Bedøvelse av fisk og måling av CO2 i
bedøvelsestanken under vaksinering
AquaTraining Settefisk 2014
Bernt Melgård
Camilla Robertsen
Agenda
-
Generelt om bedøvelse
-
Litt om CO2, O2 og pH
-
Lab-forsøk: Bedøvelse av fisk
-
Felt-forsøk: Bedøvelse av fisk i forbindelse med vaksinering
-
Måling av CO2 i bedøvelsetank hos ulike settefiskanlegg ved
vaksinering
-
Alternativ måte å blande Trikainmesilat og Natriumbikarbonat
-
Oppsummering
Generelt om bedøvelse av fisk
Det norske markedet har 3 ulike kommersielle
bedøvelsesmidler med markedsføringstillatelse (MT)
Tricaine PHARMAQ®
Finquel®
Benzoak®
(Trikainmesilat, 1000mg/g)
(Trikainmesilat, 1000mg/g)
(Benzokain, 20% i alkohol)
Tricaine PHARMAQ og Finquel er i pulverform og må bufres med
natrium bikarbonat.
Benzoak doseres direkte i bedøvelseskaret.
Aqui-S vet. Anestesi/sedasjonsmiddel-bedøvelse (isoeugenol, 540mg/ml)
Generelt om bedøvelse av fisk
Tricaine mesilat er derivater av benzocain, og alle er
lokalbedøvelser
Samme virkningsmekanisme: Blokkerer Na⁺- kanalene
og hemmer overføring av nerveimpulser.
Generelt om bedøvelse av fisk
• Stamløsningen bør brukes opp i løpet av 1 døgn, helst samme
dag. Tricain mesilat er lysfølsomt.
• Tilbakeholdelsestider:
 Tricaine PHARMAQ: 70 døgngrader etter siste behandling
 Konkurrerende produkter: 21 dager
Innsovningstiden skal være mellom 45-60 sekunder. Fisken
skal ligge rolig under vaksineringen
Karbondioksid (CO2)
Påstand: ”Ved bruk av Trikainmesilat i kombinasjon med
bikarbonat vil det bli høy CO2 i bedøvelsestanken. ”
For å oppnå sedasjon av fisk med CO2 må man opp i verdier på
100 mg/l og høyere.
Oksygen (O2) og pH i bedøvelsestanken
• Oksygen skal alltid være ca.100%.
• pH bør ligge rundt pH 7
Litt kjemi….
H₂O + CO₂ ↔ H₂CO₃(karbonsyre) ↔ H⁺ + HCO₃⁻ (bikarbonat)
Lab-forsøk: Bedøvelse av fisk med
Tricainmesilat
Hensikt
• Teste Trikainmesilat under kontrollerte betingelser på
ILAB.
• Få erfaring med bruken av bedøvelse og
natriumbikarbonat (buffer)
• Teste «ny type» buffer: natriumfosfat
Metode
• Gjennomført på ILAB
• Vannkvalitet ved ILAB
• pH ~7
• CO2 ~ 1-2 mg/l
• O2 ~ 80% metning
• Temperatur 12 °C
• Fisk på 47 g, sultet i 1 døgn
Målinger
Målte CO2, O2 2 og pH, samt innsovningstid
pH, CO2 og O2 ved ulike tider etter innblanding av Tricaine PHARMAQ. Tid 0 er før fisken tilsettes.
0 min
3 min
6 min
9 min
pH
CO2 (mg/l)
O2 (% metning)
Innsovningstid (s) etter tilsetning av fisk (10 fisk per bedøvelsesrunde)
Fiskebatch
Innsovningstid (min)
1
2
3
Oppsett
1. Buffer (natriumbikarbonat) og Trikainmesilat,
med og uten fisk
2. Buffer (natriumfosfat) og Trikainmesilat, med
og uten fisk
3. Trikainmesilat med fisk
4. Buffer (natriumbikarbonat) med fisk
Resultat pH
Resultat CO2
Resultat- innsovningstid
Tricaine + bikarbonat
Fiskebatch
Innsovningstid (s)
1
47
2
42
3
36
2
32
3
38
Tricaine + natriumfosfat
Fiskebatch
Innsovningstid (s)
1
39
Rask innsovning- litt høy dose
Tricaine
Fiskebatch
Innsovningstid (s)
1
57
Bikarbonat
Fiskebatch
Innsovningstid (s) 7 min 45 s
1
2
49
3
55
Kan se ut til at innsovningstiden øker ved
bruk av Tricaine alene (uten buffer)
Fisken sovner ikke inn av bikarbonat alene
(vi får heller ikke økning i CO2 …)
Resultat pH og CO2 i stamløsninger
Tricaine (3 g/l)
1.måling
2.måling
pH
2,905
2,861
Oksygen (% metning)
101,7
105,5
1
3
CO2 (mg/l)
Natriumfosfat (6 g/l)
pH
Oksygen (% metning)
CO2 (mg/l)
Bikarbonat (3 g/l)
pH
Oksygen (% metning)
CO2 (mg/l)
1.måling
2.måling
7,029
94,8
1
8,168
107,2
17
6,79
94,2
2
Oppsummering CO2
• Natriumbikarbonat i kombinasjon med Trikainmesilat
øker CO2, men når ikke nivåer som er skadelige ved kort
tid i bedøvelsesvannet. Nivåene gir ingen sedativ effekt
over så kort tid.
• CO2 -nivået stiger ikke når natriumfosfat benyttes som
buffer.
Oppsummering pH
• Trikainmesilat med buffer gir en stabil pH
• Trikainmesilat alene reduserer pH signifikant
• Natriumbikarbonat øker pH
Oppsummering sedasjon
• Trikainmesilat i kombinasjon med begge de testede
bufferene sikret en god og rask sedasjon
• Det tar litt lenger tid å sedere fisken ved bruk av
Trikainmesilat alene.
• Bikarbonat alene gir ingen sedasjon.
Feltforsøk:
Bedøvelse av fisk i forbindelse med
vaksinering
Hensikt
- Innhente erfaringsdata fra kommersiell bruk
- Undersøke pH og CO2 ved bruk av
Trikainmesilat.
Materiale og metode
• Kommersielt anlegg, Atlantisk laks (80g)
• Ferskvann, 5 °C
• Holdetank => 60 L i bedøvelseskar (manuell bedøving)
• Bedøvelse: Trikainmesilat
• Manuell vaksinering (4-mannslag)
• CO2 og pH registeringer (0, 3, 6, 9, 12, 15 min)
• 3 serier med registreringer
• Det ble brukt ca. dobbel dose med Trikainmesilat (185,2 mg/l)
Fisken ble bedøvd i forbindelse med vaksinering, og anleggets rutiner i forhold til
innblanding, dosering og skifte av bedøvelse ble fulgt.
CO2 og pH i bedøvelseskaret
Holdetank: 21 mg/l CO2 og pH 5,8
Oppsummering Trikainmesilat
CO2
• Verdiene øker fra 0-3 min.
(overstiger ikke 40 mg/l)
• Verdiene synker deretter gradvis gjennom
forsøksperioden.
pH
• Stiger jevnt gjennom forsøksperioden.
Felt-målinger: Måling av CO2
i bedøvelsetank hos ulike settefiskanlegg.
Gjennomføring
• CO2 ble målt i bedøvelsestanken i 8 settefiskanlegg.
• Første måling ble gjort før fisken kommer opp i badet,
dvs. 2-3 min etter en har blandet bedøvelse/buffer.
• Neste målingene er etter 10, 20, 40, 60, 90 og 120 min
alt etter hvor ofte en skifter bedøvelse.
Resultat CO2 (mg/l)
Anlegg H: Resultat CO2 - Alternativ måte å
blande Tricainmesilat og buffer i
bedøvelsestanken
Oppsummering
• Det er ikke kritisk om fisken blir overført i bad med CO2
verdier på opp mot 60 mg/l i kort tid. Man kan eventuelt
velge en annen buffer enn bikarbonat.
• pH må være mest mulig nær pH 7, for optimal effekt av
bedøvelsen (Trikainmesilat)
• Den alternative måten å blande ut Trikainmesilat/buffer
på er effektiv ved høy CO2.
• Bedøvelsestid; helst ikke lenge tid enn 45-60 sekunder
på innsovningen, skal ligge rolig under vaksineringen
• Bli kjent med ”ditt eget vann”. Vannkjemi og
bufferkapasitet er ulik mellom anleggene