O .R ., R u iz , M ., C la v ijo , D ., 2 0 0 6 ) .
16
9 .3 .3 .1 S i g n o s y S í n t o m a s
•
A n o r e x ia
•
N áuseas
•
V ó m it o s
•
C a lc o s is
•
M a n if e s t a c io n e s n e r v io s a s
•
H e p a t o m e g a lia
•
F ie b r e d e l m e t a l
•
P e r f o r a c ió n d e l t a b iq u e n a s a l
•
C o n g e s t ió n n a s a l
•
N iv e le s s é r ic o s d e c e r u lo p la s m in a r e d u c id o s .
•
D e p ó s it o s d e e x c e s o d e c o b r e e n lo s t e jid o s d e l p a r é n q u im a
•
E n f e r m e d a d p u lm o n a r in t e r s t ic ia l
•
F o r m a c ió n d e g r a n u lo m a s y c ic a t r ic e s e n la p ie l
•
A d e n o c a r c in o m a p u lm o n a r
•
E x c e m a p a p u lo v e s ic u la r ( s a r n a d e l c o b r e )
•
M u e r t e ( D r e is b a c h , H ., R o b e r , M ., 1 9 9 9 ) ( M illa n , A ., R u iz , M .,
20 0 8 ).
9 .3 .3 .2 D i a g n ó s t i c o :
9 .3 .3 .2 .1 E x á m e n e s d e g a b i n e t e :
•
R a d io g r a f ía
de
tó ra x :
in f ilt r a c ió n
m ic r o n o d u la r
y
r e t ic u lo n o d u la r c a m p o s p u lm o n a r e s in f e r io r e s ( D r e is b a c h , H .,
R o b e r , M ., 1 9 9 9 ) .
17
9 .3 .3 .2 .2 T r a t a m i e n t o e n c a s o s d e i n t o x i c a c i ó n a g u d a p o r c o b r e :
• L a v a d o g á s t r ic o c o n f e r r o c ia n u r o d e p o t a s io a l 1 :1 0 0 0 d e la
p r im e r a d e n t r o d e la p r im e r a h o r a d e c a u t e lo . N o p r o v o c a r
v ó m it o
•
T r a t a m ie n t o s in t o m á t ic o d e l s h o c k .
•
L a v a d o c o m p le t o c o n a g u a y ja b ó n d e la s z o n a s a f e c t a d a s .
•
S a c a r d e la e x p o s ic ió n , d a r o x íg e n o s u p le m e n t a r io y t r a t a r
s ib ila n c ia s .
•
I r r ig a c ió n c o n a b u n d a n t e a g u a t ib ia o s o lu c ió n s a lin a .
•
D -p e n ic ila m in a :
•
A d u lt o s 5 0 0 m g c / 1 2 h r s x 1 0 d ía s .
•
N iñ o s : 2 5 m g / K g / d ía
•
H a c e r c o n t r o le s d e f u n c ió n h e p á t ic a , r e n a l y h e m a t o ló g ic a .
•
D e s c a n s a r u n a s e m a n a y r e p e t ir e l t r a t a m ie n t o 1 0 d ía s m á s
s i p e r s is t e n n iv e le s a lt o s .
•
T r ie n t in a : 5 0 0 m g c / 1 2 h o r a s p o r 1 0 d ía s .
•
A c e t a t o d e z in c : 5 0 µ g / 8 h o r a s
•
T e t r a t io m o lib d a t o ( M e jia , O .R ., R u iz , M ., C la v ijo , D ., 2 0 0 6 ) .
9 .3 .3 .3 P r o n ó s t i c o d e l p a c i e n t e :
•
V a r ia b le
•
P u e d e e v o lu c io n a r a c á n c e r d e h íg a d o o p u lm ó n ( M e jia , O .R .,
R u iz , M ., C la v ijo , D ., 2 0 0 6 ) .
18
9 .3 .3 .4 M e d i d a s d e S e g u r i d a d :
•
R o p a d e p r o t e c c ió n a d e c u a d a p a r a e v it a r e l c o n t a c t o r e p e t id o o
p r o lo n g a d o c o n la p ie l.
•
I n s t a la c io n e s s a n it a r ia s a d e c u a d a s .
•
P r o h ib id o f u m a r , c o m e r y b e b e r e n e l lu g a r d e t r a b a jo .
•
P r e v e n c ió n d e la f ie b r e p o r h u m o s m e t á lic o s :
o
E v it a r o r e d u c ir a l m ín im o la e x p o s ic ió n a v a p o r e s d e
m e t a le s .
o
E l lu g a r d e t r a b a jo d e b e s e r e v a lu a d o c o n r e s p e c t o a la
v e n t ila c ió n , p r o t e c c ió n r e s p ir a t o r ia y la s p r á c t ic a s d e
t r a b a jo in d iv id u a le s .
o
S is t e m a s d e e x t r a c c ió n d e a ir e lo c a l ( R o b e r t , R . L a u w e r y s ,
S ., 1 9 9 4 ) .
9 .3 .4 T O X I C I D A D A G U D A :
C u a n d o s e in g ie r e s u lf a t o d e c o b r e , t a m b ié n c o n o c id o c o m o p ie d r a a z u l o
a z u l v it r io lo , s e o b s e r v a t o x ic id a d a g u d a p o r c o b r e .
•
D o s i s le t a l e n H u m a n o s : 5 0 -5 0 0 m g / k g d e p e s o c o r p o r a l.
•
D o s i s > 5 m g / m L : A c o m p a ñ a d a s d e s ig n o s d e t o x ic id a d ( M e jia ,
O .R ., R u iz , M ., C la v ijo , D ., 2 0 0 6 ) .
19
T a b la N o .6 L D 5 0 d e l C o b r e :
T ip o d e T o x ic id a d
S u je t o E x p u e s t o
V a lo r
T o x ic id a d O r a l A g u d a
O ra l a g u d a L D 5 0 - ra ta :
1 9 8 0 m g /K g
T o x ic id a d D e r m a l A g u d a
D e r m a l a g u d a L D 5 0 -r a t a :
> 2 0 0 0 m g /K g
T o x ic id a d I n h a la t o r ia A g u d a
I n h a la t o r ia a g u d a L C 5 0 r a t a
> 2 4 0 m g /L
F u e n t e : ( M e jia , O .R ., R u iz , M ., C la v ijo , D ., 2 0 0 6 ) .
T a b la N o . 7 C o n c e n t r a c i o n e s d e c o b r e e n c a s o s f a t a le s ( m g / L o m g / K g )
P r o m e d io
Rango
S a n g re
C e re b ro
H íg a d o
R iñ ó n
3 .6
6 .8
2 8 .5
39
2 .5 5 -6 6
2 -1 1
8 .3 -1 4 1 0
1 0 -6 1
F u e n t e : ( R a n d a ll, C . B a s e lt ., 2 0 0 0 ) .
9 .3 .4 .1 S i g n o s y S í n t o m a s
L o s s ín t o m a s p o t e n c ia le s d e s o b r e e x p o s ic ió n a lo s p o lv o s y la s
n ie b la s s o n :
•
I r r it a c ió n d e lo s o jo s , n a r iz , f a r in g e
•
S a b o r m e t á lic o
•
I r r it a c ió n d e la s m u c o s a s
•
Ú lc e r a s y q u e m a d u r a s g a s t r o in t e s t in a le s
•
P e lo v e r d e
•
N áuseas
•
V ó m it o a z u l-v e r d e
•
D ia r r e a
20
•
D e c o lo r a c ió n c o r n e a l y u lc e r a c ió n
•
D e c o lo r a c ió n d e l c a b e llo
•
Ú lc e r a s n a s a le s
•
D e r m a t it is a lé r g ic a d e c o n t a c t o o r a l
•
U r t ic a r ia
•
D e c o lo r a c ió n d e la s h e c e s
•
N e c r o s is t u b u la r a g u d a
•
I n s u f ic ie n c ia r e n a l
•
H e p a t o m e g a lia y h e p a t it is c o n n e c r o s is c e n t r o lo b u lilla r y
e s t a s is b ilia r
•
I c t e r ic ia
•
E d e m a p u lm o n a r
•
H ip o t e n s ió n
•
F ib r o s is
•
Shock
•
C o n v u ls io n e s
•
C o la p s o c a r d io v a s c u la r ( M e jia , O .R ., R u iz , M ., C la v ijo , D .,
2006)
•
L a m e t a h e m o g lo b in e m ia e s u n h a lla z g o p o c o f r e c u e n t e ,
q u e o c u r r e s ó lo e n c a s o s g r a v e s . ( J e r r o ld , B .L ., F r a n k , P .P ,
20 0 2).
S e p r o d u c e m a le s t a r g a s t r o in t e s t in a l m o d e r a d o p o r la in g e s t ió n d e
u n a s a l d e c o b r e , y lo s s ín t o m a s a g u d o s d e e n v e n e n a m ie n t o d e
c o b r e s e h a n o b s e r v a d o e n p e r s o n a s q u e u t iliz a n u t e n s ilio s
o x id a d o s d e c o b r e p a r a la p r e p a r a c ió n d e a lim e n t o s . E l a u m e n t o
d e 1 5 -1 0 0 % e n la c o n c e n t r a c ió n d e c o b r e e n e l s u e r o d e 6 n iñ o s
f u e r o n m e d id o s d e s p u é s d e la a d m in is t r a c ió n d e 2 5 0 m g d e s u lf a t o
21
d e c o b r e , c o m o d u r a n t e la in t o x ic a c ió n a c c id e n t a l p o r s u lf a t o d e
c o b r e s e a p lic a a la p ie l q u e m a d a , y la s c o n c e n t r a c io n e s s é r ic a s d e
1 3 y 2 7 m g / L s e o b s e r v ó e n 2 p a c ie n t e s e n v e n e n a d o s d u r a n t e la
h e m o d iá lis is c o n u n a u n id a d q u e c o n t ie n e u n a b o b in a d e
c a le n t a m ie n t o d e c o b r e ( R a n d a ll, C . B a s e lt , 2 0 0 0 ) .
L a m u e r t e g e n e r a lm e n t e o c u r r e d e n t r o d e 1 -7 d ía s d e la in g e s t a d e
1 0 -2 0 g d e u n a s a l d e c o b r e s o lu b le .
9 .3 .4 .2 D i a g n ó s t i c o
E n la in t o x ic a c ió n a g u d a c o n c o b r e , e l d ia g n ó s t ic o p r e s u n t iv o s e
p u e d e r e a liz a r c o n la h is t o r ia c lín ic a y lo s h a lla z g o s d e n e c r o p s ia
( D r e is b a c h , H ., R o b e r , M ., 1 9 9 9 ) .
Los
e s t u d io s
c o m p le m e n t a r io s
que
p e r m it e n
r a t if ic a r
el
d ia g n ó s t ic o f in a l in c lu y e n :
•
L a m e d ic ió n d e e n z im a s h e p á t ic a s
•
E s t u d io h is t o p a t o ló g ic o d e l h íg a d o
9 .3 .4 .2 .1 D i a g n ó s t i c o D i f e r e n c i a l
D e b e r e a liz a r s e e l d ia g n ó s t ic o d if e r e n c ia l c o n t o d a s
a q u e lla s
a f e c c io n e s
que
p ro d u c e n
in t o x ic a c io n e s
h e p á t ic a s a g u d a s .
9 .3 .4 .3 T r a t a m i e n t o
E l t r a t a m ie n t o c o n s is t e e n v ig ila r lo s s ig n o s v it a le s d e l p a c ie n t e ,
in c lu y e n d o la t e m p e r a t u r a , e l p u ls o , la f r e c u e n c ia r e s p ir a t o r ia y la p r e s ió n
a r t e r ia l. L o s s ín t o m a s s e t r a t a r á n e n la f o r m a a p r o p ia d a . E l p a c ie n t e
p u e d e r e c ib ir :
22
•
C a r b ó n a c t iv a d o
•
U n a s o n d a n a s o g á s t r ic a ( N G ) a t r a v é s d e la n a r iz h a s t a e l e s t ó m a g o
p a r a v a c ia r e s t e ú lt im o ( la v a d o g á s t r ic o )
•
D iá lis is
M e d ic a m e n t o ( d im e r c a p r o l o p e n ic ila m in a ) p a r a n e u t r a liz a r e l e f e c t o d e l
t ó x ic o ( D r e is b a c h , H ., R o b e r , M ., 1 9 9 9 ) .
9 .3 .4 .4 A n t í d o t o s p a r a c a s o s d e i n t o x ic a c i ó n a g u d a
9 .4 D E T E R M I N A C I Ó N
•
D im e r c a p r o l
•
D o p a m in a
•
E d e t a t o d e c a lc io d is ó d ic o
•
N o r e p in e f r in a
•
P e n ic ila m in a
•
T r ie n t in a ( J e r r o ld , B .L ., F r a n k , P .P , 2 0 0 2 )
DE CO BRE PO R
E S P E C T R O F O T O M E T R ÍA
D E A B S O R C IÓ N
A T Ó M IC A
9 .4 .1 F U N D A M E N T O :
L a e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a s e b a s a e n la a b s o r c ió n d e
r a d ia c ió n e le c t r o m a g n é t ic a p o r la s p a r t íc u la s a t ó m ic a s ; y a q u e p a r t e d e la
lu z q u e p a s a a t r a v é s d e e s a s p a r t íc u la s a t ó m ic a s e s a b s o r b id a p o r lo s
á t o m o s , y e s u t iliz a d a p a r a p a s a r a s u n iv e l e x c it a d o , d is m in u y e n d o a s í la
in t e n s id a d d e la m is m a ( D a w s o n , J .B ., E llis , D .J ., y N e w t o n , H .J , 1 9 6 8 )
23
C a d a á t o m o a b s o r b e a u n a lo n g it u d d e o n d a d e t e r m in a d a p o r q u e c a d a
u n o t ie n e u n a d if e r e n c ia d e e n e r g ía d is t in t a e n t r e s u s n iv e le s n o r m a l y
e x c it a d o p o r e llo e s t e m é t o d o e s c a r a c t e r ís t ic o p a r a c a d a á t o m o .
D e b id o a s u a lt a s e n s ib ilid a d ( p o r q u e e l e s p e c t r o d e a b s o r c ió n d e u n
e le m e n t o a t o m iz a d o e s t á c o n s t it u id o p o r u n a c a n t id a d lim it a d a d e lín e a s
d is c r e t a s o lo n g it u d e s d e o n d a c a r a c t e r ís t ic a s p a r a c a d a e le m e n t o ) y la
f a c ilid a d c o n la q u e s e p u e d e n a n a liz a r m u c h a s m u e s t r a s s e t r a t a d e u n a d e
la s p r in c ip a le s h e r r a m ie n t a s d e la q u ím ic a a n a lít ic a ( D a w s o n , J .B ., E llis , D .J .,
y N e w t o n , H .J , 1 9 6 8 ) .
L o s m é t o d o s a t ó m ic o s e s t á n e n t r e lo s p r o c e d im ie n t o s a n a lít ic o s m á s
s e le c t iv o s y p r e s e n t a n t a m b ié n la s v e n t a ja s d e la r a p id e z y c o m o d id a d .
L a s e n s ib ilid a d d e m é t o d o s e d e f in e c o m o la c o n c e n t r a c ió n n e c e s a r ia d e
u n e le m e n t o p a r a p r o d u c ir e l 9 9 % d e t r a n s m it a n c ia , lo q u e s e c o r r e s p o n d e
c o n e l 0 ,0 0 4 4 d e a b s o r b a n c ia .
D ir e c t a m e n t e r e la c io n a d o c o n la s e n s ib ilid a d s e e n c u e n t r a e l lím it e d e
d e t e c c ió n , q u e c o r r e s p o n d e a la c o n c e n t r a c ió n n e c e s a r ia d e u n e le m e n t o
p a r a p r o d u c ir u n a s e ñ a l c o n u n a in t e n s id a d t r ip le d e l r u id o d e f o n d o . P o r
r u id o d e f o n d o s e e n t ie n d e t o d a s e ñ a l o b s e r v a b le c u a n d o e l e le m e n t o a
a n a liz a r s e e n c u e n t r a a u s e n t e d e la lla m a y e s d e b id o a la a b s o r c ió n
m o le c u la r y a la d is p e r s ió n d e la s p a r t íc u la s e n lla m a ( P a r k e r , M .M .,
H u m o lle r , F .L . y M a h le r , D .J ,1 9 6 7 ) .
E n c u a n t o a la e x a c t it u d e n c o n d ic io n e s n o r m a le s , e l e r r o r r e la t iv o
a s o c ia d o c o n e l a n á lis is e n a b s o r c ió n c o n lla m a e s d e l o r d e n d e u n 1 a u n 2 % .
T o m a n d o p r e c a u c io n e s p u e d e r e d u c ir s e e s t a c if r a m ín im a m e n t e .
L a t é c n ic a d e e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a p u e d e u t iliz a r s e
a d e m á s d e l a n á lis is c u a lit a t iv o , p a r a e l a n á lis is c u a n t it a t iv o y a q u e la
24
m e d id a d e a b s o r c ió n d e e n e r g ía r a d ia n t e p o r á t o m o s lib r e s e n s u e s t a d o
f u n d a m e n t a l d e e n e r g ía y e s t a n d o e n f a s e g a s e o s a p e r m it e o b t e n e r u n a
s e ñ a l a n a lít ic a q u e p u e d e r e la c io n a r s e , m e d ia n t e la L e y d e B e e r , c o n la
c o n c e n t r a c ió n d e l e le m e n t o e n la m u e s t r a a n a liz a d a ( P a r k e r , M .M .,
H u m o lle r , F .L . y M a h le r , D .J ,1 9 6 7 ) .
F u e n t e : h t t p :/ / g r u p o s .e m a g is t e r .c o m / d o c u m e n t o / a b s o r c io n _ a t o m ic a / 1 0 6 .
9 .4 .2 D E T E R M I N A C I Ó N D E C O B R E
P a ra
la d e t e r m in a c ió n d e C u 2 + e n u n a m u e s t r a d e c o n c e n t r a c ió n
d e s c o n o c id a u t iliz a n d o la e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a , t é c n ic a
d e lla m a , s e r e q u ie r e u n c a lib r a d o p r e v io d e l e q u ip o p a r a lu e g o , c o n u n a
e x t r a p o la c ió n p o d e r h a lla r la c o n c e n t r a c ió n q u e s e p id e , y a q u e la L e y d e
B e e r e s t a b le c e u n r e la c ió n lin e a l e n t r e la a b s o r b a n c ia y la c o n c e n t r a c ió n d e l
e le m e n t o ( R e y n o ld s , R .J ., A ld o u s , K ., 1 9 7 0 ) .
P a r a lle v a r a c a b o la e s p e c t r o f o t o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a , e s n e c e s a r io
a t o m iz a r la m a t e r ia , e s d e c ir , c o n v e r t ir la s m o lé c u la s d e la m u e s t r a a
a n a liz a r e n p a r t íc u la s g a s e o s a s e le m e n t a le s , p a r a c o n s e g u ir lo s e v a p o r iz a n
25
a t e m p e r a t u r a s m u y e le v a d a s y la c o n c e n t r a c ió n d e lo s á t o m o s d e l
e le m e n t o d e in t e r é s s e d e t e r m in a m id ie n d o la a b s o r b a n c ia a s u s lo n g it u d e s
d e o n d a c a r a c t e r ís t ic a s ( R a h m a n , M ., R o b e r t , A .K , 2 0 0 1 ) .
L a c o n v e r s ió n d e la m e z c la d is u e lt a e n á t o m o s lib r e s s e lle v a a c a b o
a s p ir a n d o la d is o lu c ió n q u e m e d ia n t e u n n e b u liz a d o r s e t r a n s f o r m a e n u n
f in o s p r a y ( e s t e p r o c e s o e s e l m a y o r in c o n v e n ie n t e q u e t ie n e a c t u a lm e n t e
la a b s o r c ió n a t ó m ic a , p o r q u e a la lla m a s o lo lle g a n u n 7 u 8 % d e lo s á t o m o s
a s p ir a d o s p o r e l n e b u liz a d o r . E s d e c ir , s e p r o d u c e u n a m u y im p o r t a n t e
p é r d id a d e m u e s t r a ) y s e in t r o d u c e lu e g o e n e l in t e r io r d e la lla m a
p r o d u c id a p o r u n m e c h e r o q u e le a p o r t a la e n e r g ía n e c e s a r ia p a r a a t o m iz a r
d ic h a m u e s t r a y u n a v e z a t o m iz a d a , s i s e h a c e p a s a r u n h a z d e r a d ia c ió n
e le c t r o m a g n é t ic a s o b r e e lla e s t e h a z v e d is m in u id a s u e n e r g ía e n u n a
d e t e r m in a d a lo n g it u d d e o n d a , q u e s e r á la lín e a d e r e s o n a n c ia d e l e le m e n t o
q u e s e q u ie r e a n a liz a r ( R e y n o ld s , R .J ., A ld o u s , K ., 1 9 7 0 ) .
9 .4 .3 I N S T R U M E N T A C I Ó N :
E s p e c t r ó m e t r o d e a b s o r c ió n a t ó m ic a : U n e s p e c t r ó m e t r o d e a b s o r c ió n s e
c o m p o n e f u n d a m e n t a lm e n t e d e c in c o p a r t e s :
• F u e n t e d e r a d ia c ió n , e s p o r lo g e n e r a l u n a lá m p a r a d e c á t o d o h u e c o , q u e
e m it e la s lín e a s a t ó m ic a s c a r a c t e r ís t ic a s d e l e le m e n t o a a n a liz a r , e s t e t ip o
d e lá m p a r a c o n s is t e e n u n á n o d o d e t u n g s t e n o y e n u n c á t o d o c ilín d r ic o ,
c e r r a d o s h e r m é t ic a m e n t e e n u n t u b o lle n o d e N e ó n o A r g ó n a u n a p r e s ió n
d e 1 a 5 T o r r . E l c á t o d o e s t á c o n s t it u id o c o n e l m e t a l c u y o e s p e c t r o s e d e s e a
o b t e n e r . A l a p lic a r u n p o t e n c ia l lo s u f ic ie n t e m e n t e g r a n d e , lo s c a t io n e s
g a s e o s o s a d q u ie r e n u n a e n e r g ía c in é t ic a s u f ic ie n t e p a r a a r r a n c a r a lg u n o s
á t o m o s m e t á lic o s d e la s u p e r f ic ie d e l c á t o d o y p r o d u c ir u n a n u b e a t ó m ic a , a
e s t e f e n ó m e n o s e le lla m a c h is p o r r o t e o . U n a p a r t e d e lo s á t o m o s m e t á lic o s
d e s p r e n d id o s s e e n c u e n t r a n e x c it a d o s , c o n lo q u e a l v o lv e r a s u e s t a d o
26
f u n d a m e n t a l e m it e n u n a r a d ia c ió n c a r a c t e r ís t ic a d e d if e r e n t e s m e t a le s ,
p u d ie n d o e m it ir a s í, s u s e s p e c t r o s c a r a c t e r ís t ic o s ( R e y n o ld s , R .J ., A ld o u s ,
K .,1 9 7 0 ) .
F u e n t e : h t t p :/ / g r u p o s .e m a g is t e r .c o m / d o c u m e n t o / a b s o r c io n _ a t o m ic a / 1 0 6 7 58425.
• S is t e m a p a r a v a p o r iz a r y a t o m iz a r la m u e s t r a , s e p a r t e d e la m u e s t r a e n
d is o lu c ió n y m e d ia n t e u n s is t e m a d e n e b u liz a c ió n s e c o n s ig u e f o r m a r u n
f in o a e r o s o l ( d e r e n d im ie n t o 1 0 % ) . E n e s t e c a s o e l s is t e m a d e n e b u liz a c ió n
e s u n t u b o c o n c é n t r ic o q u e p o r e l e f e c t o V e n t u r i a b s o r b e la d is o lu c ió n
t r a n s f o r m á n d o la e n u n f in o a e r o s o l d e n t r o d e la c á m a r a d e m e z c la . E n la
c á m a r a d e m e z c la s e ju n t a c o n e l a ir e , q u e e s e l o x id a n t e , y c o n e l a c e t ile n o ,
q u e e s e l g a s d e c o m b u s t ió n , y s e c o n d u c e n a l c a b e z a l d e l m e c h e r o d o n d e
o c u r r e la c o m b u s t ió n ( 2 4 0 0 -2 7 0 0 K ) q u e p r o p o r c io n a la t e m p e r a t u r a
a d e c u a d a p a r a la a t o m iz a c ió n d e la m u e s t r a . P a r a q u e s e p r o d u z c a
c o r r e c t a m e n t e la c o m b u s t ió n h a d e lle g a r u n a r e la c ió n a d e c u a d a d e g a s e s
a l q u e m a d o r ; y a q u e s i la r e la c ió n n o e s b u e n a s e p u e d e p r o d u c ir e l
27
r e t r o c e s o d e la lla m a y p o d r ía lle g a r s e a p r o d u c ir la c o m b u s t ió n e n la
c á m a r a d e m e z c la ( R e y n o ld s , R .J ., A ld o u s , K ., 1 9 7 0 ) .
F u e n t e : h t t p :/ / g r u p o s .e m a g is t e r .c o m / d o c u m e n t o / a b s o r c io n _ a t o m ic a / 1 0 6 7 58425.
L a lla m a s e d iv id e e n t r e s r e g io n e s d e t a m a ñ o y a s p e c t o v a r ia b le s e g ú n la
r e a c c ió n d e f lu jo s e x is t e n t e e n t r e lo s g a s e s c o m b u s t ib le y r e d u c t o r . E s t a s
zonas son:
• Z o n a d e c o m b u s t ió n p r im a r ia : s e r e c o n o c e p o r s u lu m in is c e n c ia a z u l, a q u í
n o s e a lc a n z a e l e q u ilib r io t é r m ic o , n o s e p r o d u c e la e s p e c t r o s c o p ía d e
lla m a .
• Z o n a in t e r c o n a l: r e g ió n r ic a e n á t o m o s lib r e s . E s la z o n a m á s u t iliz a d a e n
e s p e c t r o s c o p ía .
• C o n o e x t e r io r : z o n a d e r e a c c io n e s s e c u n d a r ia s d o n d e lo s p r o d u c t o s
f o r m a d o s e n la r e g ió n in t e r io r s e c o n v ie r t e n e n ó x id o s m o le c u la r e s
e s t a b le s .
28
F u e n t e : h t t p :/ / g r u p o s .e m a g is t e r .c o m / d o c u m e n t o / a b s o r c io n _ a t o m ic a / 1 0 6 7 58425.
• M o n o c r o m a d o r q u e d is p e r s a la s d is t in t a s lo n g it u d e s d e o n d a d e la
r a d ia c ió n e m it id a p o r la f u e n t e y s e p a r a la lín e a p a r t ic u la r q u e s e d e s e a
m e d ir , e n e l c a s o d e C u = 3 2 4 .8 n m .
• D e t e c t o r d e r a d ia c ió n y a m p lif ic a d o r d e la s e ñ a l c a s i s ie m p r e s e u t iliz a u n
f o t o m u lt ip lic a d o r q u e t r a n s f o r m a la in t e n s id a d d e r a d ia c ió n e n u n a
c o r r ie n t e e lé c t r ic a f á c ilm e n t e a m p lif ic a b le y m e d ib le . C o n s is t e e n u n a c é lu la
f o t o e lé c t r ic a ; e s d e c ir , la t r a n s d u c c ió n d e la in t e n s id a d lu m in o s a e n
in t e n s id a d f o t o e lé c t r ic a s e c o n s ig u e m e d ia n t e e l e f e c t o f o t o e lé c t r ic o
• R e g is t r a d o r d e la s e ñ a l a n a lít ic a , e s u n d is p o s it iv o q u e p r o c e s a la
c o r r ie n t e r e s u lt a n t e p r o p o r c io n a n d o la s e ñ a l a n a lít ic a q u e s e r e la c io n a c o n
la in t e n s id a d d e la r a d ia c ió n a b s o r b id a d ig it a lm e n t e . C o m o la in t e n s id a d
a b s o r b id a d e p e n d e lin e a lm e n t e d e l n ú m e r o d e á t o m o s d e la e s p e c ie
a b s o r b e n t e p r e s e n t e s e n la lla m a , s e p u e d e r e la c io n a r c o n la c o n c e n t r a c ió n
d e la m u e s t r a ( S a r d a n s . J , 2 0 1 0 ) .
S e g ú n e l e s q u e m a b á s ic o q u e s e p r e s e n t a r á m á s a d e la n t e , la r a d ia c ió n q u e
p r o v ie n e d e la lá m p a r a s e h a c e p a s a r p o r la lla m a d e l m e c h e r o y s e m id e s u
in t e n s id a d . S e v a p o r iz a e l e le m e n t o e n la lla m a , e l v a p o r a t ó m ic o d e l
29
e le m e n t o a b s o r b e g r a n p a r t e d e la r a d ia c ió n c o n lo q u e m e d im o s la
r e d u c c ió n d e la in t e n s id a d d e la r a d ia c ió n p r o d u c id a p o r d ic h o v a p o r d e
e s t a f o r m a s e c o n s ig u e m e d ir la r e d u c c ió n d e la in t e n s id a d d e la r a d ia c ió n
p r o d u c id a p o r la lá m p a r a , a l a t r a v e s a r e l v a p o r a t ó m ic o d e l C u . E s t a
r e d u c c ió n e s la a b s o r b a n c ia d e l e le m e n t o a t o m iz a d o :
A = L o g I0 /I = - L o g T T = I/I0
D o n d e A e s la a b s o r b a n c ia ,I 0 e s la in t e n s id a d d e la r a d ia c ió n c u a n d o s a le d e
la lá m p a r a , I la in t e n s id a d d e la r a d ia c ió n t r a s a t r a v e s a r la m u e s t r a y T e s la
t r a n s m it a n c ia q u e e x p r e s a e l p o r c e n t a je d e r a d ia c ió n q u e a t r a v ie s a la
m u e stra .
E s t a r e d u c c ió n d e la in t e n s id a d d e la r a d ia c ió n s e v e a f e c t a d a p o r :
• L a te m p e ra tu ra
• C a u d a l d e l g a s d e c o m b u s t ió n y d e l g a s o x id a n t e . P a r a q u e la lla m a n o
s u f r a u n r e t r o c e s o la v e lo c id a d d e c o m b u s t ió n d e b e s e r in f e r io r a l c a u d a l.
• E s t r u c t u r a d e la lla m a .
L a a b s o r b a n c ia m e d id a p r e s e n t a u n a d e p e n d e n c ia lin e a l c o n e l n ú m e r o d e
á t o m o s d e la e s p e c ie a b s o r b e n t e q u e h a y e n e l s e n o d e la lla m a , a s í c o m o
c o n la c o n c e n t r a c ió n d e d ic h a e s p e c ie e n la d is o lu c ió n a s p ir a d a R e y n o ld s ,
R .J ., A ld o u s , K ., 1 9 7 0 ) .
30
10 . R E F E R E N C IA S B IB L IO G R Á F IC A S
A b e , A ., Y a m a s h it a , S ., N o m a , A . ( 1 9 8 9 ) . S e n s it iv e , d ir e c t c o lo r im e t r ic a s s a y f o r c o p p e r
in s e r u m . C lin ic a l C h e m is t r y , 3 5 :5 5 2 -5 5 4 .
A g e n c ia p a r a S u s t a n c ia s T ó x ic a s y e l R e g is t r o d e E n f e r m e d a d e s . ( 2 0 0 4 ) . R e s e ñ a
T o x ic o l ó g ic a d e l C o b r e : D e p a r t a m e n t o d e S a lu d y S e r v ic io s H u m a n o s d e E .E .
U .U ., S e r v ic io d e S a lu d P ú b lic a .
A m e r ic a n
P u b lic H e a lt h
A s s o c ia t io n , A m e r ic a n
W a t e r w o r k s A s s o c ia t io n , W a t e r
E n v ir o n m e n t F e d e r a t io n . ( 1 9 9 8 ) . S t a n d a r d M e t h o d s f o r t h e E x a m in a t io n o f
W a t e r a n d W a s t e w a t e r . ( 2 0 v a E d ) . E .E . U .U .,
A r g e n t in a . O r g a n is m o A r g e n t in o d e A c r e d it a c ió n O A A . ( 2 0 0 8 ) . G u ía p a r a la V a lid a c ió n
d e M é t o d o s d e E n s a y o . V e r s ió n 2 .
A r n a l, N ., C r is t a lli, D .O ., D e A la n iz , M .J . y M a r r a C A . ( 2 0 1 0 ) . C lin ic a l u t ilit y o f c o p p e r ,
c e r u lo p la s m in ,
and
m e t a llo t h io n e in
p la s m a
d e t e r m in a t io n s
in
hum an
n e u r o d e g e n e r a t iv e p a t ie n t s a n d t h e ir f ir s t -d e g r e e r e la t iv e s . B r a in R e s , 1 1 3 0 : 1 1 8 13 0 .
B á r a n y , E ., B e r g d a h l, I . y O s k a r s s o n , A . ( 2 0 1 0 ) . R e la t io n s h ip s b e t w e e n t r a c e e le m e n t s
c o n c e n t r a t io n s in h u m a n b lo o d a n d s e r u m : T o x ic o l L e t t , 1 3 4 : 1 7 7 -1 8 4 .
31
B la n e s , P . S ., B e n ít e z , M . E ., G im é n e z , M .C .( 2 0 0 4 ) . V a lid a c ió n d e u n a m e t o d o lo g ía p a r a
la e x t r a c c ió n y d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n a g u a s n a t u r a le s s u b t e r r á n e a s p o r
e s p e c t r o m e t r ía d e a b s o r c ió n a t ó m ic a . A r g e n t in a : U n iv e r s id a d N a c io n a l d e l
N o r d e s t e . C o m u n ic a c io n e s C ie n t íf ic a s y T e c n o ló g ic a s .
C la r k e , J .T . ( 1 9 9 8 ) . E a r ly t r e a t m e n t o f M e n k e s d is e a s e w it h p a r e n t a l c o o p e r ( s ic ) h is t id in e : lo n g t e r m f o llo w -u p o f f o u r t r e a t e d p a t ie n t s : A m . J . M e d . G e n e t ,
7 6 :1 5 4 -1 6 4 .
C r u b e lla t o , D ., D i R u s o , C . ( 2 0 0 9 ) . A s p e c t o s p r á c t ic o s d e la v a lid a c ió n e in c e r t id u m b r e
e n m e d id a s q u ím ic a s . A r g e n t in a : P r o g r a m a I b e r o a m e r ic a n o d e C ie n c ia y
T e c n o lo g ía p a r a e l D e s a r r o llo C Y T E D .
D a w s o n , J .B ., E llis , D .J ., y N e w t o n , H .J . ( 1 9 6 8 ) . D ir e c t E s t im a t io n o f C o o p e r in S e r u m
a n d U r in e b y A t o m ic A b s o r p t io n . C lin ic a l C h e m is t r y , 2 1 -3 3
D e la V e g a , A . ( 2 0 0 8 ) . E n f e r m e d a d d e W ils o n . T r a t a m ie n t o d e g a s t r o e n t e r o lo g ía
h e p a t o lo g ía y n u t r ic ió n p e d iá t r ic a ( 2 a E d .) . M a d r id . ( s .n .)
D e p a r t m e n t o f H e a lt h a n d H u m a n S e r v ic e s , F o o d a n d D r u g A d m in is t r a t io n , C e n t e r f o r
D r u g E v a lu a t io n a n d R e s e a r c h a n d C e n t e r f o r V e t e r in a r y M e d ic in e . ( 2 0 0 1 ) .
G u id a n c e f o r I n d u s t r y B io a n a ly t ic a l M e t h o d V a lid a t io n . U .S .
32
G a r c ía M , H o ls t I , S c h o s in s k y K , R o d r ig u e z R . ( 1 9 9 3 ) . O p t im iz a c ió n d e u n m é t o d o
c o lo r im é t r ic o p a r a la c u a n t if ic a c ió n d e c o b r e e n s u e r o . R e v is t a C o s t a r r ic e n s e
d e C ie n c ia s M é d ic a s . 1 4 : 3 3 -4 2 .
H o lc o m b e , H ., T e d d in g t o n , L .G .( 1 9 9 8 ) .T h e F it n e s s f o r P u r p o s e o f A n a ly t ic a l M e t h o d s . A
L a b o r a t o r y G u id e t o M e t h o d V a lid a t io n a n d R e la t e d T o p ic s : E U R A C H E M .
I n t e r n a t io n a l C o n f e r e n c e o n H a r m o n is a t io n o f T e c h n ic a l R e q u ir e m e n t s f o r R e g is t r a t io n
o f P h a r m a c e u t ic a ls f o r H u m a n U s e , I C H . ( 1 9 9 4 ) . H a r m o n is e d T r ip a r t it e
G u id e lin e Q 2 A T e x t o n V a lid a t io n o f A n a ly t ic a l P r o c e d u r e s .
J e r r o ld , B .L ., F r a n k , P .P . ( 2 0 0 2 ) . P o is o n in g a n d T o x ic o lo g y H a n d b o o k . ( 3 a E d .) . O h io :
L e x i.
J im é n e z M ., S c h o s in s k y , K . ( 2 0 0 2 ) . V a lid a c ió n d e la d e t e r m in a c ió n d e c o b r e e n s u e r o
e m p le a n d o e l á c id o b ic in c o n ín ic o : r e la c ió n c o b r e / c e r u lo p la s m in a e n p a c ie n t e s
con
e n fe rm e d a d
de
W ils o n
y
p a c ie n t e s s in
la
e n f e r m e d a d . R e v is t a
C o s t a r r ic e n s e d e C ie n c ia s M é d ic a s . V o l. 2 3 n o .1 C o s t a R ic a
J u á r e z , J .G . ( 2 0 0 3 ) . V a lid a c ió n d e M é t o d o s p a r a C u a n t if ic a r C o b r e e n S u e r o . ( T e s is d e
L ic e n c ia t u r a ) . U n iv e r s id a d d e S a n C a r lo s d e G u a t e m a la , F a c u lt a d d e C ie n c ia s
Q u ím ic a s y F a r m a c ia . G u a t e m a la .
33
L ig h t m a n , A ., B r a n d e s , J .M ., B in u r , N . ( 1 9 8 6 ) . U s e o f t h e s e r u m c o p p e r / z in c r a t io in t h e
d if f e r e n t d ia g n o s is o f o v a r ia n m a lig n a n c y . C lin ic a l C h e m is t r y . 3 2 :1 0 1 -1 0 3 .
M a k in o , T . I t o h , J .I . ( 1 9 8 1 ) . A h ig h ly s e n s it iv e c o lo r im e t r ic d e t e r m in a t io n o f s e r u m
c o p p e r u s in g , α ,β , δ -t e t r a k is ( 4 N -t r im e t h y la m in o p h e n y l) -p o r p h in e . C lin ic a l
C h im is t r y A c t a 1 9 8 1 ; 1 1 :1 -8 .
M a r t i, J .A ., M e r c a d a l, H .D . ( 2 0 0 2 ) . M e d ic in a d e l T r a b a jo ( 2 a E d .) : M a s s o n .
M a r y a d e le , J . ( 2 0 0 6 ) . T h e M e r c k I n d e x . A n e n c y c lo p e d ia o f C h e m ic a ls , D r u g s a n d
B io lo g ic a ls ( 1 4 v a e d .) : M e r c k R e s e a r c h L a b o r a t o r ie s .
M e jia , O .R ., R u iz , M ., C la v ijo , D .( 2 0 0 6 ) . ( v o l 4 7 ) . B a s e s b io ló g ic a s y p a t o b io ló g ic a s
h u m a n a s d e l m e t a b o lis m o d e l c o b r e . E s p a ñ a : U n iv e r s id a d M e d ic a .
M é n d e z , M . ( 1 9 8 7 ) . T o x ic o lo g ía d e l c o b r e . ( s .n .) .T o x ic o lo g ía , 4 : 1 0 1 -1 2 0 .
M illa n , A ., R u iz , M . ( 2 0 0 8 ) . E n f e r m e d a d d e W ils o n . S e v illa : U n iv e r s id a d A u t ó n o m a d e
M a d r id . H o s p it a l U n iv e r s it a r io d e V a lm e . F u n d a c ió n J im é n e z D ía z .
34
P a r k e r , M .M ., H u m o lle r , F .L . y M a h le r , D .J . ( 1 9 6 7 ) . D e t e r m in a t io n o f C o p p e r a n d Z in c in
B io lo g ic a l M a t e r ia l. C lin ic a l C h e m is t r y , 1 3 -4 0 .
P e r e ir a , A .S . ( 2 0 1 1 ) . ( C a p . 3 1 ) . P r e c o n c e n t r a t io n a n d d e t e r m in a t io n o f C u in a f r e s h
w a t e r s a m p le u s in g m id if ie d s ilic a g e l a s a s o lid -p h a s e e x t r a c t io n a d s o r b e n t :
T e c n o lo g ía Q u ím ic a .
R a h m a n , M ., R o b e r t , A .K . ( 2 0 0 1 ) . D e t e r m in a t io n o f C o p p e r in s e a W a t e r b y A t o m ic
A b s o r p t io n S p e c t r o s c o p y . B e lf a s t : T h e Q u e e n U n iv e r s it y , 9 -1 3 .
R a n d a ll, C . B a s e lt ,. ( 2 0 0 0 ) . D is p o s it io n o f T o x ic D r u g s a n d C h e m ic a ls in M a n ( 5 a E d .) .
C a lif o r n ia : C h e m ic a l T o x ic o lo g y I n s t it u t e .
R e y n o ld s , R .J ., A ld o u s , K . ( 1 9 7 0 ) . A t o m ic A b s o r p t io n S p e c t r o s c o p y . N e w Y o r k : B a r n e s
a n d N o b le .
R o b e r t , R . L a u w e r y s , S . ( 1 9 9 4 ) . T o x ic o l o g ía in d u s t r ia l e in t o x ic a c io n e s p r o f e s io n a le s ( 2 a
E d .) : M a s s o n .
S a r d a n s , J . ( 2 0 1 0 ) . D e t e r m in a t io n o f A s , C d , C u , H g a n d P b in B io lo g ic a l S a m p le s b y
M o d e r n E le c t r o t h e r m a l A t o m ic S p e c t r o s c o p y . S p e c t r o c h im ic a P a r t B , 6 5 :2
35
S m e y e r s , J ., M a s s a r t , D . L ., V e r s ie k , J ., S p e e c k e , A . ( 1 9 7 3 ) . T h e d e t e r m in a t io n o f c o p p e r
u n d z in c in b io lo g ic a l m a t e r ia ls . A c o m p a r is o n o f a t o m ic a b s o r p t io n w it h
s p e c t r o p h o t o m e t r y a n d n e u t r o n a c t iv a t io n . C lin ic a l C h e m is t r y . A c t a 4 4 , 2 4 3 .
U n it e d S t a t e s P h a r m a c o p e ia 2 8 a n d N a t io n a l F o r m u la r y 2 3 . ( 2 0 0 5 ) . U n it e d S t a t e s
P h a r m a c o p e ia l C o n v e n t io n . U S A .
W e in s t o c k , N . U h le m a n n , M . ( 1 9 8 1 ) . A u t o m a t e d D e t e r m in a t io n o f C o p p e r in U n d ilu t e d
S e ru m
by
A t o m ic
A b s o r p t io n
S p e c tro sc o p y . D e p a rtm e n t
of
C lin ic a l
C h e m is t r y . M e d ic a l U n iv e r s it y C lin ic . C lin ic a l C h e m is t r y . 2 7 / 8 , 1 4 3 8 -1 4 4 0 .
W illa r d , H . e t .a l. ( 1 9 9 1 ) . M é t o d o s I n s t r u m e n t a le s d e A n á lis is . ( 7 a e d .) M é x ic o . E d it o r ia l
I b e r o a m e r ic a n a . 5 8 1 -5 9 9 .
W illia m s , H .L ., J o h n s o n D .J ., H a u t , M .J . ( 1 9 7 7 ) . S im u lt a n e o u s s p e c t r o p h o t o m e t r y o f
F e 2 + , a n d C U 2 + , in s e r u m d e n a t u r e d w it h g u a n id in e h y d r o c h lo r id e . C lin ic a l
C h e m is t r y 2 3 :2 3 7 - 2 4 0 .
W illia m , N . ( 2 0 0 7 ) . E n v ir o n m e n t a l a n d O c c u p a t io n a l M e d ic in e ( 4 a e d .) . L ip p in c o t t :
W illia m s & W ilk in s .