Prøvevejledningen februar 2015
Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 1 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Indledning ..................................................................................................... 7 Geografi: .................................................................................................................................................................... 7 Telefon: ...................................................................................................................................................................... 7 Telefax: ....................................................................................................................................................................... 7 Åbningstid: ................................................................................................................................................................. 8 Vagtordning: .............................................................................................................................................................. 8 Rekvirering af akutte mikrobiologiske prøver i tidsrummet fra klokken 22.00-08.00: ............................................... 8 Telefonisk rådgivning: ................................................................................................................................................ 8 Patienttilsyn: .............................................................................................................................................................. 8 Konferencer: ............................................................................................................................................................... 9 Videnskabelige undersøgelser:................................................................................................................................... 9 Principper for mikrobiologisk undersøgelse ................................................... 9 Generelt: .................................................................................................................................................................... 9 Undersøgelse for specielle bakterier og svampe: ..................................................................................................... 10 Bestilling af mikrobiologisk undersøgelse .................................................... 11 Utensilier: ................................................................................................................................................................. 11 Prøvetagningssæt: ................................................................................................................................................... 11 Bloddyrkningskolbe .................................................................................................................................................. 12 Bloddyrkningskolbe .................................................................................................................................................. 12 Bloddyrkningskolbe .................................................................................................................................................. 12 Bloddyrkningskolbe .................................................................................................................................................. 12 Bloddyrkningskolbe .................................................................................................................................................. 12 Bloddyrkningskolbe .................................................................................................................................................. 12 Bloddyrkningskolbe .................................................................................................................................................. 13 Bloddyrkningskolbe .................................................................................................................................................. 13 Bloddyrkningskolbe .................................................................................................................................................. 13 Bloddyrkningskolbe .................................................................................................................................................. 13 Chlamydia trachomatis/ Neisseria gonorrhoeae ..................................................................................................... 13 Urintransportrør....................................................................................................................................................... 14 EDTA-glas, 3ml ......................................................................................................................................................... 14 Blodprøverør med gel .............................................................................................................................................. 14 Ekspektoratdåse m/ plasticcontainer ...................................................................................................................... 14 eSwab transportmedium .......................................................................................................................................... 15 eSwab transportmedium .......................................................................................................................................... 15 Forsendelsesetui til 2 objektglas .............................................................................................................................. 15 Forsendelseshylster, sæt .......................................................................................................................................... 15 Forsendelsesrør til sprøjter ...................................................................................................................................... 15 Fæcesrør komplet..................................................................................................................................................... 16 Objektglas uslebne ................................................................................................................................................... 17 Objektglas, facetslebne ............................................................................................................................................ 17 Plastflaske, 250mL ................................................................................................................................................... 17 Plastflaske, 1 L.......................................................................................................................................................... 17 Spidsglas m/skruelåg, sterile.................................................................................................................................... 17 Spidsglas m/skruelåg, sterile.................................................................................................................................... 17 Sprøjte 3 mL Luer Lock ............................................................................................................................................. 18 Sugekateter Ideal, lige ............................................................................................................................................. 18 Sugekateter Ideal, lige ............................................................................................................................................. 18 Termobeholder ......................................................................................................................................................... 18 Trakeal sugesæt med vaccumkontrol ...................................................................................................................... 18 Vatpind, steril, hvid .................................................................................................................................................. 18 Urinprøvesæt, steril .................................................................................................................................................. 18 Urin-movetter (borsyreglas) ..................................................................................................................................... 18 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 2 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Efter prøvetagning ................................................................................................................................................... 19 Opbevaring:.............................................................................................................................................................. 19 Indlevering: .............................................................................................................................................................. 19 Akutte prøver: .......................................................................................................................................................... 19 Mikrobiologiske prøvemodtagelser: ........................................................................................................................ 19 Transport:................................................................................................................................................................. 20 Svartyper: ................................................................................................................................................................. 20 Afsendelse af svar: ................................................................................................................................................... 20 Tolkning af svar: ....................................................................................................................................................... 21 Følsomshedsbestemmelse in vitro: .......................................................................................................................... 22 Supplerende undersøgelser: ..................................................................................................................................... 22 Undersøgelseskategorier ............................................................................. 23 Abscesmateriale, aspireret pus ................................................................................................................................ 23 Adenovirus antistof, (se Luftvejspanel). ................................................................................................................... 24 Adenovirus fæces, (se diarreudredning). .................................................................................................................. 24 Adenovirus øje.......................................................................................................................................................... 24 Antituberkuløse midler, (se Serumkoncentration af antituberkuløse midler). ......................................................... 24 Arena (Lassa, Junin) virus PCR og antistof IgM, IgG ................................................................................................. 25 Aspergillus galactomanan antigen, (se Rigshospitalets prøvevejledning) ............................................................... 25 Aspergillus antistof .................................................................................................................................................. 25 Pus, sårsekret, sekret podning ................................................................................................................................. 25 AST (anti-streptolysin O) .......................................................................................................................................... 27 Bartonella henselae (cat scratch disease) og Bartonella Quintana (trench fever) antistof ..................................... 28 Bartonella henselae (cat scratch disease) og Bartonella Quintana (trench fever) PCR ........................................... 28 Biopsi materiale, (se Væv, knogle og vævs-biopsier). .............................................................................................. 29 Bloddyrkning ............................................................................................................................................................ 29 BK polyomavirus DNA/RNA ...................................................................................................................................... 32 Bordetella pertussis IgG antistof, (se kighoste)........................................................................................................ 32 Bordetella pertussis/parapertussis DNA/RNA, (se kighoste). .................................................................................. 32 Borrelia burgdorferi antistoffer ................................................................................................................................ 32 Bronkoalveolær lavage (BAL) ................................................................................................................................... 34 Brucella antistof ....................................................................................................................................................... 36 Brucella DNA/RNA .................................................................................................................................................... 36 Burkholderia pseudomallei DNA/RNA ...................................................................................................................... 36 Børneorm (Enterobius vermicularis) ........................................................................................................................ 36 Campylobacter antistof Ig(G,M,A), (se Rigshospitalets prøvevejledning) ................................................................ 38 Candida mannan (antigen og antistof undersøgelse) .............................................................................................. 38 Chikungunya virus PCR og antistof IgM, IgG ............................................................................................................ 39 Chlamydophila pneumoniae antistof IgG & IgM ...................................................................................................... 39 Chlamydophila pneumoniae DNA, (se Mycoplasma pneumoniae DNA/Chlamydophila pneumoniae DNA). .......... 39 Chlamydophila psittaci antistof (papegøjesyge) ...................................................................................................... 39 Chlamydia psittaci DNA............................................................................................................................................ 39 Chlamydia trachomatis og Neisseria gonorrhoeae RNA .......................................................................................... 41 Clostridium botulinum .............................................................................................................................................. 42 Clostridium botulinum toksiner ................................................................................................................................ 43 Clostridium difficile, (se Gastroenteritis, diagnostik) ............................................................................................... 43 Coccidioides antistof ................................................................................................................................................ 43 Coxiella burnetii antistof (Q-fever) ........................................................................................................................... 43 Coxiella burnetii PCR (Q-fever) ................................................................................................................................. 43 Crimean Congo hemorrhagic fever virus DNA/RNA, (se Krim-Congovirus PCR og antistof IgM, IgG). ..................... 44 Cryptococcus antigen ............................................................................................................................................... 44 CSV-syfilisantistoffer fuld undersøgelse ................................................................................................................... 44 Cytomegalovirus DNA kvantitativ/viral load, (se Rigshospitalets prøvevejledning). ............................................... 44 Cytomegalovirus (CMV) antistoffer .......................................................................................................................... 44 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 3 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Denguevirus antigen, (se Rigshospitalets prøvevejledning) ..................................................................................... 46 Denguevirus IgG og IgM antistof, (se Rigshospitalets prøvevejledning) .................................................................. 46 Diaréudreding, (se Gastroenteritis, diagnostik) ....................................................................................................... 47 Diaréudredning (tarmpatogene parasitter) DNA/RNA, (se Duodenalsekret). ......................................................... 47 Dientamoeba fragilis ................................................................................................................................................ 47 Difteritoksin antistof ................................................................................................................................................ 48 Duodenalsekret ........................................................................................................................................................ 48 Ebola virus PCR og antistof IgM, IgG ........................................................................................................................ 49 Echinococcus (mikroskopi) ....................................................................................................................................... 50 Echinococcus granulosus antistof, (se Rigshospitalets prøvevejledning) ................................................................. 50 Echinococcus multilocularis antistof ........................................................................................................................ 50 Ehrlichia antistof ...................................................................................................................................................... 50 Encephalit udredning, (se Herpes simplex virus (HSV) antistof, eller Varicella zoster virus (VZV) DNA). ................. 50 Encephalit-udredning ............................................................................................................................................... 50 Ekspektorat, trakeal- og bronkialsekret ................................................................................................................... 52 Enterobius vermicularis, (se børneorm) ................................................................................................................... 54 Entamoeba histolytica antistof ................................................................................................................................ 54 Enterovirus IgM ........................................................................................................................................................ 54 Enterovirus RNA, fæces ............................................................................................................................................ 54 Enterovirus RNA ....................................................................................................................................................... 54 Epstein-Barr virus (EBV) antistoffer.......................................................................................................................... 55 Epstein-Barr virus (EBV) DNA Kvant, (se Rigshospitalets prøvevejledning).............................................................. 57 Fasciola hepatica antistof ........................................................................................................................................ 57 Filarioidea antistof ................................................................................................................................................... 58 Flucytosin serum koncentration ............................................................................................................................... 58 Franciscella tularensis antistof ................................................................................................................................. 58 Franciscella tularensis DNA ...................................................................................................................................... 58 Franciscella tularensis (dyrkning) ............................................................................................................................. 58 Fæces for orm, æg og cyster, se Gastroenteritis, diagnostik ................................................................................... 59 Gastroenteritis, diagnostik ....................................................................................................................................... 59 GAT, (se Gonokok antistof (GAT)). ........................................................................................................................... 62 Giardia trofozoitter, (se Duodenalsekret). ............................................................................................................... 62 Gonokokker, (se Neisseria gonorrhoeae (gonokokker)(dyrkning) og Chlamydia trachomatis og Neisseria gonorrhoeae RNA). .................................................................................................................................................. 63 Gonokok antistof (GAT) ............................................................................................................................................ 63 Gul feber virus PCR og antistof IgM, IgG .................................................................................................................. 63 Haemophilus ducrei ................................................................................................................................................. 63 Haemophilus influenza type b antistof (Hib) ............................................................................................................ 63 Hantavirus PCR og antistof IgM, IgG........................................................................................................................ 63 Helicobacter pylori antigen i fæces .......................................................................................................................... 64 Helicobacter pylori antistoffer ................................................................................................................................. 65 Hepatitis A virus (HAV) ............................................................................................................................................. 65 Hepatitis A virus (HAV) PCR ...................................................................................................................................... 68 Hepatitis B virus (HBV) ............................................................................................................................................. 68 Hepatitis B virus (HBV) subtype og resistensbestemmelse ...................................................................................... 71 Hepatitis B virus (HBV), DNA (PCR) kvantitativ, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) ............................ 71 Hepatitis C virus (HCV) ............................................................................................................................................. 71 Hepatitis C virus genotypning, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) ...................................................... 72 Hepatitis C virus, RNA (RT-PCR) kvantitativ, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) ................................. 72 Hepatitis D virus PCR ................................................................................................................................................ 72 Hepatitis D virus antigen og antistof HDV ............................................................................................................... 73 Hepatitis E PCR ......................................................................................................................................................... 73 Hepatitis E antistof IgM, IgG .................................................................................................................................... 73 Hepatitis G virus (GBV-C) RNA (RT-PCR) ................................................................................................................... 73 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 4 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Herpes simplex virus (HSV) antistof ......................................................................................................................... 73 Herpes simplex virus (HSV) DNA (typespecifik) ........................................................................................................ 74 Histoplasma antistof ................................................................................................................................................ 75 HIV-1 genotypisk resistensbestemmelse .................................................................................................................. 76 HIV-1 genotypisk tropisme test ................................................................................................................................ 76 HIV-1 integrase resistens ......................................................................................................................................... 76 HIV-1 RNA (Viral load) kvantitativ (RT-PCR), (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) ................................ 76 HIV-1 PCR (DNA) kvalitativ ....................................................................................................................................... 76 HIV 1 og HIV 2 (antigen- og antistofundersøgelse) .................................................................................................. 77 HSV, (se Herpes simplex virus (HSV) antistof). ......................................................................................................... 78 Hudsvampe .............................................................................................................................................................. 78 Human herpes virus 6A, 6B, 7 DNA .......................................................................................................................... 79 Human papillomavirus DNA/RNA ............................................................................................................................ 81 Influenza (A+B) virus DNA/RNA ................................................................................................................................ 81 Influenza C................................................................................................................................................................ 81 Influenza virus antistof, (se Luftvejspanel). .............................................................................................................. 81 Influenzavirus subtypning ........................................................................................................................................ 81 Influenzavirus, genotypisk resistens overfor neuramidasehæmmer ........................................................................ 82 Itraconazol serum koncentration ............................................................................................................................. 82 I.v. kateterspids ........................................................................................................................................................ 82 Japansk encephalit virus PCR og antistof ................................................................................................................. 83 JC-virus ultrasensitiv ................................................................................................................................................. 83 Kighoste (Bordetella pertussis) antistoffer ............................................................................................................... 83 Kighoste (Bordetella pertussis) DNA ........................................................................................................................ 84 Koncentrationsbestemmelse af antibiotika ............................................................................................................. 85 Krim-Congovirus PCR og antistof IgM, IgG............................................................................................................... 87 Legionella DNA ......................................................................................................................................................... 88 Legionella pneumophila antigen i urin (LUT) ........................................................................................................... 89 Legionella pneumophila antistof (LAT) .................................................................................................................... 90 Leishmania arter antistof ......................................................................................................................................... 90 Leptospira DNA/RNA ................................................................................................................................................ 90 Leptospira DNA/RNA og dyrkning ............................................................................................................................ 91 Leptospira antistof (Weil)......................................................................................................................................... 91 Listeria monocytogenes antistof .............................................................................................................................. 91 Luftvejspanel (inf. virus, Adenovirus og RSV antistof) .............................................................................................. 91 Luftvejsvirus DNA/RNA............................................................................................................................................. 93 Malaria ..................................................................................................................................................................... 94 Maarburg Virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof ...................................................................................................... 96 MTB kompleks mikroskopi og PCR ........................................................................................................................... 97 Meningokok antistoffer (MAT) ................................................................................................................................. 97 Morbillivirus IgM og IgG antistof, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) ................................................ 97 Morbillivirus IgG antistof immunstatus, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) ....................................... 97 Morbillivirus DNA ..................................................................................................................................................... 98 MRSA (meticillinresistente S. aureus)....................................................................................................................... 98 MTB kompleks mikroskopi og PCR, (se Mycobacterium dyrkning og DNA/RNA (TB)). ............................................ 99 Mycobacterium tuberculosis (MTB) kompleks, rifampicin og isoniazid resistens (kan udføres på mikroskopipositive og andet ekspektorater)........................................................................................................................................... 99 Mycobacterium dyrkning og DNA/RNA (TB) .......................................................................................................... 100 Mycoplasma, (se Non-gonoroisk, non-klamydiel urethrit/cervicit udredning DNA/RNA) ...................................... 100 Mycoplasma pneumoniae IgG og IgM antistof, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) ......................... 100 Mycoplasma pneumoniae DNA/Chlamydophila pneumoniae DNA ....................................................................... 100 Mykobakterier atypiske PCR (kan udføres på mikroskopipositive og ekspektorater) ............................................ 102 Mæslinger, (se Morbillivirus DNA). ........................................................................................................................ 102 Neisseria gonorrhoeae antistof, (se Gonokok antistof (GAT)). .............................................................................. 102 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 5 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Neisseria gonorrhoeae (gonokokker)(dyrkning) .................................................................................................... 102 Neisseria meningitidis antistof (MAT), (se Meningokok antistoffer). .................................................................... 103 Non-gonorrhoisk, non-chlamydia urethrit/cervicit ................................................................................................ 103 Non-gonoroisk, non-chlamydia uretrit PCR ............................................................................................................ 104 Non-gonoroisk, non-klamydiel urethrit/cervicit udredning DNA/RNA ................................................................... 105 Norovirus, (se Gastroenteritis, diagnostik) ............................................................................................................ 105 Orm, æg og cyster, (se Gastroenteritis, diagnostik) ............................................................................................... 105 Orm (identifikation)................................................................................................................................................ 105 Parainfluenza virus antistof ................................................................................................................................... 106 Parechovirus, (se Enterovirus IgM). ....................................................................................................................... 106 Parotitisvirus IgG antisstof (immunstatus), (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) ................................ 106 Parotitisvirus IgM og IgG antistof, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) .............................................. 106 Parotitisvirus DNA/RNA ......................................................................................................................................... 106 Parvovirus B-19 IgM og IgG antistof ...................................................................................................................... 106 Parvovirus DNA/RNA, (se Rigshospitalets prøvevejledning) .................................................................................. 109 Plasmodium (mikroskopi) (malaria), (se Malaria). ................................................................................................ 109 Plasmodium arter (malaria) antistof IgM, IgG ....................................................................................................... 109 Pneumocystis jiroveci (tidl. carinii) DNA ................................................................................................................. 109 Pneumokok antistof (23 valent) ............................................................................................................................. 110 Pneumonok antistof (7/13 valent) ......................................................................................................................... 110 Pneumoniudredning (atypisk pneumoni) ............................................................................................................... 110 Podning fra cervix .................................................................................................................................................. 111 Poliovirus neutraliserende antistof ........................................................................................................................ 113 Polyomavirus Ki, Wu .............................................................................................................................................. 113 Posaconazol serumkoncentration .......................................................................................................................... 113 Poxvirus DNA/RNA ................................................................................................................................................. 113 PUT, (se Streptococcus pneumoniae (pneumokok) antigen i urin (PUT)). .............................................................. 113 Q-feber, (se Coxiella burnetii antistof) ................................................................................................................... 114 Rabiesvirus antistof ................................................................................................................................................ 114 Rickettsia arter DNA ............................................................................................................................................... 114 Rift Valley virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof ..................................................................................................... 114 RSV, (se Luftvejspanel). .......................................................................................................................................... 114 Rotavirus, (se Gastroenteritis, diagnostik) ............................................................................................................. 114 Rubellavirus IgM og IgG antistof ............................................................................................................................ 114 Rubellavirus RNA/DNA ........................................................................................................................................... 116 Salmonella antistof(enteritidis og typhimurium) ................................................................................................... 116 Sandfly Toscana virus PCR og antistof IgM, IgG ..................................................................................................... 116 Schistosoma (bilharziose) antistof, (se Rigshospitalets prøvevejledning) .............................................................. 116 Schistosomiasis (Bilharziose), mikroskopi .............................................................................................................. 118 Sektionsmateriale .................................................................................................................................................. 118 Serumkoncentration af antituberkuløse midler ..................................................................................................... 119 Serumkoncentration af svampemidler, (se Flucytosin serum koncentration, Posaconazol serumkoncentration, Voriconazol serumkoncentration eller Itraconazol serum koncentration). ............................................................ 120 Staphylococcus areus (MRSA) (dyrkning), (se MRSA (meticillin-resistente S. aureus)). ......................................... 120 Spinalvæske og hjerneventrikelvæske .................................................................................................................... 120 Streptococcus pneumoniae antistof (23 valent), (se Pneumokok antistof (23 valent)). ........................................ 122 Streptococcus pneumoniae antistof (7/13 valent), (se Pneumonok antistof (7/13 valent)). ................................. 122 Streptococcus pneumoniae (pneumokok) antigen i urin (PUT) .............................................................................. 122 Strongyloides antistof ............................................................................................................................................ 123 Strongyloides dyrkning, (se Rigshospitalets prøvevejledning) ............................................................................... 123 Syfilisantistoffer i spinalvæske, (se CSV-syfilisantistoffer)...................................................................................... 123 Syfilisantistoffer intrathekal syntese ...................................................................................................................... 123 Svælgpodning for ß-hæmolytiske streptokokker ................................................................................................... 125 Svælgpodning, andet ............................................................................................................................................. 126 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 6 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Taenia solium antistof (cysticercosis) ..................................................................................................................... 127 Tarmpatogene bakterier, inklusive Clostridium difficile, (se Gastroenteritis, diagnostik) ..................................... 127 TBE antistof, (se Tick born encephalitis (TBE) IgG og IgM). ................................................................................... 127 TBE DNA/RNA, (se Tick born encephalitis (TBE) DNA/RNA). .................................................................................. 127 Tetanustoksin antistof............................................................................................................................................ 127 Tick born encephalitis (TBE) IgG og IgM ................................................................................................................ 127 Tick born encephalitis (TBE) DNA/RNA .................................................................................................................. 128 Toscana virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof. ....................................................................................................... 128 Toxocara antistof ................................................................................................................................................... 128 Toxoplasma gondii IgG og IgM antistof ................................................................................................................. 128 Toxoplasma gondii (nyfødte) ................................................................................................................................. 129 Toxoplasma gondii DNA/RNA ................................................................................................................................ 130 Treponema pallidum antistoffer, intrathekaltest, (se Syfilisantistoffer intrathekal syntese). ............................... 130 Treponema pallidum antistoffer i spinalvæske, (se CSV-syfilisantistoffer). ........................................................... 130 Treponema pallidum antistoffer (syfilis screening) ................................................................................................ 130 Treponema pallidum DNA/RNA ............................................................................................................................. 131 Trichinella spiralis antistof ..................................................................................................................................... 131 Trofozoitter af Giardia intestinalis i duodenalsekret .............................................................................................. 132 Tropheryma whipplei DNA/RNA ............................................................................................................................ 133 Trypanosoma antistof ............................................................................................................................................ 133 Ureaplasma ureayticum, (se Non-gonoroisk, non-klamydiel urethrit/cervicit udredning DNA/RNA). ................... 133 Urin ........................................................................................................................................................................ 133 Urogenitiale mycoplasmer, (se Non-gonoroisk, non-klamydiel urethrit-/cervicit udredning DNA/RNA). .............. 136 Vaginalpodning for gær ......................................................................................................................................... 136 Varicella zoster virus (VZV) antistoffer ................................................................................................................... 137 Varicella zoster virus (VZV) DNA ............................................................................................................................ 138 Venezuelansk equine encephalitis virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof ............................................................... 139 VZV, (se Varicella zoster virus (VZV) DNA) ............................................................................................................. 139 VZV antistof, (se Varicella zoster virus (VZV) antistoffer). ..................................................................................... 139 Voriconazol serumkoncentration ........................................................................................................................... 139 Væsker, led-, pleura-, perikardie-, p-dialysevæske, ascites m.m............................................................................ 140 Væv, knogle og vævs-biopsier ................................................................................................................................ 141 Weil Felix Proteus antistof ved rickettsiose ............................................................................................................ 143 West Nile virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof ..................................................................................................... 143 Yellow fever, (se Gul feber virus PCR og antistof IgM, IgG). ................................................................................... 143 Yersinia enterocolitica 0:3 antistof, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) ............................................ 143 Yersinia pestis DNA ................................................................................................................................................ 143 Zoonotisk fugle- og svineinfluenza ......................................................................................................................... 143 Øjenpodning ........................................................................................................................................................... 144 Ørepodning ............................................................................................................................................................ 145 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 7 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Indledning Geografi: Region Hovedstaden Klinisk Mikrobiologisk Afdeling (KMA) Herlev Hospital, Opgang 59 etage 05 Herlev Ringvej 75, 2730 Herlev Telefon: 38 68 38 68. Gennemvalgsnummer til fastnettelefoner 386 + lokalnummer. Sekretariat .................................................... lokal 8 38 50 Vagthavende læge ........................................ lokal 8 24 52 Afdelingsledelsen: Ledende overlæge, dr. med. Jens Otto Jarløv .... lokal 8 38 56 Ledende bioanalytiker Susanne Pedersen ......... lokal 8 38 54 Afdelingsledelsessekretær Elsebeth T. Gylling .... lokal 8 38 55 Øvrige speciallæger: Overlæge, ph.d. Bente Olesen ......................... lokal Overlæge, ph.d. Dennis Schrøder Hansen ......... lokal Overlæge, dr. med. Jette Bangsborg ............... lokal Overlæge Lene Nielsen ................................... lokal Overlæge Magnus Arpi ................................... lokal Afdelingslæge Inger Brock .............................. lokal Afdelingslæge, ph.d. Michael Pedersen ............. lokal Afdelingslæge Barbara Juliane Holzknecht ......... lokal 8 8 8 8 8 8 8 8 52 52 38 38 38 47 52 52 82 83 74 75 83 15 56 86 Bioanalytikerundervisere/afdelingsbioanalytikere: Casper Dam-Nielsen ....................................... lokal 8 52 Hanne Wiese Hallberg .................................... lokal 8 38 Irene Møller Jensen ....................................... lokal 8 37 Anne Kailow .................................................. lokal 8 94 Lilyan Almousawi ........................................... lokal 8 52 Tina Proft Larsen .......................................... lokal 8 22 55 85 01 46 54 82 Hygiejnesygeplejersker: Sanne Dragsted ............................................. lokal Dorte Buhl .................................................... lokal Dorthe Mogensen ........................................... lokal Marianne Midttun ........................................... lokal 57 38 15 59 8 8 8 8 38 43 22 38 Ledende lægesekretær Elsebeth Gylling .............................................. lokal 8 38 55 Telefax: 38 68 37 72 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 8 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Åbningstid: KMA har åbent alle ugens dage inkl. søn- og helligdage mellem kl. 08.00 - kl. 22.00. Sekretariatets telefon er åben mandag til lørdag mellem kl. 9-15 på tlf. 38 68 38 50. Vagtordning: Opkald til vagthavende mikrobiolog udenfor sekretariatets åbningstider sker via omstillingen på Herlev Hospital på tlf. 38 68 38 68 indtil kl. 22.00. I tidsrummet kl. 22.00 - 08.00 kan vagthavende mikrobiolog på Rigshospitalet kontaktes via omstillingen på tlf. 35 45 35 45. Rekvirering af akutte mikrobiologiske prøver i tidsrummet fra klokken 22.0008.00: Akutte mikrobiologiske prøver, der skal bestilles i tidsrummet fra klokken 22.00-08.00, skal bestilles på nødblanket og udelukkende efter telefonisk aftale med vagthavende mikrobiolog på Klinisk mikrobiologisk afdeling, på Rigshospitalet. Den vagthavende mikrobiolog træffes via omstillingen på tlf. 35 45 35 45. Husk at notere kontaktperson i egen afdeling samt telefonnummer på nødblanketten så Klinisk Mikrobiologisk afdeling kan ringe et svar tilbage. Noter også prøveforsendelsen på ordinationsark som dokumentation. Husk ligeledes at markere prøven med tydelig patientidentifikation. Prøverne sendes med taxa på rekvirentens regning og afleveres i Rigshospitalets information, Blegdamsvej 9, 2100 København Ø, såfremt andet ikke er aftalt med den vagthavende mikrobiolog. Prøver kan ikke sendes uden personlig kontakt og ved forventning om prøvefremsendelse kontaktes den vagthavende mikrobiolog generelt først, når prøveudtagelse er udført. Prøver, som analyseres på Rigshospitalet kan ikke ses via WWBakt, idet Rigshospitalet har et andet mikrobiologi system. Efter endt prøvebehandling vil det endelige svar findes i den landsdækkende database MiBa, som tilgås via WWBakt i OPUS arbejdsplads. Telefonisk rådgivning: KMA’s læger står til rådighed for såvel sygehusvæsen som primær sundhedstjeneste med rådgivning om diagnostik, behandling og profylakse af infektionssygdomme. Hygiejnesygeplejersker og læger yder endvidere infektionshygiejnisk rådgivning. Patienttilsyn: KMA’s læger udfører akutte tilsyn på Gentofte, Herlev samt Nordsjællands hospitaler. Tilsyn aftales telefonisk med vagthavende mikrobiolog. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 9 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Hvis ønske om tilsyn meddeles KMA inden kl. 12.00, vil dette så vidt muligt blive udført samme dag. Problemstillingen bør fremgå af journalen. Konferencer: Mange kliniske afdelinger har ugentlige konferencer med KMA’s læger. Behov for konferencer på andre afdelinger kan aftales med KMA’s afdelingsledelse. Ved specielle patientproblemer bør KMA orienteres om morgenen inden konferencen, således at relevant materiale kan findes frem. Videnskabelige undersøgelser: KMA samarbejder gerne med sine brugere om videnskabelige projekter inden for infektionshygiejne samt diagnostik og behandling af infektionssygdomme. KMA vil gerne orienteres om projekter, der har et mikrobiologisk aspekt, også selv om et umiddelbart samarbejde ikke skønnes nødvendigt. Ved brug af mikrobiologiske svar i artikler og kasuistikker vil KMA gerne orienteres før publikation. Principper for mikrobiologisk undersøgelse Generelt: Resultatet af en mikrobiologisk undersøgelse er helt afhængig af kvaliteten af det modtagne prøvemateriale og af de ledsagende kliniske oplysninger. Er prøvematerialet ikke repræsentativt, er det til blandet normalflora, eller mangler relevante oplysninger om den kliniske problemstilling, bliver den mikrobiologiske besvarelse mangelfuld eller helt misvisende. I visse tilfælde vil prøven blive afvist, hvis der ikke er relevant indikation eller de kliniske oplysninger mangler. Ofte er en fuldstændig kortlægning af alle tilstedeværende bakterier og svampe ikke praktisk mulig. Dyrkning og identifikation af disse kan være forbundet med ugers eller måneders arbejde. Prøverne behandles derfor efter standardiserede procedurer, som erfaringsmæssigt giver de klinisk mest relevante oplysninger. Visse prøvekategorier dyrkes ikke rutinemæssigt anaerobt, idet dyrkningsresultaterne sjældent giver klinisk relevante oplysninger. Dette gælder dyrkning fra fx svælg, ekspektorat, urin, fæces og vagina. Undertiden vil det være indiceret at afvige fra de standardiserede procedurer. Dette forudsætter imidlertid, at KMA informeres via sufficiente oplysninger på rekvisitionen, evt. suppleret med telefonisk kontakt, inden prøven afsendes. Ved dyrkning fra områder, som normalt forventes at være sterile P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 10 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 (blod, spinalvæske, visse punkturvæsker og biopsimateriale), vil alle potentielt patogene bakterier og svampe blive identificeret og resistensbestemt. En undtagelse er dog dyrkninger fra intraabdominale abscesser, perforeret tarm eller appendix indeholdende talrige bakteriearter, som i så fald vil blive svaret ud summarisk. I tilfælde af særlig "kostbart" prøvemateriale vil det være en god idé at kontakte KMA inden afsendelsen. Undersøgelse for specielle bakterier og svampe: Ved mistanke om specifik ætiologi til en infektion bør dette oplyses, idet bakterier og svampe som fx Actinomyces, Nocardia, difteribakterier og Brucella kræver specielle dyrkningsforhold for at kunne påvises. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 11 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Bestilling af mikrobiologisk undersøgelse Mikrobiologiske prøver skal følges af en elektronisk rekvisition. For hospitaler bestilles undersøgelsen i Opus og for praksissektoren i Webreq. I rekvisitionsbilledet ses tre kolonner, Undersøgelse, Materiale og Lokalisation. Rækkefølgen af disse kolonner bestemmes med sorteringsknappen nederst til venstre under førstesøjle. Generelt bestilles PCR og serologiske undersøgelser efter agensnavn/ undersøgelse, derefter eventuelt Materiale (fx Enterovirus RNA/DNA – fæces; Hepatitits A virus antistof (immunstatus) - Serum eller koagelblod). Bakteriologiske prøver, dyrkningsprøver, bestilles generelt altid som Dyrkning og resistens og herefter altid Materiale og eventuelt lokalisation (fx Dyrkning og resistens – Sårpodning – Lokalisation angivet i fri tekst; Dyrkning og resistens – Urin). Enkelte specielle bakteriologiske undersøgelser bestilles efter agens-navn/ undersøgelse, det gælder fx Helicobacter pylori (dyrkning), Dyrkning (gærsvampe) – Slimhinde-poding – Vagina. Mykobacterium dyrkning og DNA/RNA (TB) – materiale. Det selvklæbende nummer på prøvetagningsblanketten anvendes som eneste mærkning af prøven. Prøvetagningsblanketten skal ikke medsendes. Utensilier: Praksissektor Frigjorte kuverter, rekvisitioner (grønne) og utensilier bestilles ved at tilbagesende den bestillingsseddel, der vedlægges hver leverance af utensilier. Hospitalssektor Utensilier bestilles i Refleks og leveres fra: Regionallageret Fabriksparken 22 2600 Glostrup Prøvetagningssæt: Utensilier Anvendelse P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Utensilier Anvendelse Bloddyrkningskolbe Aerobe, Grå/Blå hætte Bloddyrkningskolbe Gælder kun Herlev og Gentofte Hospitaler Reflex kortbeskrivelse: BACTEC PLUS AER/F Reflex nr. 442192 1 enhed = 50 stk. Bloddyrkningskolbe Anaerob, Orange/guld hætte Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 12 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Opbevaring ved stuetemperatur beskyttet mod lys Reflex kortbeskrivelse: BACTEC PLUS ANAER/F Reflex nr. 442193 1 enhed = 50 stk. Bloddyrkningskolbe Svampe (mycosis), Grøn/Grå hætte Reflex kortbeskrivelse: BACTEC MYCOSIS IC/F Reflex nr. 442206 1 enhed = 50 stk. Bloddyrkningskolbe Børnekolbe, Lyserød/sølv hætte Reflex kortbeskrivelse: BACTEC PEDS/PLUS Reflex nr. 442194 1 enhed = 50 stk. Bloddyrkningskolbe Aerob kolbe/blå hætte Reflex kortbeskrivelse: BACT/ALERT SA Reflex nr. 259789 1 enhed = 25 eller 100 stk Bloddyrkningskolbe Aerob kolbe/grøn hætte Bloddyrkningskolber Gælder kun Nordsjællands Hospital Psykiatrisk center Nordsjælland Opbevaring ved stuetemperatur beskyttet mod lys Reflex kortbeskrivelse: BACT/ALERT FA PLUS Reflex nr. 410851 1 enhed = 25 eller 100 stk. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Utensilier Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 13 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Anvendelse Bloddyrkningskolbe Anaerob kolbe/mørkerød hætte Reflex kortbeskrivelse: BACT/ALERT SN Reflex nr. 259790 1 enhed = 25 eller 100 stk. Bloddyrkningskolbe Anaerob kolbe/orange hætte Reflex kortbeskrivelse: BACT/ALERT FN PLUS Reflex nr. 410852 1 enhed = 25 eller 100 stk. Bloddyrkningskolbe Børnekolbe/gul hætte Reflex kortbeskrivelse: BACT/ALERT PF Reflex nr. 259794 1 enhed = 100 stk. Bloddyrkningskolbe Børnekolbe/gul hætte Reflex kortbeskrivelse: BACT/ALERT PF PLUS Reflex nr. 410853 1 enhed = 100 stk. Chlamydia trachomatis/ Neisseria gonorrhoeae Molekylærbiologisk teknik Prøvetagningssæt, kvinder (Cervix, urethra), mænd (urethra) og øjne Reflex kortbeskrivelse APTIMA Unisex speciment collection Reflex nr. 301041 1 pakke m/ 1 transportrør og 2 podepinde 1 enhed = 50 eller 7200 sæt P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Utensilier Anvendelse Urintransportrør Urin (Kun mænd) Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 14 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Reflex kort beskrivelse: APTIMA Urine Speciment collection kit Reflex nr. 301040 1 enhed = 50 eller 1000 sæt EDTA-glas, 3ml (Lilla låg med sort ring) Supplerende blodprøve til malaria Reflex kortbeskrivelse: Vacutainer K3 EDTA, GLAS, 3 ml 13x75 mm Reflex nr. 454021 1 enhed = 100 stk. Blodprøverør med gel (Rødt låg med gul ring) Blodprøve glas Reflex kortbeskrivelse: Blodprøverør Serum med gel 5/4 ml, snaplåg 13x75 mm Reflex nr. 454067 1 enhed = 50 eller 1.200 stk Ekspektoratdåse m/ plasticcontainer Ekspektorat Reflex nr. 40078 1 enhed = 5 stk. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Utensilier Anvendelse eSwab transportmedium m/ tynd podepind blåt skruelåg Kighoste Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 15 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Reflex kortbeskrivelse: ESWAB + flocked swab (pernasal) 482 ce Reflex nr. 72796 1 enhed = 10 stk. eSwab transportmedium m/ tyk podepind pink skruelåg Dyrkning og resistens samt virus PCR analyser Reflex kortbeskrivelse: ESWAB + flocked swab (reg.) 480ce Reflex nr. 72795 1 enhed = 10 stk. Forsendelsesetui til 2 objektglas Børneorm analaftryk Malariaudstryg Reflex nr. 86.972 1 enhed = 50 stk Forsendelseshylster, sæt Svampeprøve Kun praksissektor 1 sæt= Dermapak papkuvert i plastpose og Eppendorf centrifugerør, mikrorør 1,5 mL Superspin klar Rekvireres på Klinisk Mikrobiologisk Afdeling tlf. 3868 3868 Forsendelsesrør til sprøjter Rør 50ml V-bund m/skruelåg Reflex nr. 227261 1 enhed = 20 stk. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Utensilier Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 16 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Anvendelse Fæcesrør komplet inkl. transportrør Reflex nr. 40080 1 enhed = 25 stk. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Utensilier Anvendelse Objektglas uslebne med mat skrivefelt Malariapræparat m.m. Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 17 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Reflex nr. 1510.0020 1 enhed = 1 æske á 50 stk Objektglas, facetslebne med 2 afskårne hjørner Udstrygning af malariapræparat Reflex nr. 1510.1050 1 enhed = 1 æske á 50 stk. Plastflaske, 250mL Skruelåg til 250 mL flaske Bronkoalveolær lavage (BAL) Reflex nr. 0655.0250 Og 0655.6002 1 enhed = 1 stk. Plastflaske, 1 L Skruelåg til 1 L flaske Urin til undersøgelse for æg af Schistosoma Reflex nr. 0655.1000 Og 0655.6005 1 enhed = 10 stk. Spidsglas m/skruelåg, sterile Centrifuge Tube w/Cap 11 ml Conical St Flydende prøvematerialer fx urin, spinalvæske, sekret og andre væsker Reflex nr. 10707431 1 kasse = 480 stk. Gælder Herlev og Gentofte Hospitaler Spidsglas m/skruelåg, sterile Centrifugerør spids bund *S Reflex nr. EK-1030-450 1 kasse = 75 eller 450 stk. Gælder Nordsjællands Hospitaler, Psykiatrisk center – Nordsjælland P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Utensilier Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 18 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Anvendelse Sprøjte 3 mL Luer Lock Sprøjte u. kanyle, 3 komp. LL 2-3ml Reflex nr. 309658 1 enhed = 5 stk. Sugekateter Ideal, lige CH 06/35 cm. Nasofaryngealsug for respirationsvejsvirus (børn) Reflex nr. 12038181 1 enhed = 100 stk. Sugekateter Ideal, lige CH 08/33 cm. Reflex nr. 5072181 1 enhed = 100 stk. Termobeholder Udlånes af KMA efter telefonisk aftale, tlf. 3868 3868 Trakeal sugesæt med vaccumkontrol Transport duodenalsekret til undersøgelse for trofozoitter Reflex nr. 24004181 1 enhed = 1 stk. eller 50 stk. Vatpind, steril, hvid Reflex nr. 4622150 1 enhed = 50 pakker á 2 stk. Urinprøvesæt, steril Prøvetagning af urin til dyrkning Reflex nr. EK-1010-RGH 1 enhed = 1 stk. eller 60 stk. Urin-movetter (borsyreglas) Forsendelse af urin til dyrkning KUN praksissektor Rekvireres på Klinisk Mikrobiologisk Afdeling tlf. 3868 3868 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 19 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Efter prøvetagning Opbevaring: Prøverne opbevares som angivet under de enkelte prøvekategorier. Indlevering: Prøver til undersøgelse afleveres i de mikrobiologiske prøvemodtagelser, hvor der er opbevaringsskab (stuetemperatur) og køleskab (48 C) med adgang fra gangen til højre for elevatoren. Prøver fra hospitaler skal fremsendes i gule poser eller i de dertil indrettede grå kasser. Når prøverne ankommer til KMA sættes de på hylder i køleskabet. Bloddyrkningskolber sættes i opbevaringsskabet (stuetemperatur), hvor eventuelle rekvisitionerne også placeres. Akutte prøver: Akutte prøver kræver forudgående aftale med vagthavende mikrobiolog. Rekvirerende læge konfererer med vagthavende mikrobiolog om prøvebehandling, transportmåde, afleveringssted og tidspunkt. NB! Når akutte prøver fremsendes med taxa, anbringes prøve og Rekvisition, i en lukket kuvert. Mikrobiologiske prøvemodtagelser: Herlev Hospital: Kl. 08.00-22.00: KMA, opgang 59, etage 05 (gul trappe). Gentofte Hospital: Klinisk biokemisk afdeling, (Centrallaboratorium) opgang 20. Nordsjællands Hospital Hillerød, Klinisk biokemisk afdeling Dyrehavevej 29, 3400 Hillerød Nordsjællands Hospital Frederikssund, Klinisk biokemisk afdeling Frederikssundsvej 30, 3600 Frederikssund Sundhedshuset i Helsingør Murergade 5, 3000 Helsingør Center for Handicappede, Vangedehuse/Lille Mosegaard: Prøverne indleveres i Prøvemodtagelsen, Gentofte Hospital. Steno Diabetes Center samt diverse plejehjem: Prøverne indleveres i Prøvemodtagelsen på KMA, Herlev Hospital. Prøver fra praksis Planlægningsområde midt: P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 20 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøver sendes med posten i frigjorte kuverter. De kan også indleveres direkte i den mikrobiologiske prøvemodtagelse på Herlev Hospital. Efter aftale, kan patienten aflevere urin og fæcesprøver direkte i KMAs prøvemodtagelse. Prøver fra praksis Planlægningsområde nord: Prøver bliver afhentet hos de praktiserende læger og transporteres med intern hospitalstransport. Transport: Prøver transporteres fra hospitalerne i kasser ved henholdsvis 4 C og stuetemperatur som anført under de enkelte prøvekategorier. Duodenalsekret til undersøgelse for trofozoitter sendes i særlig termobeholder, der udlånes af KMA. Svartyper: Telefonisk svar: Svar afgives telefonisk ved positivt fund i bloddyrkning, spinalvæske, effusionsvæsker og malariaudstrygninger samt prøver mærket ”akut” eller “telefonsvar” fra rekvirerende afdeling. Såfremt der ønskes telefonsvar ved andre prøver må dette anføres tydeligt på rekvisitionssedlen i den dertil beregnede rubrik: ”Hastesvar”. Foreløbigt svar: For mange prøvekategoriers vedkommende afgives efter ca. et døgn foreløbigt svar elektronisk via WWBakt. Endeligt svar: Fremkommer, når identifikation og følsomhedsbestemmelse er afsluttet, sædvanligvis efter 3-5 dage, se under den enkelte prøvekategori. Svarene indklæbes i journalen taglagt på de røde støttekort til mikrobiologiske svar. Supplerende svar: I visse tilfælde vil det være nødvendigt at bruge længere tid til identifikation eller til supplerende typebestemmelser af de fundne bakterier. Endvidere kan udvidet resistensbestemmelse komme på tale. I disse tilfælde vil der blive sendt et supplerende svar til erstatning for det tidligere udsendte slutsvar. Afsendelse af svar: Svar sendes dagligt og udbringes til afdelingerne elektronisk. Svar til praksissektoren sendes dagligt elektronisk eller med postvæsenet. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 21 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Tolkning af svar: Den mikrobiologiske undersøgelse omfatter almindeligvis: Mikroskopi Bedømmelse af mængden af de dyrkede organismer Identifikation af disse, hvor det er klinisk relevant Følsomhed for antibiotika (resistensmønster) Mikroskopi kan give oplysning om prøvematerialets egnethed. Visse bakterier og svampe kan med stor sikkerhed identificeres alene på udseendet ved direkte mikroskopi evt. suppleret med en hurtigtest, således at afdelingen kan få et foreløbigt telefonisk svar. Da det ikke er muligt at foretage direkte mikroskopi af materialet fra en podepind, vil det altid være bedre at fremsende selve prøvematerialet som anført under de enkelte prøvekategorier. Mængden kan betegnes med et antal bakterier pr. ml, således som det rutinemæssigt sker ved kvantitativ dyrkning af urin og i visse tilfælde ved duodenal- eller tarmsekret. I de fleste tilfælde anvendes en grov kvantitativ bedømmelse af bakteriemængden efter følgende retningslinjer: Talrige: En del: Få: svarer til >105 bakterier pr. ml svarer til 103-105 bakterier pr. ml svarer til <103 bakterier pr. ml De anførte kvantitative forhold kan kun tillægges betydning, såfremt der ikke er sket en opformering af bakterierne efter prøvetagningen. Dette forudsætter korrekt opbevaring og transport. Ved dyrkning fra i.v.kateterspids vil der blive angivet et absolut antal kolonier på basis af en semikvantitativ teknik. Positive blod- og fæcesdyrkninger kvantiteres ikke. Identifikation og resistensbestemmelse Potentielt patogene bakterier og renkulturer identificeres til speciesniveau og der laves relevant resistensbestemmelse. Ved fund, der skønnes at være forurening eller ikke-klinisk relevante, foretages kun identifikation til genus niveau, og besvarelsen sker uden resistensbestemmelse. Angivelse af følsomhed for en funden bakterie er ikke nødvendigvis ensbetydende med, at antibiotikabehandling tilrådes, eller er effektiv. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 22 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Følsomshedsbestemmelse in vitro: S I R (Sensitiv) betyder, at behandling er mulig med normal dosering. (Intermediær) betyder, at behandling er mulig, hvis dosis kan øges udover normal dosering (relevant for penicilliner og cefalosporiner) eller hvis fysiologisk koncentrering kan forventes i fokus (fx urinvejene). (Resistent) betyder, at behandling ikke er mulig. Supplerende undersøgelser: Prøvematerialet opbevares i 7 døgn, bortset fra positive bloddyrkninger og prøver fra normalt sterile områder som opbevares i 14 dage. Det vil således være muligt ved henvendelse til KMA at få foretaget supplerende identifikation og følsomhedsbestemmelse. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 23 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Undersøgelseskategorier Abscesmateriale, aspireret pus Princip: Mikroskopi, dyrkning, identifikation og følsomhedsbestemmelse af bakterier og svampe. Indikation: Dybe abscesser på hals, i organer, peritoneum og pelvis (fossa Douglasi). Denne information bedes noteret i de kliniske oplysninger, også hvis det drejer sig om ultravejledt punktur. Prøvemateriale: Abscesmateriale udhentet ved aspiration eller ultralydsvejledt punktur. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: dyrkning og resistens Materiale: Absces – aspirat. Lokalisation: angives i fri tekst Tidspunkt for prøvetagning: Før antibiotisk behandling startes. Utensilier: Sterilt spidsglas med skruelåg. Prøvetagning: Prøven udtages ved perkutan punktur efter desinfektion. Desinfektion udføres med 2 x jodsprit 2,5 % SAD liniment, eller hos patienter med jodallergi 2 x klorhexidinsprit 0,5 % i alkohol 70 %. Desinfektionsmidlerne skal tørre mellem påføringerne og inden punkturen. Efter desinfektion af indstiksstedet må dette ikke berøres, med mindre man har sterile handsker på. For at undgå jodforbrænding, aftørres jodet med sprit efter prøvetagningen. Prøvemængde: Se under prøvetagning, spidsglasset må kun fyldes halvt. Opbevaring: Prøvemateriale i spidsglas opbevares i køleskab (4-8° C). Forsendelse: Spidsglas sendes i kølekasse. Svarafgivelse: Såfremt der ved mikroskopi påvises bakterier og svampe, vil dette fremgå af det foreløbige elektroniske svar eller eventuelt blive meddelt telefonisk til en autoriseret patientansvarlig medarbejder. Foreløbigt dyrkningssvar afgives 1 døgn efter modtagelse af prøven. Slutsvar afgives efter 2-5 døgn. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 24 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Bemærkninger: Drænprøver giver sjældent brugbare oplysninger og bør undgås, hvis der kan skaffes materiale fra den inficerede kavitet. Adenovirus antistof, (se Luftvejspanel). Adenovirus fæces, (se diarreudredning). Adenovirus øje Princip: Påvisning af adenovirus DNA med PCR teknik. Indikation: Mistanke om akut infektion med adenovirus ved conjunktivitis/keratitis. Prøvemateriale: Pus eller podning fra conjuktiva Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: adenovirus DNA Materiale: slimhindepodning Lokalisation: øje Tidspunkt for prøvetagning: Så tidligt som muligt i sygdomsforløbet. Utensilier: eSwab podepind i tilhørende transportmedie. Pus eller væske i sterilt spidglas. Prøvetagning: Det nedre øjenlåg trækkes ned, og der podes fra konjuntivalslimhinden. Prøvemængde: Hvad der er muligt. Opbevaring: Prøvemateriale opbevares i køleskab (4-8° C). Forsendelse: Sendes i kølekasse. Svarafgivelse: En til to hverdage efter modtagelsen. Positivt svar angives som Adenovirus DNA påvist Antituberkuløse midler, (se Serumkoncentration af antituberkuløse midler). P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 25 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Arena (Lassa, Junin) virus PCR og antistof IgM, IgG Der skelnes mellem mistanke om akut infektion og serologi til afklaring af overstået infektion Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: Arena virus. Materiale: akut infektion: blod tilsat SSIs blå inaktiverinsmedie, kontakt vagthavende SSI tlf 3268 3460 eller 4033 6379. Serologi: serum koagel blod eller blod i EDTA glas Aspergillus galactomanan antigen, (se Rigshospitalets prøvevejledning) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: Aspergilus galactomanan antigen, Materiale: BAL, miniBAL, Serum eller Koagelblod eller Spinalvæske. Aspergillus antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: aspergillus antistof Materiale: serum eller koagelblod Pus, sårsekret, sekret podning Princip: Indikation: Dyrkning, identifikation og følsomhedsbestemmelse af potentielt patogene bakterier og svampe. Akut inflammerende traumatiske sår. Cellulit, fasciit. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 26 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Inflammeret bidsår (hund, kat, hest, menneske) og brandsår. Postoperativ sårinfektion. Kroniske sår (diabetiske, decubitus, ulcus cruris) med inflammation af subkutant væv, fascie, muskel eller knogle. Prøvemateriale: Tidspunkt for prøvetagning: Pus, sårsekret eller vævsvæske. ESwab anvendes kun, hvor det ikke er muligt at fremsende aspireret materiale eller biopsier. Før antibiotisk behandling startes. Utensilier: Spidsglas med skruelåg, sterilt. Sprøjte Luer Lock til aspiration af inficeret materiale. Forsendelsesrør til sprøjte. ESwab. Prøvetagning: Ved større pusmængder aspireres materialet i sprøjte og overføres til sterilt spidsglas. Ved mindre mængder kan materialet forblive i den sprøjte, der anvendtes til aspiration. Sprøjten lukkes med steril lukkeprop og fremsendes i forsendelsesrør. Ved bløddelsinfektion uden pussekretion (cellulit og lign.) kan prøvemateriale opnås på følgende måde: Der udføres huddesinfektion med 2 x jodsprit 2,5 % SAD liniment, eller hos patienter med jodallergi 2 x klorhexidinsprit 0,5 % i alkohol 70 %. Desinfektionsmidlerne skal tørre mellem påføringerne og inden punkturen. Efter desinfektion af indstiksstedet må dette ikke berøres, med mindre man har sterile handsker på. For at undgå jodforbrænding, aftørres jodet med sprit efter prøvetagningen. En sprøjte med kanyle indføres i det inficerede område og 1 ml sterilt saltvand injiceres, hvorefter der aspireres så meget som muligt. Den aspirerede væske sendes i sprøjten som beskrevet ovenfor. Prøvemængde: Så meget materiale som muligt, glasset må dog kun fyldes halvt. Opbevaring: I køleskab (4-8o C). Forsendelse: Så vidt muligt i kølekasse. Podninger i eSwab kan sendes med postvæsenet efter emballering i forsendelsesrør. Svarafgivelse: Foreløbigt svar afgives 1 døgn efter modtagelse af prøven. Slutsvar afgives efter 2-5 døgn. Prøver i relation til dyrebid: Op til 7 døgn. Tolkning: Før antibiotisk behandling startes er det nødvendigt at sammenholde klinikken med de bakterier og svampe, som er dyrket fra den pågældende region. Ved dyrebid bør dyrearten angives præcist på rekvisitionssedlen, P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 27 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 idet bidsår fra forskellige dyr er associeret med specielle bakteriearter. Bemærkninger: Ved kroniske sår (decubitus, ulcus cruris) vil overfladepodninger sjældent give relevante mikrobiologiske oplysninger, hvorfor det foreslås at tage stansebiopsier fra sårranden efter rensning af såret. Biopsier fremsendes i spidsglas med et par dråber sterilt vand. AST (anti-streptolysin O) Princip: Indikation: Prøvemateriale: Påvisning af antistoffer mod streptolysin O fra Streptococcus pyogenes (hæmolytiske streptokokker gruppe A). Undersøgelsen kan ikke anvendes til diagnostik af akut streptokokinfektion. Anvendes kun ved klinisk mistanke om akut glomerulonefrit og febris rheumatica. Serum eller koagelblod. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital Undersøgelse: AST (anti-streptolysin O) Materiale: serum eller koagelblod Tidspunkt for prøvetagning: Så tidligt som muligt i sygdomsforløbet og mindst 1 gang senere, fx efter 2-4 uger. Prøven bør så vidt muligt ikke tages umiddelbart efter indtagelse af et fedtrigt måltid. Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). I særlige tilfælde, fx hos børn, kan undersøgelsen som regel gennemføres på ned til 0,5 ml blod eller 0,2 ml serum. Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster (se side:). P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 28 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Tolkning: Ved febris rheumatica og akut glomerulonefrit er AST oftest kraftigt forhøjet (titer >1000). Bemærkninger: AST hører ikke hjemme i undersøgelsesrepertoiret ved kronisk artrit eller degenerative ledsygdomme. AST bør således ikke rekvireres samtidig med undersøgelse for rheumafaktorer. AST er uden diagnostisk værdi ved streptokokbetingede svælginfektioner, inkl. scarlatina. Bartonella henselae (cat scratch disease) og Bartonella Quintana (trench fever) antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Under undersøgelse: vælg Bartonelle antistof. Bartonella henselae (cat scratch disease) og Bartonella Quintana (trench fever) PCR Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: Bartonelle DNA/RNA. Materiale: Biopsimateriale: Billharzia antistoffer, (se Schistosomiasis (Bilharziose), antistof). Billharzia Mikroskopi, (se Schistosoma (bilharziose) mikroskopi). P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 29 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Biopsi materiale, (se Væv, knogle og vævs-biopsier). Bloddyrkning Princip: Blod taget ved venepunktur eller fra kateter i bloddyrkningskolber med efterfølgende dyrkning, identifikation og resistensbestemmelse af isolerede bakterier og svampe. Indikation: Feber eller hypotermi. Cirkulatorisk kollaps med eller uden temperaturforhøjelse. Ældre patienter med sløret sensorium, takypnø, påvirket almentilstand med eller uden feber. Lokaliserede infektion, hvor bloddyrkning kan give en ætiologisk diagnose (f.eks. pneumoni, meningit, pyelonefrit, absces, akut osteomyelit, epiglottit og inficerede i.v.katetre). Prøvemateriale: Veneblod (eventuelt arterieblod), optimalt tages i alt 40 ml. Prøvebestilling i Opus/Webreg: Hillerød/ Frederikssund Herlev/ Gentofte Tidspunkt for prøvetagning: Undersøgelse: Dyrkning og resistens Materiale: (antal bloddyrkningskolber vælges nederst til højre): Blod fra arterie (bloddyrkningskolbe). Blod fra kateter (bloddyrkningskolbe) – lokalisation vælges. Blod fra navlesnor (bloddyrkningskolbe). Blod fra vene (bloddyrkningskolbe). Undersøgelse: Dyrkning og resistens Materiale: (antal bloddyrkningskolber vælges nederst til højre): Enten som pakke a 4 kolber (vene/arterie/kateter) eller som enkelt kolber som nedenfor. Blod fra arterie (bloddyrkningskolbe). Blod fra kateter (bloddyrkningskolbe) – lokalisation vælges. Blod fra navlesnor (bloddyrkningskolbe). Blod fra perifer vene (bloddyrkningskolbe). Så tidligt i infektionsforløbet som muligt og inden start af antibiotikabehandling. Hvis patienten alligevel får antibiotika, skal bloddyrkningen helst tages lige før antibiotikaindgift, hvor koncentrationen i blodet er lavest. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Utensilier: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 30 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Bloddyrkningskolber: BACTEC™ aerob, BACTEC™ anaerob og evt. BACTEC™ mycosis (svampe). Til mindre børn bruges BACTEC™ børnekolbe. BACTEC™ kan anvendes både til lukket blodtagningssystem og til prøvetagning med sprøjte. Opbevares ved stuetemperatur beskyttet mod lys. Udløbsdato er påtrykt kolberne. Brug aldrig et uklart substrat, da udfældninger kan skyldes kontaminering. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Prøvetagning: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 31 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Omhyggelig aseptisk teknik er helt afgørende. Der udføres huddesinfektion med 2 x klorhexidinsprit 0,5 % i alkohol 70 %. Desinfektionsmidlerne skal tørre mellem påføringerne og inden punkturen. Efter desinfektion af indstiksstedet må dette ikke berøres, med mindre man har sterile handsker på. 40-50 ml blod fordeles på 2 aerobe og 2 anaerobe, og evt. 1 mycosis (svampekolbe) bloddyrkningskolber. Desinficer bloddyrkningskolbernes membran med swabs eller hospitalssprit. Membranerne på kolberne skal desinficeres med 70 % sprit 2 gange, inden blodet injiceres. Hele blodportionen kan tages samtidig, bortset fra de tilfælde hvor der er mistanke om endokardit, og man ønsker at dokumentere en kontinuerlig bakteriæmi. I disse tilfælde tages flere tidsmæssigt uafhængige bloddyrkningssæt fra forskellige indstikssteder. Dyrkning af arterieblod giver ikke bedre resultater end veneblod. Dyrkning af knoglemarv kan overvejes i tilfælde, hvor brucellose eller tularæmi mistænkes, og bloddyrkning har været negativ. Hver kolbe fyldes med 8-10 ml blod, dette tager ved frit indløb ca. ½ minut. Det er vigtigt, at kolben ikke overfyldes. Hos nyfødte og små børn anvendes børnekolbe, som efter skøn trækkes tilbage efter indløb af 1-2 ml. Dette tager ved frit indløb 5-10 sekunder. Bloddyrkning taget gennem intravaskulært kateter må generelt frarådes. Såfremt der ikke er andre muligheder, gøres følgende: Kateteret tømmes for indhold ved hjælp af en 10 ml sprøjte, inden blodet udtages til dyrkning. Der skal udfyldes én rekvisition pr. kolbe. Husk at afkrydse den relevante rubrik for blodtagningen. Prøvemængde: 8-10 ml i hver bloddyrkningskolbe, 1-2 ml i børnekolbe. Rekvisition: Ved mistanke om infektion med langsomt voksende bakterier som fx Brucella, Bartonella, Fransicella, Actinomyces samt i visse tilfælde af endokardit, er længere inkubationstid nødvendig. Det er derfor vigtigt, at rekvisitionen udfyldes omhyggeligt med kliniske oplysninger, mulig eksposition og rejseanamnese. Opbevaring: Efter prøvetagning skal kolberne opbevares ved stuetemperatur på de respektive hospitalers mikrobiologiske prøvemodtagelser indtil afsendelsen til KMA. Forsendelse: Prøverne bringes til KMA alle ugens dage. Akut forsendelse tjener intet formål. Svarafgivelse: Bloddyrkningskolberne aflæses automatisk i 5 døgn. Ved positivt fund afgives hurtigst muligt telefonisk svar til en autoriseret patientansvarlig medarbejder. Foreløbigt negativt svar afgives et døgn efter modtagelse af prøven, og slutsvar afgives efter 5 døgn. Tolkning: Bloddyrkninger kan forurenes fra patientens hud, ved prøvetagningsproceduren samt under arbejdet i laboratoriet. Et positivt P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 32 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 dyrkningsresultat vil altid blive telefoneret til afdelingen af vagthavende mikrobiolog, således at der er mulighed for at diskutere relevansen af det pågældende fund og evt. behandling. Bemærkninger: Ved påvist bakteriæmi må infektionsfokus så vidt muligt identificeres med eventuel dyrkning fra dette. Temperaturforhøjelse alene er ikke nødvendigvis indikation for bloddyrkning. Bloddyrkning er dog indiceret hos nyindlagte patienter med temperatur >38,5° C og hos patienter med temperaturstigning i det postoperative forløb. BK polyomavirus DNA/RNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: BK polyomavirus DNA/RNA. Materiale: Blod(EDTA-glas) eller urin. Bordetella pertussis IgG antistof, (se kighoste). Bordetella pertussis/parapertussis DNA/RNA, (se kighoste). Borrelia burgdorferi antistoffer Princip: Påvisning af IgM og IgG antistoffer mod B. burgdorferi i blod og spinalvæske ved hjælp af kemiluminiscens assay (CLIA) teknik (i spinalvæske dog hhv. -capture og -capture ELISA). Indikation: Antistoffer i blod undersøges ved mistanke om B. burgdorferi infektion i 2. stadium (multipel erythema migrans, Borrelia lymfocytom, neuroborreliose, Borrelia myocarditis eller Borrelia artritis) eller 3. stadium (acrodermatitis chronica atrophicans, kronisk neuroborreliose, kronisk arthritis). Antistoffer i blod samt spinalvæske undersøges ved mistanke om neuroborreliose (intratekal test). Det frarådes at foretage serologisk diagnostik ved typisk erythema migrans i 1. stadium, da undersøgelsen kun er positiv i ca. halvdelen af tilfældene. Prøvemateriale: Blod uden tilsætning. Til intratekal antistofsyntese (neuroborreliose) indsendes både blod P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 33 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 og spinalvæske, udtaget på samme tidspunkt. Sendes samlet på samme rekvisition. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Borrelia antistof, Materiale: serum eller koagelblod. Eller Undersøgelse: Borrelia antistof(Intratekal test), (kan kun bestilles på hospital) Materiale: pakke: Koblet spinalvæske og serum Tidspunkt for prøvetagning: Når indikationen er stillet, evt. opfulgt af nye prøver med 2-4 ugers mellemrum til diagnostisk afklaring er nået. Utensilier: Tørglas, til spinalvæske sterilt spidsglas. Prøvetagning: Venepunktur. Lumbalpunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Minimum 0,6 ml blod (0,3 ml serum). Mindst 2,5 ml spinalvæske. Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Intratekal test udføres 3 gange ugentlig. Svar angives for antistofundersøgelse af blod som negativ eller positiv for Borrelia antistoffer. Undertiden vil resultatet være en grænseværdi, som kan følges op med en ny prøve efter ca. 2 uger. Svar på undersøgelse for intratekal antistofsyntese angives som en spinalvæske/serum indeks for hhv. IgM og IgG antistoffer mod Borrelia. Positivt referenceindeks er 0,3–100. Tolkning: IgM undersøgelsen kan være negativ indtil 2-3 mdr. efter begyndelsen af 2. stadium. Udvikling af IgG antistoffer kan forsinkes af antibiotisk behandling. Efter behandling aftager niveauet af IgM antistoffer, som dog kan påvises i op til et år. Interval for positiv intratekaltest er index på >0,3. Positiv intratekaltest er diagnostisk for neuroborreliose, uanset om index for IgM eller IgG er forhøjet. Ved neuroborreliose er intratekaltesten positiv i løbet af 2-6 uger, dvs. undersøgelsen kan være negativ i første sygdomsuge. Intratekal IgG syntese kan fortsætte i årevis efter endt behandling. Intra- P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 34 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 tekal IgM syntese ophører oftest efter ca. 6 mdr. For at stille diagnosen Borrelia artrit, som herhjemme er sjælden, kræves positiv IgG. Bemærkninger: Facialisparese hos børn skyldes borreliainfektion i 30-40 % af tilfældene. De anvendte testmetoder måler antistoffer mod de tre B. burgdorferi undertyper som forårsager borreliose i Europa. Falsk positivt IgM resultat i blod kan ses ved mononucleose og autoimmunsygdomme. Påvisning af IgG antistoffer er ikke nødvendigvis et udtryk for sygdomsaktivitet, men kan være et udtryk for overstået sygdom. Syfilis kan give positive fund. Neuroborreliose er anmeldelsespligtig. Bronkoalveolær lavage (BAL) Princip: Sekret ophentet ved skylning af et lungeafsnit i forbindelse med fiberbronkoskopi. Standardundersøgelsen omfatter: Undersøgelse af BAL vælges som en pakke med mulighed for tilvalg af undersøgelser i en supplerende BAL pakke. I standardpakken kan vælges: 1. Mikroskopi, dyrkning og resistens som omfatter undersøgelse for Nocardia og Actinomyces. 2. Atypisk pneumoni (Legionella, Mycoplasma og Chlamydophila pneumoniae) 3. Mycobacterium (TB) DNA og dyrkning I den supplerende BAL pakke kan tilvælges: 1. Cytomegalovirus (CMV) DNA 2. Herpes simplex virus (HSV) DNA 3. Pneumocystis jiroveci (tidl. P. carinii) DNA 4. Influenzavirus (A+B) virus + Respiratorisk Syncytialvirus (RSV) RNA 5. Varicella zoster virus (VZV) DNA 6. Aspergillus galaktomannan antigen Indikation: Patienter med klinisk/røntgenologisk pneumoni, som ikke ekspektorerer, eller hvor en sandsynlig diagnose ikke er opnået med undersøgelse af ekspektorat, trakeal- eller bronkialsug. Diagnostisk udredning ved pneumoni hos immunsupprimerede patienter, specielt ved mistanke om Aspergillus, Pneumocystis ji- P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 35 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 roveci eller mykobaterieinfektion. Prøvemateriale: Tidspunkt for prøvetagning: Skyllevæske fra bronkier og alveoler ophentet ved bronkoskopi. Når anden diagnostik ikke har afklaret ætiologien til patientens pneumoni. Utensilier: Sterile spidsglas med skruelåg. Plastflaske 250 ml med skruelåg. Prøvetagning: På Gentofte og Herlev Hospital (Onkologisk og Hæmatologisk afdeling) bestilles undersøgelsen på Lungemedicinsk afdeling Y, Gentofte Hospital. Procedure: Først skylles med 20 ml sterilt vand, som opsuges til PCR for Legionella. Derefter skylles med 100-150 ml sterilt isotonisk saltvand, indtil der er opsuget 80 ml skyllevæske i en steril plastflaske. Dette fordeles med 10 ml i hver af tre spidsglas. Ønskes TB dyrkning eller andre undersøgelser, tages et passende antal ekstra glas. Prøvemængde: En rekvisition pr. prøve, der fremsendes til: Alm. bakteriologi og svampe - 10 ml PCR for Legionella - 10 ml TB mikroskopi - 10 ml Rekvisition: Alle rekvisitioner skal mærkes med "BAL". Patientens grundsygdom og indikation for undersøgelsen skal fremgå af rekvisitionen. Forsendelse: Prøven skal meldes til vagthavende mikrobiolog før afsendelse og sendes akut til KMA i kølekasse. Svarafgivelse og tolkning: Prøven mikroskoperes ved ankomst til KMA og foreløbigt svar afgives. Prøver uden vækst besvares efter 2 døgn. Ved fund af betydende bakterier, besvares prøven efter 2-5 døgn. Fund af lavpatogene bakterier kan have klinisk betydning, specielt hvis de forekommer i renkultur. Patienter med kronisk bronkitis, og patienter som er intuberet eller trakeostomeret, kan være koloniseret i nedre luftveje med svælgflora. Det er derfor altid nødvendigt at sammenholde de mikrobiologiske fund med klinikken. Bemærkninger: Ønskes undersøgelse for mykobakterier, der inkluderer dyrkning og PCR, videresendes prøven fra KMA til Statens Serum Institut. Ønskes undersøgelse for pneumocyster (PCR), fremsendes spidsglas med 10ml BAL. Ønskes undersøgelse for respirationsvejsvirus. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 36 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Brucella antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: Brucella antistof. Materiale: serum eller koagelblod Brucella DNA/RNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: Brucella DNA/RNA. Materiale: glandelpodning, væv eller angiv prøvemateriale i fri tekst. Samt evt. lokalisation. Burkholderia pseudomallei DNA/RNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: Burkholderia pseudomallei DNA/RNA. Materiale: glandelpodning, væv eller angiv prøvemateriale i fri tekst. Samt evt. lokalisation. Børneorm (Enterobius vermicularis) Princip: Mikroskopi for Enterobius vermicularis. Prøvemateriale: Analaftryk med klar cellotape (ikke 3M). Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Enterobius vermicularis(børneorm) (mikroskopi) Materiale: analaftryk Indikation: Natlig analkløe. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 37 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Tidspunkt for prøvetagning: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 38 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Om morgenen før personen defækerer og vaskes. Utensilier: Objektglas med mat skrivefelt og forsendelseshylster til objektglas. Træspatel. Klar cellotape. Prøvetagning: Træspatel, beklædt med klar tape (klæbesiden udad), trykkes mod analåbningen. Tapestykket anbringes herefter på langs på objektglasset med den klæbende side nedad mod glasset (analaftrykket placeres midt på objektglasset). Tapen trykkes forsigtigt fast mod objektglasset med et lille stykke gaze eller vattot. Overskydende tape klippes af, således at det ikke når ud over objektglassets kanter eller dækker skrivefeltet. Glasset mærkes med rekvisitionens selvklæbende nummer, som placeres på tværs over skrivefeltet. Opbevaring: I køleskab (4-8° C). Forsendelse: Sendes i forsendelsesetui til objektglas. Forsendelse med postvæsenet kan anvendes. Svarafgivelse: Prøven undersøges kun på hverdage. Svar afgives samme dag, som prøven modtages i laboratoriet. Tolkning: Mindst 3 negative undersøgelser med 1-2 døgns mellemrum bør foreligge, før børneorm nogenlunde sikkert kan udelukkes. Bemærkninger: Fæces er ikke velegnet til påvisning af Enterobius vermicularis. Ved positivt fund anbefales det, at hele husstanden behandles. Campylobacter antistof Ig(G,M,A), (se Rigshospitalets prøvevejledning) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: vælg campylobacter antistof. Materiale: serum eller koagelblod Candida mannan (antigen og antistof undersøgelse) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: candida mannan(antigen og antistofundersøgelse) P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 39 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Materiale: spinalvæske eller serum eller koagelblod Chikungunya virus PCR og antistof IgM, IgG Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: vælg: Chikungunyvirus DNA/RNA og antistof IgM, IgG. Materiale: serum eller koagelblod Chlamydophila pneumoniae antistof IgG & IgM Denne undersøgelse anbefales erstattet af en PCR-analyse, der er langt mere sensitiv og specifik ved akut sygdom. Send i stedet halspodepind i eSwab medie eller luftvejssekret til PRC for pågældende agens. Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: vælg: Chlamydophila pneumoniae antistof. Materiale: serum eller koagelblod Chlamydophila pneumoniae DNA, (se Mycoplasma pneumoniae DNA/Chlamydophila pneumoniae DNA). Chlamydophila psittaci antistof (papegøjesyge) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: vælg: Chlamydophila psittaci antistof (papegøjesyge) Materiale: serum eller koagelblod Chlamydia psittaci DNA Denne undersøgelse indgår også i den samlede undersøgelse: pneumoniudredning (atypisk pneumoni) på luftvejssekreter. Se denne. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 40 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Princip: Påvisning af Chlamydia psittaci DNA med PCR-teknik. Indikation: Atypisk pneumoni, evt. i forbindelse med fuglekontakt. Prøvemateriale: Podemateriale fra svælget Ekspektorat Trakealsekret BAL Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Chlamydophila psittaci DNA/RNA Materiale: slimhindepodning Lokalisation: svælg Tidspunkt for prøvetagning: Tidligst muligt i sygdomsforløbet. Utensilier: ESwab. Ekspektoratdåse i forsendelsescontainer eller trakealsugesæt. Prøvetagning: Podepinden gnides mod slimhinden i svælget, optimalt nasopharynx, hvorefter den anbringes I transportmediet (pink skruelåg) og afknækkes. Ekspektorat, trakealsekret eller BAL tages som beskrevet (trakealsug), eller BAL. Opbevaring: I køleskab ved 4-8° C. Forsendelse: eSwab fremsendes i forsendelseshylster, ekspektorat fremsendes i dåse med tilsvarende forsendelsescontainer, trakealsekret og BAL i sterilt spidsglas i forsendelseshylster. Luftvejssekret fremsendes om muligt i kølekasse. Svarafgivelse: En til tre hverdage efter modtagelse af prøven. Bemærkninger: C. pneumoniae er sjældent årsag til atypisk pneumoni i Danmark, og infektionen er oftest mild. Infektion med C. psittaci (ornithose, psittacose) forudsætter kontakt med syge fugle (typisk papegøjer og kanariefugle, men kan også overføres af andre fuglearter). Ornithose er sjælden i Danmark (20-30 tilfælde årligt). Undersøgelse for C. psittaci udføres kun efter særskilt rekvisition. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 41 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Chlamydia trachomatis og Neisseria gonorrhoeae RNA Princip: Påvisning af Chlamydia trachomatis og Neisseria gonorrhoeae med genamplifikationsteknik (APTIMA Combo-test). Indikation: Mænd: Uretrit, epididymit og evt. proctitis og conjunktivitis. Kvinder: Cervicitis, salpingitis, ”abakteriel cystit” hos yngre og evt. conjunktivitis. Inden provokeret bort eller andre intrauterine indgreb, hvor der bør podes fra både urethra og cervix. Nyfødte: Inklusionsconjunktivitis. Spædbørn: Pneumoni efter smitte i fødselsvejen. På baggrund af de mange asympeomatiske infektioner, kan følgende risikofaktorer give anledning til tilbud om undersøgelse: Seksuelt aktive unge under 25 år. Partnerskifte eller flere partnere i de sidste 6 md. Partner med symptomer. Denne undersøgelse erstatter ikke podning til dyrkning for gonokokker. Ved specifik mistanke om gonoré, anbefales podning med eSwab til dyrkning for gonokokker samtidigt med APTIMA Combotest. Prøvemateriale: Materiale fra inficeret slimhinde, cervix og urethra hos kvinder, øjne og svælg hos spædbørn, urin, svælg og rectum hos begge køn Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Chlamydia og gonokokker DNA/RNA. Materiale: slimhindepodning eller urin. Lokalisation: cervix, svælg, rectum, urethra eller øje Utensilier: GEN-PROBE APTIMA Prøvetagningssæt til podning fra mænd og kvinder (unisex): podepind med blåt skaft til prøvetagning fra cervix, urethra, vagina, svælg, rectum og øjne. Medfølgende rensepodepind (hvidt skaft) til cervix hos kvinder. Reagensrør med GENPROBE APTIMA prøvetransportmedie. GENPROBE APTIMA Prøvetagningssæt til urin (mænd): Patienten må ikke have ladet vandet mindre end en time før prøvetagning. First-catch urin opsamles i beholder uden tilsætningsstoffer. Dernæst overføres 2 ml urin til urinbeholder med medfølgende pipette (bemærk de to målelinjer på beholderen, urinvolumen skal være imellem målelinjerne). Se desuden nedenfor. Prøvetagning: Cervix(kvinder): Brug vatpind med hvidt skaft til at fjerne slim fra orificium, hvorefter vatpinden kasseres. Podepind med blåt skaft indføres i cervikalkanalen og roteres med et fast tryk mod slimhinden 15-30 sekunder. Den fjernes, og spid- P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 42 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 sen placeres i bunden af transportrøret. Skaftet afknækkes, og låget skrues på, så det er tæt lukket. Urethra (kvinder): Podepinden føres ind i urethra og roteres fast mod slimhinden. Videre procedure som ovenfor. Urethra (mænd): Podepinden indføres 2-4 cm ind i urethra og roteres 3-5 sek. Videre procedure som ovenfor. Øjne (nyfødte): Podepinden gnides mod indersiden af nedre øjenlåg. Videre procedure som ovenfor. Luftveje (spædbørn): Podepinden gnides rundt i svælget og på tonsiller. Videre procedure som ovenfor. Svælg (voksne): Podepinden gnides rundt i svælget og på tonsiller. Videre procedure som ovenfor. Rectum: Kun ved specifikke symptomer Urin (kun mænd): Der bør gå mindst 1 time efter sidste vandladning før prøvetagningen. Urin opsamles uden forudgående afvaskning i en steril beholder. Kun de første 20-60 ml skal opsamles (”first-catch”), dvs. ikke midtstråleurin. Derefter overføres 2 ml til diluentrøret. Volumen skal være indenfor de to målestreger. Låget skrues på, så det er tæt lukket. Opbevaring: Efter prøvetagning er holdbarheden højst 30 dage ved stuetemperatur. Forsendelse: Sendes i forsendelseshylster. Tolkning: Sensitiviteten af analysen er 99 %, specificiteten 99-100 %. Metoden kan ikke anvendes til behandlingskontrol. Positivt resultat for Neisseria gonorrhoeae bør altid medføre podning med eSwab fra cervix/urethra, svælg og rectum med henblik på dyrkning og resistensbestemmelse. Bemærkninger: Ved undersøgelse af børn <15 år, bedes indikation anført, specielt ved mistanke om seksuelt misbrug. Er der mistanke om seksuelt misbrug henvises til børneafdelingen, Herlev Hospital. Clostridium botulinum Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: clostridium botulinum(dyrkning) P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 43 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Materiale: serum eller koagelblod eller væv-sektion. Samt evt. lokalisation. Clostridium botulinum toksiner Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles af hospital. Undersøgelse: clostridium botulinum toksiner. Materiale: serum eller koagelblod eller væv-sektion. Samt evt. lokalisation. Clostridium difficile, (se Gastroenteritis, diagnostik) Coccidioides antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: vælg: Coccidioides antistof. Coxiella burnetii antistof (Q-fever) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: vælg: Coxiella burnetii antistof (Q-feber) Coxiella burnetii PCR (Q-fever) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: Coxiella burnetii DNA/RNA (Q-feber) Materiale: væv eller væske. Samt evt. lokalisation. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 44 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Crimean Congo hemorrhagic fever virus DNA/RNA, (se Krim-Congovirus PCR og antistof IgM, IgG). Cryptococcus antigen Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: Cryptokok antigen. Materiale: serum/koagelblod eller spinalvæske. CSV-syfilisantistoffer fuld undersøgelse Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: Syfilis antili-pide og antireponemale antistoffer (fuld undersøgelse) Materiale: serum eller koagelblod Cytomegalovirus DNA kvantitativ/viral load, (se Rigshospitalets prøvevejledning). Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: Cytomegalovirus DNA/RNA (kvantitativ) Materiale: vælg type (mange valgmuligheder) Samt evt. lokalisation. Cytomegalovirus (CMV) antistoffer Princip: Indikation: Påvisning af IgM og IgG antistoffer mod CMV med CLIA(Chemiluminescens immunoassay) Bestemmelse af immunstatus. Formodning om aktuel CMV-infektion. Undersøgelse for CMV-antistoffer kan komme på tale ved klinisk mistanke om mononukleose og negativ undersøgelse for Epstein P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Prøvemateriale: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 45 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Barr virus eller ved akut hepatitis, hvor mere hyppige årsager er udelukket. Blod uden tilsætning. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Cytomegalovirus antistof (sygdom?) Materiale: Serum eller koagelblod Tidspunkt for prøvetagning: Ved formodning om aktiv infektion: Tidligst muligt i sygdomsforløbet og evt. igen 2 uger senere. Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Minimum 1 ml blod (0,5 ml serum). Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Tolkning: Fund af IgM antistoffer mod CMV kan tyde på aktuel infektion, idet CMV IgM bliver positiv 1-3 uger efter sygdomsdebut. Vedvarende (>1 år) høj IgM titer kan ses hos immunsupprimerede. Ved reaktivering eller reinfektion vil CMV IgM blive positiv hos 50-75 % af immunsupprimerede patienter, men kun hos få immunkompetente, og vil oftest kun være svagt positiv. Ved reaktivering eller reinfektion er IgG titeren forhøjet, og signifikant (2-4 folds) titerstigning kan påvises over 2-4 uger. Grænseværdier, der ligger i gråzoneområde kan være udtryk for tidlig antistofdannelse eller falsk positiv reaktion. Prøven kan evt. gentages efter 2 uger. Hos mange gravide optræder falsk positiv IgM reaktion hyppigere. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 46 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Mulighederne er således: CMV IgM CMV IgG Negativ < 18 U/ml Negativ < 12 U/ml ingen aktuel eller tidligere CVM infektion Negativ < 12 U/ml a) b) akut primær infektion (tidlig fase) kongenit infektion (alder <2 uger) uden maternelle IgG antistoffer a) b) akut primær infektion kongenit infektion (alder <2 uger) med maternelle IgG antistoffer reaktivering/reinfektion hos immunsupprimeret person tidligere CMV infektion passivt overførte antistoffer (immunglobulinterapi, transfusion, maternelle IgG antistoffer) reaktivering/reinfektion hos immunkompetent person Positiv ≥ 22 U/ml Positiv ≥ 22 U/ml Negativ < 18 U/ml Positiv ≥ 14 U/ml Positiv ≥ 14 U/ml Tolkning c) a) b) c) Bemærkninger: Ved monitorering af immunsupprimerede patienter for reaktivering af CMV-infektion bør antistofundersøgelse suppleres med enten CMV antigenpåvisning i leukocytter eller med påvisning af CMV DNA i blod ved PCR undersøgelse (Statens Serum Institut). Ved kongenit CMV infektion er CMV IgM positiv hos ca. 75 %. For at have diagnostisk værdi skal blodprøven være udtaget indenfor 2 uger efter fødslen. Denguevirus antigen, (se Rigshospitalets prøvevejledning) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: vælg: Denguevirus antigen Materiale: Blod(EDTA-glas), serum eller koagelblod eller spinalvæske. Denguevirus IgG og IgM antistof, (se Rigshospitalets prøvevejledning) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: vælg: Denguevirus RNA/DNA. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 47 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Materiale: vælg: serum eller koagelblod Diaréudreding, (se Gastroenteritis, diagnostik) Diaréudredning (tarmpatogene parasitter) DNA/RNA, (se Duodenalsekret). Dientamoeba fragilis Princip: Påvisning af dientamoeba fragilis DNA ved PCR. Dientamoeba fragilis forekommer kun som trofozoitter i faeces, da parasitten ikke danner cyster. Den kan derfor kun påvises i faeces ved PCR eller direkte mikroskopi af varm faeces. Indikation: Betydningen af fund af Dientamoeba fragilis er omdiskuteret idet flere kliniske undersøgelser ikke har kunnet påvise sammenhæng mellem symptomer og påvisning af Dientamoeba fragilis. Andre infektiøse årsager til patientens symptomer bør være udelukket, inden man undersøger for Dientamoeba fragilis. Prøvemateriale: Fæces Prøvebestilling i OPUS/Webreq: Bestilles via elektronisk rekvisition under diaréudredning. Det er vigtigt, at der på den elektroniske rekvisition under kliniske oplysninger specifikt anføres, at der ønskes undersøgelse for Dientamoeba fragilis, da prøven ellers ikke vil blive undersøgt for dette Tidspunkt for prøvetagning: Ikke afgørende. Utensilier: Fæcesrør med forsendelsescontainer Prøvetagning: Prøven skal tages fra frisk fæces og må ikke indeholde urin, røntgenkontrastmidler eller have været i kontakt med desinfektions- og rengøringsmidler. Fæces opsamles bedst i et varmedesinficeret bækken. Hvis afføringen ikke er homogen, udvælges med fæcesrørets prøvetagningsske materiale fra vandige/løse, slimede, pusholdige eller blodige områder. For at undgå smitte til andre personer må fæcesrøret ikke forurenes på ydersiden, og efter påfyldningen skal skruelåget skrues hårdt til, så lækage under transport undgås. Prøvemængde: Fæcesrøret må højst fyldes 1/3 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 48 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Opbevaring: I køleskab (4-8 C) Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Tolkning: Svaret afgives som Dientamoeba fragilis påvist/ikke påvist. Klinisk betydning af positivt fund omdiskuteret. Difteritoksin antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Difteritoksin antistof. Materiale: serum eller koagelblod Duodenalsekret Princip: Kvantitativ dyrkning, identifikation og følsomhedsbestemmelse af isolerede bakterier og svampe. Indikation: Malabsorption pga. af bakteriel overvækst i tyndtarmen. Prøvemateriale: Duodenalsekret. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Dyrkning og resistens. Materiale: Sekret. Lokalisation: Duodenum. Tidspunkt for prøvetagning: Når patienten er uden antibiotisk behandling. Utensilier: Spidsglas med skruelåg. Prøvetagning: Duodenalsekret. Prøvemængde: Spidsglasset må kun fyldes halvt, 1-2 ml er tilstrækkeligt. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 49 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Opbevaring: I køleskab (4-8o C). Forsendelse: Om muligt i kølekasse. Svarafgivelse: Foreløbigt svar afgives 1 døgn efter modtagelse af prøven. Slutsvar efter 2-5 døgn. Tolkning: Hos raske patienter bosiddende i tempererede områder er den øverste del af tyndtarmen enten steril eller indeholder mindre end 103 organismer/ml sekret, men lejlighedsvis kan der findes helt op til 106-109 pr. ml. Bemærkninger: Andre årsager til malabsorption, fx Giardia bør udelukkes. Duodenalsekret til undersøgelse for Giardia (se side35-37) sendes i termobeholder (37° C). Der er dårlig korrelation mellem bakterietallet i tyndtarmen og graden af malabsorption, ligesom terapeutisk udryddelse af bakteriel overvækst ofte ikke følges af bedring af malabsorptionen. Indikation for undersøgelsen bør derfor konfereres med KMAs læger. Ebola virus PCR og antistof IgM, IgG UMIDDELBAR ISOLATION HENVENDELSE TIL INFEKTIONSMEDICINSK BAGVAGT PÅ HVIDOVRE HOSPITAL! Se SSI Diagnostik Ved mistanke om akut hæmorrhagisk feber, tages to prøver – en til serologi og en til PCR. Prøven til serologi opbevares under rette sikkerhedsforanstaltninger på hospitalsafdelingen, på køl indtil resultatet på PCR analysen foreligger. Ved negativ PCR, indsendes denne prøve til test for overstået infektion. Prøven til PCR tilsættes blå inaktiveringsbuffer (se ovenfor) og sendes samme dag. Kan prøven ikke sendes samme dag, skal den opbevares på køl (2-8 ) o sendes hurtigst muligt. Her testes for akut Ebola hæmorrhagisk feber. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: ebola virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof. Materiale: PCR: blod tilsat SSIs blå inaktiverinsmedie, kontakt vagthavende SSI tlf 3268 3460 eller 4033 6379. Serologi: serum koagel blod eller blod i EDTA glas P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 50 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Echinococcus (mikroskopi) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles af hospital. Undersøgelse: echinococcus mikroskopi. Materiale: cystevæske Lokalisation: Lever. Hvis anden lokalisation end lever angives dette under de kliniske oplysninger. Echinococcus granulosus antistof, (se Rigshospitalets prøvevejledning) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: echinococcus antistof. Materiale: Serum eller koagelblod. Echinococcus multilocularis antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: echinococcus multilocularis. Materiale: Serum eller koagelblod. Ehrlichia antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: ehrlichia antistof. Materiale: Serum eller koagelblod. Encephalit udredning, (se Herpes simplex virus (HSV) antistof, eller Varicella zoster virus (VZV) DNA). Encephalit-udredning Princip: Undersøgelsen består af 2 undersøgelser, hvor der oftest kun er indikation for at udføre PCR undersøgelsen. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 51 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Påvisning af HSV 1 og HSV 2 og VZV DNA med PCR-teknik. Intrathekal antistofsyntese påviser index i blod og spinalvæske for specifikke antistoffer rettet mod HSV-1, HSV-2 og VZV, sammenholdt med overordnet IgG og albumin index. Indikation: Prøvemateriale: Viral meningitis, Viral encephalitis. Neonatal herpesinfektion. Der er kun indikation for at supplere med intratkal antistofsyntese, hvis patienten har haft symptomer i mere end 10 dage. Hvis der ikke er leukocytter i spinalvæske vil der heller ikke blive undersøgt for intrathekal antistofsyntese. Spinalvæske med samtidigt udtaget blodprøve ved mistanke om encephalitis og meningitis Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: encephalit udredning (HSV + VZV) DNA/RNA Materiale: Pakke koblet spinalvæske og serum. Ved mistanke om neonatal herpes, hvor der ikke er indikation for intrathekal antistofsyntese, anføres dette under de kliniske oplysninger. Tidspunkt for prøvetagning: Så tidligt som muligt i sygdomsforløbet. Utensilier: Sterilt spidsglas til spinalvæske, Tørglas til blodprøve. Prøvetagning: Spinalvæske (mindst 1 ml) udtømmes i sterilt spidsglas og sendes uden tilsætning sammen med Blodprøve (mindst 5 ml) udtaget i sterilt tørglas. Opbevaring: I køleskab ved 4 - 8° C. Forsendelse: Evt. i kølekasse. Svarafgivelse: En til to hverdage efter modtagelsen. Positivt svar angives som HSV type 1,HSV type 2 eller VZV påvist. Ved negativt PCR svar vil det blive angivet på svaret hvis prøven undersøges yderligere for intrathekal antistofsyntes, evt efter klinisk kontakt ved tvivl om indikationen. Svar på intrathekal antistofsyntese efter ca. 1 uge. Tolkning: Ved HSV encephalitis vil PCR være positiv og intratekal antistofsyntese negativ tidligt i forløbet. Ca. 10-14 dage efter symptomdebut vil det være omvendt. Derfor er angivelse af sygdomsvarighed på rekvisitionen afgørende for korrekt prøvebehandling. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 52 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Bemærkninger: Viral encephalitis kan forårsages af bl.a. HSV, VZV og enterovirus. Ved symptomer foreneligt med encephalitis skal såvel spinalvæske som blodprøve fremsendes til intratekal antistofsyntese for HSV og VZV samt PCR-undersøgelse for enterovirus Ekspektorat, trakeal- og bronkialsekret Princip: Indikation: Prøvemateriale: Mikroskopi, dyrkning, identifikation og følsomhedsbestemmelse af potentielt patogene bakterier og svampe i prøver fra nedre luftveje. Anaerob dyrkning udføres kun, hvis der på rekvisitionen er anført, at det drejer sig om bronkoskopisk aspiration fra formodet lungeabsces eller aspirationspneumoni. Klinisk penumoni: Hoste, ekspektoration, dyspnø og feber med stetoskopisk og/eller røntgenolohisk tegn til pneumoni. Børn med nedre luftvejsinfektion. Akut forværring af kronisk obstruktiv lungesygdom (KOL), kronisk bronkit eller emfysem: Øget purulent ekspektoration og febrilia. Differentialdiagnostisk udredning ved svær progredierende pneumoni med multiorganpåvirkning, eventuelt med hyponatriæmi (Legionella pneumoni). Differentialdiagnostisk udredning ved adult respiratory distress syndrom (ARDS). Differentialdiagnostisk udredning ved mulig aspiration. Sekret fra nedre luftveje frembragt ved hoste eller sug fra trakeal eller bronkier. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Under materiale: vælg: ekspektorat, trakeal- eller bronkialsekret. Vælg ønsket undersøgelse. Tidspunkt for prøvetagning: Før antibiotisk behandling startes. Utensilier: Ekspektoratdåse og forsendelsescontainer (bestilles på to forskellige varenummer) eller trakealsugesæt. Prøvetagning: Ekspektorat: Patienten bør instrueres nøje mhp. at opnå egnet materiale. Før prøvetagningen skal munden skylles for evt. madrester. Patienten bør sidde oprejst i sengen eller være stående. Lungerne fyldes med luft og tømmes i et drag, idet der hostes så dybt som muligt, og ekspektoratet spyttes ud i den sterile inderskål. Er mængden utilstrækkelig, kan proceduren gentages eller trakealsugning benyttes. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 53 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Trakeal- og bronkialsug: Sekretet ophentes ved sugning med kateter fra trakea eller gennem bronkoskop. Det anbefales, at prøvetageren anvender mundbind og sterile handsker. Det er væsentligt, at sugekateteret "kinkes" under indføring og udtagning, således at der udelukkende suges i selve trakea/bronkier. Trakealtubesekret: For at mindske kontaminationen med bakterier fra tuben skal denne suges ren for sekret og evt. efterskylles med sterilt vand. Et nyt sterilt sugekateter nedføres, så spidsen ligger nedenfor tuben, hvorefter der suges. Viskøse sekreter kan løsnes ved at manipulere kateteret, så der udløses en hosterefleks. Prøvemængde: 1-2 ml mukopurulent materiale. Emballering: Ekspektorat: Låget på den sterile inderskål skrues fast, hvorefter inderskålen anbringes i forsendelsescontaineren med tryklåg. Trakeal- og bronkialsug: Ingen særlige krav. Opbevaring: I køleskab (4-8º C). Forsendelse: Om muligt i kølekasse. Forsendelsescontaineren til ekspektorat er godkendt til postforsendelse. Svarafgivelse: Prøven mikroskoperes ved ankomsten til KMA. Foreløbigt prøvesvar afgives, herunder en vurdering af materialets egnethed Prøver uden vækst besvares efter 1-2 døgn. Ved fund af betydende bakterier besvares prøven efter 1-4 døgn. Tolkning: Prøvens validitet vurderes ved direkte mikroskopi af prøven. Hvis der ved mikroskopi ses cylinderepitelceller og leukocytter uden tilblanding af pladeepitel, bedømmes den mikrobiologiske flora i disse strøg. Påviste bakterier vil blive dyrket, identificeret og følsomhedsbestemt. Hvis strøgene er uden bakterier og svampe, er det mindre sandsynligt, at patientens pneumoni skyldes almindelige bakterier eller svampe. Patienter med kronisk bronkit og patienter som er intuberet eller trakeostomeret, kan være koloniseret i nedre luftveje med svælgflora. Det er derfor altid nødvendigt at sammenholde de mikrobiologiske fund med klinikken. Bemærkninger: Ønskes der mikroskopi for TB, skal dette afkrydses særskilt på rekvisitionen. Samtidig bør der sendes et ekspektorat til dyrkning og evt. PCR til KMA, som videresender dette til Statens Serum Institut. Bemærk – ved PCR og dyrkning for TB/Mykobakterer på Statens Serum Institut, vil der rutinemæssigt også blive lavet mikroskopi. Ønskes undersøgelse for respirationsvejsvirus eller atypisk pneumoni, afkrydses disse undersøgelser. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 54 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Enterobius vermicularis, (se børneorm) Entamoeba histolytica antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: entamoeba antistof. Materiale: Serum eller koagelblod Enterovirus IgM Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: enterovirus IgM (sygdom?) Materiale: Serum eller koagelblod Enterovirus RNA, fæces Der er kun indikation for denne undersøgelse ved mistanke om systemisk enterovirusinfektion, hvor agens ikke er fundet andetsteds. Eller med henblik på overvågning. Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: enterovirus DNA/RNA Materiale: fæces. Enterovirus RNA Princip: Påvisning af Enterovirus RNA ved hjælp af PCR-teknik, hos børn < 2 år undersøges tillige for parechovirus. Indikation: Viral meningitis Pneumoni hos immunsupprimerede Viral encephalitis Neonatal sepsis Andre symptomer på enterovirusinfektion. Prøvemateriale: Spinalvæske Trakealsug P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 55 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 BAL Nasopharynxsug Svælgpodning Vesikelpodning Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: enterovirus DNA/RNA Materiale: bronkoalveolær lavage(BAL), nasopharynxsekret, slimhinde podning, spinalvæske eller vesikelpodning. Tidspunkt for prøvetagning: Tidligst muligt i sygdomsforløbet. Utensilier: Sterilt spidsglas til spinalvæske, trakealsug, BAL og nasopharynxsug. ESwab til svælg- og vesikelpodning. Fæcesrør med forsendelseshylster til fæces. Prøvetagning: Spinalvæske (mindst 1 ml) udhentes i forbindelse med lumbalpunktur. Ved svælg- og vesikelpodning anvendes eSwab. Opbevaring: I køleskab 4 - 8° C. Prøven må ikke fryses. Forsendelse: Hurtigst muligt, gerne i kølekasse. Svarafgivelse: En til to hverdage efter prøvens modtagelse. Tolkning: Positivt resultat bør bekræftes som beskrevet nedenfor. Bemærkninger: Viral meningitis skyldes først og fremmest enterovirus. Ved positivt PCR-resultat for enterovirus i spinalvæske, kan resultatet konfirmeres med påvisning af enterovirus DNA i nasopharynxsekret eller svælgpodning ved PCR. Der skal altid sendes faeces til PCR på Statens Serum Institut som led i den centrale overvågning af enterovirusinfektioner. Epstein-Barr virus (EBV) antistoffer Princip: Påvisning af IgM og IgG antistoffer mod EBV viralt capsid antigen (VCA) og IgG antistoffer mod EBV nuclear antigen (EBNA) med CLIA (chemiluminescens immunoassay). Indikation: Klinisk mistanke om mononukleose. Akut hepatitis, hvor mere hyppige årsager er udelukket. Prøvemateriale: Blod (serum) uden tilsætning. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 56 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: epstein-barr virus antistof (sygdom?) Materiale: Serum eller koagelblod. Tidspunkt for prøvetagning: Første blodprøve så tidligt som muligt i sygdomsforløbet. Prøven gentages evt. efter 10-14 dage. Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Minimum 0,6 ml blod (0,3 ml serum). Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Tolkning: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 57 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Positiv reaktion for IgM antistoffer mod VCA (VCA IgM) er diagnostisk for primær EBV infektion og ses hos ca. 90 %. IgG antistoffer mod EBNA (EBNA IgG) udvikles 2-8 mdr. efter primær EBV infektion og samtidig hermed forsvinder IgM antistoffer mod VCA. IgG antistoffer mod VCA og EBNA (EBNA IgG) er påviselige i serum resten af livet. Ca. 20 % af klinisk mononukleose skyldes CMV infektion. Uspecifik IgM-forhøjelse kan ses ved akut infektion med cytomegalovirus (CMV). VCA IgM VCA IgG EBNA IgG Tolkning Negativ Negativ Negativ Ikke tidligere EBV infektion < 20 U/ml < 22 U/ml < 5 U/ml Positiv Negativ/positiv Negativ ≥ 40 U/ml Tidlig fase i primær EBV infektion < 5 U/ml Positiv Positiv Negativ ≥ 40 U/ml ≥ 22 U/ml < 5 U/ml Negativ Positiv Negativ < 20 U/ml ≥ 22 U/ml < 5 U/ml Negativ Positiv Positiv < 20 U/ml ≥ 22 U/ml ≥ 5 U/ml Negativ Negativ Positiv < 20 U/ml < 22 U/ml ≥ 22 U/ml Positiv Positiv Positiv ≥ 40 U/ml ≥ 22 U/ml ≥ 22 U/ml Sen fase i primær EBV infektion Tidligere infektion (3-6 mdr. siden) Tidligere infektion (>3-6 mdr. siden) Tidligere infektion (>3-6 mdr. siden) Tidligere infektion med falsk positiv IgM eller såkaldt reaktivering (klinisk betydning usikker) Epstein-Barr virus (EBV) DNA Kvant, (se Rigshospitalets prøvevejledning) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: epstein-barr virus DNA/RNA (kvantitering) Materiale: Biopsi, bronkoalveolær lavage, knoglemarv, plasma, serum eller koagelblod, slimhindepodning, spinalvæske eller væv. Samt evt. lokalisation. Fasciola hepatica antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: fasciola hepatica antistof. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 58 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Materiale: Serum eller koagelblod Filarioidea antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: filarioidea antistof. Materiale: Serum eller koagelblod. Flucytosin serum koncentration Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: flucytosin (koncentrationsmåling). Materiale: Serum eller koagelblod. Franciscella tularensis antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: franciscella tularensis antistof (harepest) Franciscella tularensis DNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: franciscella tularensis DNA/RNA. Materiale: væv eller væske Franciscella tularensis (dyrkning) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 59 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: franciscella tularensis(dyrkning) Materiale: biopsi eller væske. Samt lokalisation. Fæces for orm, æg og cyster, se Gastroenteritis, diagnostik Gastroenteritis, diagnostik Princip: Indikation: Kontroldyrkning: Prøvemateriale: Tidspunkt for prøvetagning: Dyrkning af fæces på selektive substrater med henblik på påvisning af tarmpatogene bakterier. Clostridium difficile påvises med PCR (genforstærkningsteknik) direkte på fæces. Diaréfremkaldende E.coli påvises ved hjælp af PCR og dyrkning. Parasitundersøgelsens princip er PCR eller direkte mikroskopi efter behandling med formolethylacetat. Virus påvises med PCR. Mistanke om infektiøs diaré hos indlagte patienter Akut diaré med høj feber og/eller påvirket almen tilstand Blodig eller længerevarende diaré Diaré hos svækkede patienter som f. eks. patienter med nedsat immunforsvar og ældre Langvarige abdominale smerter Allergiske manifestationer der giver mistanke om parasitinfektion Abdominale symptomer mere end 14 dage – hvis ja hvilke Screening for gastrointastinale parasitter efter udlandsrejse. Er sjældent indiceret. Undtaget herfra er nogle tilfælde af tyfus-, para-tyfus-, Shigella- og VTEC a) infektioner. Frisk fæces; hvis fæces indeholder blod, slim eller pus, skal dette indgå i prøvematerialet. Dette gælder også for vandig eller flydende fæces. Kvitterede orm eller ormeled sendes i fysiologisk saltvand. Se også orm. Så tidligt som muligt i sygdomsforløbet. Der er med de anvendte følsomme diagnostiske metoder oftest kun indikation for indsendelse af en enkelt fæcesprøve. Er denne negativ, og patienten fortsat syg, indsendes yderligere to prøver opsamlet og dateret på forskellige datoer. Modtages flere fæcesprøver dateret samme dag, undersøges kun en prøve. Det er vigtigt at prøvenummer fra rekvisitionen sættes på prøverøret (det inderste rør). Undersøgelse for Clostridium difficile og norovirus foretages ikke, hvis der foreligger et positivt toksinsvar inden for de seneste 14 dage. Såfremt der indsendes ny prøve efter negativ mikroskopi for parasitter skrives under anamnese: ”ekstra prøve til parasirmikroskopi.” P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Udarbejdet af Prøvevejledning Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 60 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Standardundersøgelsen omfatter undersøgelse for Salmonella, Shigella, Yersinia enterocolitica og Campylobacter, Vibrio, Aeromonas og Plesiomonas. Hos indlagte patienter tillige Clostridium difficile og norovirus. Yderligere undersøgelser sammensættes efter oplysninger på rekvisitionen. Standard Undersøgelse Diaréfremkaldende E. coli a) Diaré <14 dage X Diaré ≥14 dage X Udlandsrejse d) X X Synlig blodig diaré X X >3 diarétilfælde i omgivelser udenfor hospital X X >3 diarétilfælde i omgivelser på hospital X X Hospitalsophold indenfor seneste måned X Immunsuprimeret X Alder >60 år X Parasitter PCR Parasitter mikroskopi f) g) Rotaadeno virus Norovirus (Roskildesyge) h) X b) X c) X X Clostridium difficile X e) X e) X X c) X e) X c) X X X X X X X X X a) Diaréfremkaldende E. coli omfatter: Verocytotoxin-producerende E.coli (VTEC), enteropathogenic E. coli (EPEC), enterotoxigenic E. coli (ETEC), enteroinvasive E. coli (EIEC) og intiminproducerende E. coli. b) Børn < 7 år c) Indlagte børn < 7 år d) Undtagen herfra er Europa, Australien, New Zealand og Japan. e) Hospitaliserede patienter f) Parasit PCR undersøgelsen omfatter Giardia lamblia, Entamoeba histolytica og Cryptosporidier g) Parasit mikroskopiundesøgelsen omfatter orme, æg og cyster h) Patienter > 2 år Utensilier: X Fæcesrør med forsendelsescontainer. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx X Internt nr. Prøvevejledning Prøvetagning: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 61 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Fæces opsamles bedst i et varmedesinficeret bækken. Hvis afføringen ikke er homogen, udvælges prøvematerialet med prøvetagningsskeen fra vandige, løse, slimede, purulente eller blodige aff. Prøvemængde: Prøverøret fyldes til markeringen "Fyld hertil" (ca. 1/3 af glasset). Dette er vigtigt, da der eller kan være for lidt prøvemateriale til alle diagnostiske undersøgelser. Skruelåget på prøverøret skal strammes og prøverøret anbringes i forsendelseshylsteret. For at undgå smitte til andre personer, må prøverøret ikke forurenes på ydersiden. Rekvisition: Bestilles i Webreq og OPUS under diaréudreding. Da arten af undersøgelser bestemmes ud fra en algoritme baseret på de kliniske oplysninger er det vigtigt at rekvisitionen udfyldes omhyggeligt. Det anbefales tillige at anføre øvrige relevante oplysninger som f.eks. klinisk diagnose og antibiotikabehandling. Promtspørgsmålene sikrer opnåelse af et tilstrækkeligt diagnostisk niveau. Ønskes særlige diagnostiske undersøgelser, som ikke udløses af algoritmen kan dette anføres under anamnesen Ved gastroenteritis uden diaré anføres dette blot under anamnesen og ordet diaré opfattes herefter som gastroenteritis. Opbevaring: I køleskab (4-8o C). Forsendelse: Hurtig forsendelse, om muligt i kølekasse. Der bør gå mindre end 1 døgn fra prøvetagning til modtagelsen i KMA.. Svarafgivelse: Prøver til undersøgelse for C. difficile, modtaget på KMA inden kl. 20 på alle ugens dage, tilstræbes besvaret samme dag. Øvrige PCR svar tilstræbes udgivet samme eller følgende hverdag, efter modtagelse af prøven på KMA. Svar for dyrkning af patogene tarmbakterier og mikroskopi for parasitter afgives efter 2-3 hverdage. Tolkning: Negativ prøve udelukker ikke tilstedeværelse af tarmpatogene bakterier hos patienten, idet bakteriepåvisning kan svigte, hvis udskillelsen er sparsom, ophørt eller undertrykt af antibiotika. Bemærkninger: Såfremt den første prøve er negativ, og patienten fortsat har symptomer, tages yderligere 2 prøver fra forskellige datoer, f.eks. to på hinanden følgende dage. Resistensbestemmelse af patogene tarmbakterier og tolkning: Vil blive udført i alle tilfælde, hvor det er relevant. Til praksissektoren vil der ikke udgå resistenssvar, idet det som hovedregel ikke er nødvendigt at behandle disse patienter med antibiotika. Følsomheden for de relevante antibiotika kan oplyses ved telefonisk kontakt til afdelingen. Hospitalsafdelingerne vil modtage resistensmønsteret på alle patogene tarmbakterier overfor relevante antibiotika. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 62 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 GAT, (se Gonokok antistof (GAT)). Giardia trofozoitter, (se Duodenalsekret). P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 63 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Gonokokker, (se Neisseria gonorrhoeae (gonokokker)(dyrkning) og Chlamydia trachomatis og Neisseria gonorrhoeae RNA). Gonokok antistof (GAT) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: neisseria gonorrhoeae antistof (GAT) Materiale: Serum eller koagelblod Gul feber virus PCR og antistof IgM, IgG Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på Hospital. Undersøgelse: Gul feber DNA/RNA, IgG og IgM Materiale: EDTA blod, Serum eller koagelblod. Haemophilus ducrei Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: haemophilus ducreyi DNA/RNA Materiale: sår, podning Lokalisation: genitalier, ydre Haemophilus influenza type b antistof (Hib) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: haemophilus influenzae type b antistof. Materiale: Serum eller koagelblod. Hantavirus PCR og antistof IgM, IgG Se SSI Diagnostik P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 64 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: hantavirus DNA/RNA, IgG og IgM antistof. Materiale: Blod (EDTA-glas) Helicobacter pylori antigen i fæces Princip: Påvisning af Helicobacter pylori antigen i fæces ved hjælp af ELISA teknik Indikation: Bl.a. øvre dyspepsi Udredt non-ulcus dyspepsi Patienter i nymedicinering med NSAID Børn med øvre dyspepsi når andre årsager er udelukket Kontrol efter Helicobacter pylori eradikationsbehandling (≥ 4 uger efter) Prøvemateriale: Fæces Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: helicobacter pylori antigen Materiale: faeces. Tidspunkt for prøvetagning: Utensilier: Tidligst 2 uger efter ophør af behandling med ulcusmidler, tidligst 4 uger efter ophør af eradikationsbehandling. Fæcesrør med prøvetagningsske og transporthylster Prøvemængde: 5-10 ml fæces Opbevaring: I køleskab 4-8 ºC i op til 2 døgn Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved transport med postvæsenet anvendes fors endelseshylster Svarafgivelse: Undersøgelsen udføres 2 gange om ugen og besvares samme dag Tolkning: Svar angives som: Helicobacter antigen påvist eller ikke påvist Bemærkninger: Undersøgelsen er på højde med andre standardmetoder til diagnostik af Helicobacter Pylori infektion, specielt urea breath test (pustetesten), og er bedre end antistofbestemmelse både mht. sensitivitet, specificitet og anvendelighed til kontrol efter gennemført eradikationsbehandling P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 65 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Helicobacter pylori antistoffer Princip: Påvisning af IgG antistoffer mod H. pylori ved hjælp af indirekte ELISA teknik. Indikation: Sjældent indiceret. Ved klinisk mistanke om infektion med H. pylori (øvre dyspepsi), hvor anden diagnostik ikke er mulig. Prøvemateriale: Blod (serum) uden tilsætning. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: helicobacter pylori IgG antistof Materiale: serum eller koagelblod Tidspunkt for prøvetagning: Så snart indikation foreligger. Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Minimum 0,6 ml blod (0,3 ml serum). Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på op til 7 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Positivt resultat ledsages af titer beregnet ud fra standardkurve. Tolkning: Negativt resultat tyder på, at patienten ikke er inficeret med H. pylori. Falsk negativ IgG ses dog hos ca. 10 %. Positiv IgG (titer >10 IE/ml) tyder på aktuel eller tidligere infektion. Bemærkninger: Behandlingseffekt vurderes bedst ud fra gastroskopi og biopsitagning til KMA med henblik på dyrkning af H. pylori eller ved påvisning af Helicobacter pylori antigen i fæces. Sidstnævnte undersøgelse har samme specificitet og sensitivitet som 14 C urea breath test. Hepatitis A virus (HAV) P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Princip: Godkendt af Gyldig fra Påvisning af IgM og total (IgM + IgG) antistoffer mod HAV med CLIA (Chemiluminescens immunoassay) Prøven analyseres primært for total antistoffer. Er denne positiv suppleres med IgM analyse) Indikation: Prøvemateriale: Udarbejdet af KMA-ALM-004 Side 66 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Klinisk mistanke om HAV-infektion. Bestemmelse af immunstatus efter vaccination. Blod (serum) uden tilsætning. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: hepatitis A virus antistof (immunstatus) Materiale: Serum eller koagelblod. Tidspunkt for prøvetagning: Diagnostisk undersøgelse ved sygdomsdebut. Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Minimum 1ml blod (0,5 ml serum). Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på op til 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Der foretages separat bestemmelse af totale antistoffer (IgG + IgM) mod HAV. Er denne undersøgelse negativ, eller er der kun forlangt immunstatus, foretages ikke yderligere. Er der positivt udfald for total HAV-antistoffer eller grænseværdi ved mistanke om akut HAVinfektion, foretages bestemmelse af IgM antistoffer mod HAV. Tolkning: HAV IgM ------------ HAV total Tolkning Negativ Ikke HAV-inficeret (eller i inkubationsfasen) > 1,1 Positiv Positiv ≥ 1,1 ≤ 0,9 Negativ Positiv Akut eller nylig overstået HAV-infektion Tidligere HAV-infektion eller vaccineret P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning < 0,9 Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 67 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 ≤ 0,9 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 68 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Hepatitis A virus (HAV) PCR Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på Hospital. Undersøgelse: hepatitis A virus DNA/RNA Materiale vælg: blod (EDTA-glas) eller fæces Hepatitis B virus (HBV) Princip: Påvisning af IgM og IgG antistoffer mod flere HBV antigener (HBc, HBe, HBs) samt påvisning af HBs og HBe antigen ved såkaldt CLIA (Chemiluminesens immunoassay) Alle prøver undersøges primært for HBsAG, Hbc total antistof og HBs Ab. Indikation: Klinisk mistanke om HBV-infektion. Undersøges primært for HBsAg, HBcAb og HbsAb, er en af disse analyser positive, suppleres med HBcIgM og HBeAg og HBeAb. Bestemmelse af immunstatus efter vaccination. Undersøges for HBs AB. Monitorering af behandling. Prøvemateriale: Blod (serum) uden tilsætning. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: hepatitis B (antigen- og antistofundersøgelse) Materiale: Serum eller koagelblod. Tidspunkt for prøvetagning: Diagnostisk undersøgelse ved sygdomsdebut. Se i øvrigt side 58 med kurverover HBV-infektionens forløb. Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 69 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Tolkning: Ved indikationen akut hepatitis vil det være mest rationelt at undersøge for IgM + IgG antistoffer mod HBc antigen (HBc total). Ved positivt udfald undersøges selektivt for IgM antistoffer mod HBc (HBc IgM), tilstedeværelsen af HBs antigen samt antistoffer mod HBs antigen (HBs total). Hvis patienten har positiv reaktion for HBc IgM, drejer det sig om en akut HBV infektion. Hvis der er negativ HBc IgM ved samtidig positiv HBc total antistoffer, har patienten en tidligere infektion, som enten er overstået (viser sig ved positiv reaktion for HBs antistoffer) eller blevet kronisk (positiv reaktion for HBs antigen). Isoleret forekomst af HBs antistoffer ses efter tidligere vaccination. Mulige kombinationer af resultater er således: HBc total Negativ Positiv Positiv Positiv Negativ HBc IgM HBs antigen ( I g ----- G ----Positiv +Positiv/negativ I Negativ Positiv g Negativ MNegativ Negativ ) Negativ HBs total (IgG+IgM) ----Negativ Negativ Positiv Positiv Tolkning Ikke HBV inficeret (eller i inkubationsfasen) Akut HBV infektion Kronisk HBV infektion Overstået HBV infektion Vaccinationseffekt Supplerende undersøgelse for HBe antigen og HBe antistoffer foretages, når HBs antigen er påvist i blod, idet HBe antigen og antistoffer mod HBe er relateret til infektiøsitet. Positiv reaktion for HBe antigen er udtryk for aktiv HBV infektion med høj smitsomhed. Positiv reaktion for HBe antistoffer er forbundet med lav smitterisiko, men giver ikke sikkerhed for fravær af smitterisiko. ”Serokonversion” m.h.t. HBe antigen (dvs. positivt resultat for HBe antigen konverteres til positivt resultat for HBe antistoffer) tyder på behandlingsrespons. Det serologiske forløb af Hepatitis B virusinfektioner kan ses i Sundhedsstyrelsens vejledning om hepatitis på adressen: Vejledning for forebyggelse mod hepatitis P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 70 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Fig. 2.1. Det serologiske forløb under det ukomplicerede forløb af hepatitis B infektion Figur 2.2. Udvikling af kronisk hepatitis B-infektion med vedvarende HBeAg positivitet Figur 2.3. Udvikling af kronisk hepatitis B-infektion med senere HBeAg til anti- HBe serokonversion P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 71 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Hepatitis B virus (HBV) subtype og resistensbestemmelse Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: hepatitis B virus (subtype og genotypisk resistensbestemmelse) Materiale: serum eller koagelblod eller blod (EDTA-glas) Hepatitis B virus (HBV), DNA (PCR) kvantitativ, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: hepatitis B virus DNA/RNA. Materiale: blod (EDTA-glas) Hepatitis C virus (HCV) Princip: Påvisning af IgG antistoffer mod HCV ved CLIA (chemiluminescens immunoassay) Indikation: Klinisk mistanke om HCV-infektion (akut hepatitis). Bestemmelse af immunstatus. Prøvemateriale: Blod (serum) uden tilsætning. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: hepatitis C virus IgG antistof. Materiale: serum eller koagelblod Tidspunkt for prøvetagning: Diagnostisk undersøgelse ved sygdomsdebut. For at udelukke HCVinfektion anbefales ny blodprøve udtaget 2 mdr. senere, hvis første prøve er negativ. Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Minimum 0,6 ml blod (0,3 ml serum). Opbevaring: I køleskab (4-8 C). P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 72 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Tolkning: Positivt (≥1,0) resultat kan betyde, at patienten har eller har haft HCV-infektion. En tredjedel til halvdelen clearer selv deres akutte HCV infektion. Resten bliver kroniske bærerer. Der kan også forekomme falsk positive resultater Positivt fund bør defor altid følges op med analyse af HCV RNA i blodet og henvisning til specialafdeling. Bemærkninger: IgG antistoffer mod HCV optræder først 1-2 mdr. efter smitte. Ved akut hepatitis kan antistofundersøgelse suppleres med påvisning af HCV RNA i blodet ved kvalitativ PCR. Hepatitis C virus genotypning, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: hepatitis C virus (genotypning) Materiale: blod (EDTA-glas) Hepatitis C virus, RNA (RT-PCR) kvantitativ, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: hepatitis C virus DNA/RNA (konfirmation) Materiale: blod (EDTA-glas) Hepatitis D virus PCR Se SSI Diagnostik Det er kun relevant at undersøge for hepatits D, hvis patienten er kendt kronisk infeiceret med hepatitis B Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: hepatitis D virus DNA/RNA. Materiale vælg: blod (EDTA-glas) eller serum eller koagelblod. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 73 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Hepatitis D virus antigen og antistof HDV Se SSI Diagnostik Det er kun relevant at undersøge for hepatits D, hvis patienten er kendt kronisk infeiceret med hepatitis B Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: hepatitis D virus antistof. Materiale: serum eller koagelblod Hepatitis E PCR Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: hepatitis E virus DNA/RNA Materiale: biopsi, blod(EDTA-glas), fæces eller serum eller koagelblod. Samt evt. lokalisation. Hepatitis E antistof IgM, IgG Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: hepatitis E virus antistof. Materiale: blod(EDTA-glas) eller serum eller koagelblod. Hepatitis G virus (GBV-C) RNA (RT-PCR) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: hepatitis G virus DNA/RNA. Materiale: blod (EDTA-glas) Herpes simplex virus (HSV) antistof P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Princip: Indikation: Prøvemateriale: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 74 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Påvisning af IgG antistoffer mod HSV ved CLIA (chemiluminescens immuno assay) teknik. Der undersøges for typespecifikke antistoffer (anti HSV. 1, anti HSV. 2) Mistanke om aktiv HSV infektion (se Tolkning). Bestemmelse af immunstatus. Blod (serum) uden tilsætning Undersøgelse for HSV encephalitis (intratekal antistofsyntese): Blod uden tilsætning samt spinalvæske. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: herpes simplex virus IgG antistof Materiale: serum eller koagelblod. Tidspunkt for prøvetagning: Diagnostisk undersøgelse ved sygdomsdebut. Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Lumbalpunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Minimum 0,6 ml blod (0,3 ml serum). 0,5–1 ml spinalvæske. Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Der må påregnes svartid på 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Resultatet angives som negativt eller positivt. Tolkning: Klinisk herpesinfektion (evt. positiv HSV PCR) kombineret med negativ HSV IgG antistofundersøgelse tyder på primærinfektion. Klinisk herpesinfektion kombineret med positiv HSV IgG antistofundersøgelse tyder på reaktivering (sekundær infektion). Har man kun antistoffer rettet mod en anden type HSV end aktuelt typisk genitalt udbrud er der tale om non-primær herpesinfektion Herpes simplex virus (HSV) DNA (typespecifik) Princip: Påvisning af HSV 1 og HSV 2 DNA med PCR-teknik. Indikation: P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 75 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Symptomer på primær eller sekundær herpeslæsion, herunder herpeskeratit. Pneumoni hos immunsupprimerede patienter, neonatal herpes. Prøvemateriale: Vesikelvæske eller podning fra læsioner på hud eller slimhinder. BAL eller mini-BAL. Fra nyfødte: Nasopharynxsug og podning fra conjunktiva. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: herpes simplex virus DNA/RNA Materiale: Bronkoalveolær lavage, slimhindepodning, trakealsekret eller vesikelvæske. Samt evt. lokalisation. Ved mistanke om encephalit eller menigits vælges undersøgelse: encephalit udredning (HSV + VZV) DNA/RNA. Se denne. Tidspunkt for prøvetagning: Tidligst muligt i sygdomsforløbet, svarende til det vesikulære eller Væskende stadie. Virus kan ikke påvises, når læsionerne er skorpedækkede eller indtørrede. Utensilier: eSwab til svælg- og vesikelpodning, trakealsekret og BAL. Prøvetagning: Bristede vesikler podes med speciel podepind eSwab, som presses eller rulles mod sårets bund. Podepinden anbringes i det medfølgende transportmediuim og afknækkes. Materiale fra de dybe luftveje tages i sterilt spidsglas og sendes uden tilsætning. Til encephalitudredning: se dette Opbevaring: I køleskab ved 4 - 8° C. Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: En til to hverdage efter modtagelsen. Positivt svar angives som HSV type 1 eller HSV type 2 påvist. Histoplasma antistof Se SSI Diagnostik P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 76 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: histoplasma antistof. Materiale: serum eller koagelblod HIV-1 genotypisk resistensbestemmelse Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: HIV-1 (dyrkning og resistens). Materiale: blod (EDTA-glas) HIV-1 genotypisk tropisme test Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: HIV-1 (genotypisk tropisme test) Materiale: blod (EDTA-glas) HIV-1 integrase resistens Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: HIV-1 (genotypisk integrase resistens) Materiale: blod (EDTA-glas) HIV-1 RNA (Viral load) kvantitativ (RT-PCR), (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: HIV RNA Materiale: blod (EDTA-glas) HIV-1 PCR (DNA) kvalitativ Se SSI Diagnostik P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 77 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: HIV DNA Materiale: blod (EDTA-glas) HIV 1 og HIV 2 (antigen- og antistofundersøgelse) Princip: Påvisning af IgG antistoffer mod HIV 1 og 2 samt HIV 1 p24 antigen med CLIA (Chelimluminescens immunoassay). Indikation: Mistanke om HIV-infektion. Prøvemateriale: Blod (serum) uden tilsætning. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: HIV 1 og HIV 2 (antigen- og antistofundersøgelse) Materiale: serum eller koagelblod. Tidspunkt for prøvetagning: Så snart mistanke om HIV-infektion opstår. Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Prøver på hospitalsindlagte patienter kan dog udføres samme dag efter telefonisk aftale Positivt svar afgives efter konfirmatorisk test. Positivt svar kan tage længere tid, da prøven skal sendes til konfirmatorisk test. Ved hospitalsindlagte patienter vil behandlingsansvarlig klinisk læge dog blive kontaktet telefonisk inden konfirmatorisk test foreligger. Tolkning: Negativt svar udelukker ikke HIV-infektion. Patienten kan være smittet uden endnu at have udviklet antistoffer mod HIV 1 eller HIV 2. Den samtidige detektion af p24 antigen mindsker dog varigheden af det diagnostiske ”vindue”, dvs. perioden med infektion inden påviselige antistoffer. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 78 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 HSV, (se Herpes simplex virus (HSV) antistof). Hudsvampe Princip: Påvisning af svampehyfer og -konidier ved PCR, mikroskopi og dyrkning. Malassezia furfur påvises alene ved mikroskopi. Indikation: Prøvemateriale: Mangeartede kliniske hudlæsioner fra anulære, skællede udslæt til inflammerende elemeter med pustuløs follikulit og keriondannelse, intertriginøs maceration og hårtab. Mistanke om Pityriasis versiocolor. Hudskæl, sårskorper, hår, skæg og negleskrab (rigeligt, makroskopisk synligt materiale). Prøvebestilling i Opus/Webreq: Under undersøgelse: vælg: hudsvampe (dermatofytter) DNA/RNA. Materiale vælg: Hudskrab, hårstrå eller negl. Samt evt. lokalisation. Tidspunkt for prøvetagning: Før start af antimykotisk behandling. Utensilier: Prøvemateriale af hudskæl samt hår og negleskrab fordeles i både Dermapak papkuvert i plastpose og Eppendorf centrifugerør. Både Dermapak og Eppendorf centrifugerør forsynes med mærkat fra samme rekvisition (se billederne). Eppendorfrøret lægges i plastposen med tilsvarende Dermapakprøve. Prøvetagning: Hud: Med skarpske eller skalpel skrabes rigeligt med hudskæl fra flere steder af randzonen. Ved sårskorper indsendes den del, der er nærmest rask hud. Hår og skæg: Angrebet hår trækkes ud med pincet. Evt. skæl fjernes fra håret, og hårstubbene under skællene sendes til undersøgelse. Negle: Der skrabes med skarpske fra over- og underside af neglen samt fra neglefalsen. Opbevaring: Stuetemperatur. Forsendelse: Med post i almindelig mærket kuvert. Dermapak (benyttes til Flouroscens-mikroskopi og dyrkning) P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 79 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Eppendorf-centrifugerør (benyttes til PCR) Rekvisition: Her anføres det anatomiske område materialet stammer fra, og om det er hår eller skrab fra hud eller negle. Svarafgivelse: På hverdage afgives svar på PCR og/eller mikroskopi samme dag prøven er modtaget eller senest dagen efter. Såfremt dyrkning foretages, kan svaret forventes 1-2 uger efter modtagelsen. Dog vil dyrkningstiden på prøver fra hår og hovedbund være op til 3 uger. Tolkning: Uoverensstemmelse mellem PCR, mikroskopi og dyrkningssvar kan skyldes, at metoderne har forskellig følsomhed, men også at der kan være utilstrækkeligt prøvemateriale til at alle undersøgelser kan udføres optimalt. Et positivt mikroskopisvar er altid signifikant, også ved negativt PCR resultat og/eller negativt dyrkningsresultat. Ligeledes regnes et positivt PCR svar også for signifikant, selv om der er negativt dyrkningsresultat. Ved uoverensstemmelser der giver behandlingsproblemer, foreslås ny prøvetagning eller kontakt til KMA. Bemærkninger: Ved positivt PCR resultat for T. rubrum udføres ikke yderligere undersøgelser. Ved positivt PCR resultat for dermatophyter generelt suppleres med dyrkning mhp identifikation. Ved negativt PCR resultat suppleres undersøgelsen med mikroskopi. Ved positiv mikroskopi suppleres med dyrkning, hvis mikroskopi er negativ stopper undersøgelsen her. Resistensbestemmelse af hudsvampe kan ikke udføres, idet der ikke findes en egnet teknik til dette. Ved negative resultater og fortsat mistanke om mykose, bør der tages en ny prøve, idet der henvises til korrekt prøvetagning. Human herpes virus 6A, 6B, 7 DNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: Human herpes virus 6A. Materiale: spinalvæske. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 80 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 81 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Human papillomavirus DNA/RNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: human papillomavirus DNA/RNA Materiale: vælg: biopsi, børstebiopsi eller podning. Samt evt. lokalisation. Influenza (A+B) virus DNA/RNA Se også luftvejsvirus Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: influenza(A+B) virus DNA/RNA. Materiale: Bronkialsekret - brokoskopisk ophentet, bronkoalveolær lavage (BAL), ekspektorat, nasopharynxsekret, slimhindepodning eller trakealsekret. Influenza C Se SSI Diagnostik Indikation: Infektion med influenza C sker typisk I småbarnsalderen. Der er kun indikation for denne undersøgelse, hos immunsuprimerede patienter med ukendt genese. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: luftvejsvirus DNA/RNA. Materiale: Bronkialsekret – bronkoskopisk ophentet, bronkoalveolær lavage (BAL), ekspektorat, nasopharynxsekret, slimhinde-podning eller trakealsekret. Under anamnesen ønskes: influenza C Influenza virus antistof, (se Luftvejspanel). Influenzavirus subtypning Se SSI Diagnostik Alle prøver positive for influenza A sendes altid til overvågning på SSI, hvor der udføres subtype-bestemmelse. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 82 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Influenzavirus, genotypisk resistens overfor neuramidasehæmmer Se SSI Diagnostik Kan sendes videre til SSI, ved positivt fund af influenza A og behandlingssvigt efter aftale med KMA. Itraconazol serum koncentration Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: itraconazol (koncentrationsmåling) Materiale: serum eller koagelblod I.v. kateterspids Princip: Indikation: Prøvemateriale: Semikvantitativ dyrkning af bakterier og svampe fra kateterspids. Exit-site infektion, evt. med flebit, tunnelinfektion langs tunneleret kateter og ”Pocket” infektion. Bakterilmi uden kendt fokus hos patient med i.v.kateter eller anden intravaskulær adgangsvej. Ca. 5 cm af den intravenøse kateterspids. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Dyrkning og resistens. Materiale: Kateterspids Lokalisation: Vælg katetertype. Utensilier: Sterilt spidsglas med skruelåg. Prøvetagning: Katetrets indstikssted desinficeres omhyggeligt med 2 x jodsprit 2,5 % SAD liniment, eller hos patienter med jodallergi 2 x klorhexidinsprit 0,5 % i alkohol 70 %. Katetret fjernes aseptisk, og ca. 5 cm af spidsen afklippes ned i sterilt spidsglas. Afklipningsstedet skal ligge mindst ½ cm inden for hudniveau. Ved transporttid over 1-2 timer forsynes spidsglasset med et par dråber sterilt vand for at undgå udtørring. Opbevaring: I køleskab (4-8º C). Forsendelse: Første ordinære transport. Der anvendes kølekasse. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 83 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Svarafgivelse: Ved vækst af bakterier eller svampe foretages kvantitering. Foreløbigt svar afgives 1 døgn efter modtagelse af prøven. Slutsvar afgives efter 2-5 døgn. Tolkning: Hvis kolonitallet er >15, anses kateterspidsen for koloniseret og som fokus ved fund af samme organisme i blodet. Er kolonitallet <15 er det sandsynligt, at kateterspidsen er kontamineret under fjernelsen. Bemærkninger: Værdien af dyrkning af andre katetertyper end intravenøse katetre er ikke dokumenteret. Japansk encephalit virus PCR og antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Japansk encephalitis virus DNA/RNA, IgG og IgM Materiale: koblet spinalvæske og serum JC-virus ultrasensitiv Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: JC polyomavirus DNA/RNA. Materiale: spinalvæske Kighoste (Bordetella pertussis) antistoffer Princip: Påvisning af IgG antistoffer mod Bordetella pertussis toxin med ELISA-teknik Indikation: Som for B. pertussis DNA, dvs. mistanke om kighoste, hvor der desuden foreligger negativt PCR resultat og varighed af hoste på mere end 2 uger. Undersøgelsen kan ikke anvendes til børn under 8 år. Prøvemateriale: Blod uden tilsætning. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Bordetella pertussis IgG antistof (immunstatus) P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 84 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Materiale: serum eller koagelblod. Tidspunkt for prøvetagning: Ved formodning om aktiv infektion med symptomvarighed over 2 uger. Utensilier: Tørglas eller gelglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Opbevaring: I køleskab (4-8º C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsnet anvendes transporthylster. Svarafgivelse: Indenfor 1 uge efter modtagelse. Tolkning: Svarafgivelse sker i internationale enheder U/ml med angivelse af positiv (≥ 100 IU/ml), negativ (< 40 IU/ml) eller grænseværdi ≥ 40 og < 100 U/ml). Positivt resultat indikerer akut B. pertussis infektion, grænseværdi er et usikkert resultat og bør følges op med ny prøve efter 7-10 dage. Kighoste (Bordetella pertussis) DNA Princip: Indikation: Prøvemateriale: Påvisning af B. pertussis DNA med PCR-teknik. Paroksysmatiske hosteanfald: Gøende hostestød efterfulgt af kigen. Børn under 6 måneder med apnø-episoder. Persisterende hoste >2 uger hos unge og voksne uden kendt lungesygdom. Podning fra nasopharynx. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Bordetella/parapertussis DNA/RNA Materiale: slimhindepodning Lokalisation: Næsesvælgrum (nasopharynx) Tidspunkt for P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 85 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 prøvetagning: Så tidligt som muligt i sygdomsforløbet og før antibiotisk behandling startes. Bakterietallet falder gradvis under forløbet. Utensilier: Tynd eSwab med transportmedium (blåt skruelåg) til alle aldersgrupper. Prøvetagning: Podepinden føres gennem næsen helt ind til nasopharynx og gnides mod bagvæggen. Podepinden afknækkes i transportmediet svarende til knækpunktet. Opbevaring: Stuetemperatur. Forsendelse: ESwab sendes i forsendelseshylster. Bør sendes samme dag prøven et taget. Svarafgivelse: 1-2 hverdage efter modtagelsen. Bemærkninger: Kighoste hos børn <2 år er anmeldelsespligtig. PCR kan pålideligt påvise kighostebakterier i ca. 4 uger efter symptomdebut. I senforløbet (dvs. efter 4 uger) af kighosteinfektion kan PCR blive negativ. Diagnosen kan da stilles med antistofpåvisning (se Bordetella pertussis antistoffer). Koncentrationsbestemmelse af antibiotika Måling af antibiotikakoncentrationen i patienters serum eller andre væsker kan være indiceret i følgende tilfælde: 1. Risiko for toksiske bivirkninger 2. Kritiske niveauer for effekt 3. Risiko for underbehandling I princippet kan koncentrationen af alle antibiotika måles i serum eller andre væsker, men der er sjældent indikation for måling af andre antibiotika end aminoglykosider og glycopeptider. Der er tradition for at måle laveste værdi, CMIN (dal-værdien), for to klasser af antibiotika, nemlig aminoglykosider (gentamicin, netilmicin og tobramycin) og glycopeptider (vancomycin), da begge kan måles ved en kemisk metode på få timer. Målingen er uafhængig af om der gives andre antibiotika samtidig. Prøver til antibiotika koncentrationsmålinger tages bedst om morgen (kl. 8.00), så vil der foreligge et svar om eftermiddagen. Eventuelt før næste dosering. Analysen foretages af Klinisk Biokemisk Afdeling. Prøvemateriale: Minimum 2 ml vene/arterie blod. Dog kan et kapillærglas med blod fra børn også anvendes. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 86 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Husk dato, klokkeslæt, og oplysninger om sidste dosisstørrelse samt tidspunkt. Analysen bestilles i labka. Aminoglykosider Initial dosering: Gentamicin: ~4-5 mg/kg Ved septisk shock kan dosis evt. øges til ~7 mg/kg Initial dosis gives per vægt, er uafhængig af nyrefunktion, men kun afhængig af patientens vandfase. Ved mistanke om svært usædvanlige væskeforhold, som f. eks. ved meget svær overvægt, ved cirrhose (+/- ascites) og lign., bør den initiale dosis ikke kun udregnes efter vægt. Aminoglykosider (gentamicin, netilmicin og tobramycin) er hurtigt baktericidt virkende, og særdeles egnede til kombination med f. eks. -lactamantibiotikum i den empiriske behandling af sepsis, f.eks i de første 1-3 døgn af behandlingen. Ved behandling med aminoglykosid ud over 3 døgn bør patienten revurderes mhp. infektionsfokus (herunder dyrkningsfund og resistensmønster) og S-koncentration måles mindst x 2 ugentlig. Effekten af aminoglykosider afhænger af, om man opnår en top-koncentration (CMAX), der er ca. 8 gange bakteriens MIC for aminoglykosider, ca. én gang i døgnet (PK-PDtabel på hjemmeside). Da de toksiske bivirkninger, nefro- og ototoksicitet, ses ved ophobning af aminoglykosider intracellulært i specifikke celler er det vigtigt, at behandlingsvarigheden med disse præparater er så kort som muligt, og at man ikke påbegynder en ny behandling før efter 28 dages pause. Man måler dal-værdier, CMIN, hvilket oplyser om ophobning af stofferne og dermed risiko for toksiske bivirkninger. Anbefalinger og justeringer: 1. Hvis ingen mistanke om væsentlig nyrepåvirkning er der ingen grund til koncentrationsmålinger hvis behandlingsperioden ikke overstiger 3 dage. Der gives samme dosis hver 24. time. 2. Ved påvirket nyrefunktion: blodprøve til koncentrationsmåling tages ca. 16 timer efter dosering, bedst om morgenen, svaret på denne måling forefindes inden næste dosis om eftermiddagen: S-gentamicin: < 0,5 µg/ml (efter ca. 16 timer): Samme dosis gives 24 timer efter sidste dosis. S-gentamicin: 0,5 - 1 µg/ml: Reducer dosis til ca. 50 %, som gives 24 timer efter sidste dosis. S-gentamicin: > 1 µg/ml: Seponer eller pauser behandlingen med aminoglykosider. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Vancomycin Initial dosering: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 87 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Vancomycin 1 g x 2, iv. dgl. Kan oftest gives uden at det er nødvendigt at måle serum koncentrationer. Vancomycin er et baktericidt virkende glycopeptid antibiotikum, der anvendes til behandling af infektioner forårsaget af Gram-positive bakterier. Effekten af glycopeptider er afhængig af at koncentrationen ikke falder under ca. 8 x MIC. Der er ingen korrelation mellem høje serum vancomycin værdier og nefrotoksiske bivirkninger. Måling af serum vancomycin udføres for at sikre patienten en optimal behandling, dvs. at serum vancomycin ikke falder til en værdi under 15 g/ml. Laveste værdi (dal-værdien) d.v.s. umiddelbart inden næste dosering, bør være 1520 g/ml. Anbefalinger og justeringer: 1. Måling af serum vancomycin foretages 2-3 gange ugentligt. Næste dosering af vancomycin bør ikke afvente svaret på målingen. 2. Dosis justeres efter måling af dalværdier ved mistanke om uhensigtsmæssigt niveau: S-vancomycin: >20 g/ml (efter ca. 12 timer), dosis reduceres, eller dosisintervallet forlænges. S-vancomycin: < 15 g/ml (efter ca. 12 timer), dosis øges, eller dosisintervallet forkortes. 3. Ved påvirket nyrefunktion, bør ikke anvendes flere nyretoksiske stoffer som f.eks. gentamicin, vancomycin og amphotericin B samtidig. Krim-Congovirus PCR og antistof IgM, IgG Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Crimean – Congo hemerrhagic fever virus DNA/RNA IgG og IgM antistof. Materiale: blod (EDTA-glas) eller serum eller koagelblod. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 88 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Legionella DNA Denne undersøgelse indgår i den samlede undersøgelse: pneumoniudredning (atypisk pneumoni) på luftvejssekreter, der er en samlet PCR undersøgelse for legionella, mycoplasma pneumoniae, chlamydophila pneumoniae og chlamydiai psitacci. Princip: Påvisning af DNA fra L. pneumophila (alle serogrupper) og andre Legionella arter ved hjælp af amplifikatons (genforstærknings) teknik (polymerase chain reaction, PCR). Indikation: Klinisk mistanke om Legionella infektion, herunder pneumoni hos: Immunsupprimeret patient Patient hjemvendt fra udlandsrejse Patienter, som ikke responderer på behanling med belaktamantibiotika. Prøvemateriale: Sekret fra de dybe luftveje, ekspektorat, trakealsekret eller bronkialskyllevæske (BAL). Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Pneumoni-udredning (atypisk pneumoni). Materiale: trachealsekret, ekspektorat, Bronkoalveolær lavge(BAL), bronkialsekret bronkoskopisk ophentet,. Tidspunkt for prøvetagning: Så tidligt i sygdomsforløbet som muligt, gerne inden antibiotisk behandling iværksættes. Utensilier: Ekspektorat dåse. Trakealsugesæt eller sterilt spidsglas. Prøvetagning: Som ved almindelig bakteriologisk undersøgelse. Prøvemængde: Mindst 1 ml sekret. Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Undersøgelsen udføres dagligt og 1 gang hver weekend. I sjældne tilfælde indeholder prøverne faktorer, der hæmmer amplifikationsprocessen. Resultatet besvares i så fald som: “Prøven ubedømmelig som følge af hæmning”. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Tolkning: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 89 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Sensitiviteten af undersøgelsen afhænger af prøvematerialets egnethed. Et negativt svar udelukker derfor ikke infektion, og hvis mistanken om Legionella infektion opretholdes, kan undersøgelsen gentages med optimal prøvetagningsteknik, trakealsug eller BAL. Bemærkninger: PCR analysen bør suppleres med undersøgelse for L. pneumophila antigen i urinen. Legionella infektion er anmeldelsespligtig. Legionella pneumophila antigen i urin (LUT) Princip: Påvisning af lipopolysakkarid (LPS) antigen fra L. pneumophila serogruppe 1 i urin med immunkromatografisk metode. Indikation: Klinisk mistanke om Legionellainfektion, herunder pneumoni hos immunsupprimeret patient eller hos patient efter nylig udlandsrejse. Prøvemateriale: Urin (gerne morgenurin). Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Legionella pneumophila antigen i urin (LUT). Materiale: Urin Tidspunkt for prøvetagning: Så tidligt som muligt i sygdomsforløbet, evt. gentaget efter 1-2 dage. Utensilier: Urinprøvesæt eller sterilt spidsglas. Prøvetagning: Midtstråleteknik. Prøvemængde: 1-5 ml urin. Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Prøven analyseres og besvares samme dag. I weekenden udføres analysen i dagarbejdstiden. Resultatet angives som negativt eller positivt. Tolkning: Legionella LPS antigen udskilles i urinen allerede få dage efter sygdomsdebut. Et negativt svar udelukker ikke Legionellainfektion, da analysen kun med sikkerhed påviser LPS fra L. pneumophila serogruppe 1 og ikke P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 90 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 andre serogrupper eller Legionella arter, som også kan give livstruende infektion. Ligeledes kan et negativt svar initialt i sygdomsforløbet skyldes forsinket antigenudskillelse, hvorfor undersøgelsen foreslås gentaget efter 1-2 dage, hvis mistanke om Legionellainfektion fastholdes. Bemærkninger: Undersøgelse for L. pneumophila antigen i urinen bør suppleres med undersøgelse af luftvejssekret med Legionella PCR som detekterer DNA fra alle serogrupper af L. pneumophila og alle Legionella arter. Bestilles som pneumoni-udredning (atypisk pneumoni) Legionella pneumophila antistof (LAT) Denne undersøgelse anbefales erstattet af en PCR-analyse, der er langt mere sensitiv og specifik ved akut sygdom. Send i stedet luftvejssekret til PCR for pneumoniudredning (atypisk-pneumoni) Princip: Påvisning af IgM antistoffer mod legionella pneumophila type 1 og type 3 med immunkromatografisk teknik Indikation: Langvarig luftvejssymptomer > 2 uger, hvor der er mistanke om legionella infektion Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: legionella pneumophila antistof(LAT). Materiale: serum eller koagelblod Tidspunkt for prøvetagning: Tolkning: Tidligst 2 uger efter mistanke om legionella infektion. Svaret udgives som positiv eller negative. Positive prøve tyder på nylig infektion med legionella pneumophile type 1 eller 3. Testen detekterer ikke antistoffer mod andre legionella typer. Ved negativ prøve og fortsat mistanke, kan prøven gentages efter en uge. Leishmania arter antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: leishmania antistof. Materiale: serum eller koagelblod Leptospira DNA/RNA Se SSI Diagnostik P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 91 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: leptospira DNA/RNA. Materiale: Blod (EDTA-glas), blod (bloddyrkningskolbe), spinalvæske eller urin – midtstråle. Leptospira DNA/RNA og dyrkning Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: leptospira DNA/RNA og dyrkning. Materiale: Blod (EDTA-glas), blod (bloddyrkningskolbe), spinalvæske eller urin – midtstråle. Leptospira antistof (Weil) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: leptospira antistof. Materiale: serum eller koagelblod Listeria monocytogenes antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: listeria monocytogenes antistof. Materiale: serum eller koagelblod Luftvejspanel (inf. virus, Adenovirus og RSV antistof) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: luftvejsvirus antistof. Materiale: Serum eller koagelblod. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 92 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 93 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Luftvejsvirus DNA/RNA Princip: Påvisning af respiratorisk syncytialvirus (RSV) RNA og influenza A og B med amplifikationsteknik (PCR). Udvidet undersøgelse ved særlig indikation (immunsuppression og/eller kronisk lungesygdom og/eller svær respirationsvejspåvirkning) (se prompter ved bestilling): Parainfluenzavirus (1-4), humant Metapneumovirus (hMPV), Rhino/enterovirus, Adenovirus, Bocavirus og Coronavirus (229E, HKU1, NL63 og OC43) med amplifikationsteknik (PCR). Indikation: RSV: Børn <2 år med hoste og hvæsende respiration, dyspnø og takypnø. Hyppigst vinter og tidligt forår. Immunsupprimerede patienter med nedre luftvejsinfektion. Influenza A og B: Pludselig temperaturstigning ledsaget af kulderystelser, muskelsmerter, hovedpine, hoste og forkølelsessymptomer. Hyppigst i vinterhalvåret. Udvidet undersøgelse: Alle de nævnte vira kan give øvre eller nedre luftvejsinfektion. Parainfluenzavirus ses hyppigst forår og efterår, hMPV i vinterhalvåret, Rhinovirus især sensommer og efterår. Alle respirationsvejsvirus kan give bronchioloitis hos børn. Adenovirus kan være årsag til svær pneumoni, især hos immunkompromitterede patienter, undertiden ledsaget af hepatitis. Adenovirus er desuden hyppig årsag til svær, ofte purulent, konjunktivit. Enterovirus kan udover luftvejsinfektion forsage meningitis, som især hos nyfødte og små børn kan være alvorlig. Prøvemateriale: Sekret fra nasopharynx, trakealsekret, BAL, svælgpodning. Ønskes udvidet undersøgelse, kan dette udføres på samme prøvemateriale. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: luftvejsvirus DNA/RNA. Materiale: bronkialsekret – bronkoskopisk ophentet, bronkoalveolær lavage(BAL), ekspektorat, nasopharynxsekret, slimhindepodning eller trakealsekret. Tidspunkt for prøvetagning: Så tidligt som muligt i den akutte sygdomsfase. Utensilier: Trakealsugesæt. Kateter til sugning nr. 6 eller 8. Sterilt, isotonisk saltvand. eSwab. Prøvetagning: Nasopharynxsug: P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 94 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Kateteret føres gennem næse til nederste del af pharynx. Der suges samtidig med, at katetret trækkes langsomt tilbage. Til slut suges et par ml sterilt fysiologisk saltvand igennem katetret. Trakealsug og BAL. Øjenpodning for Adenovirus: Der anvendes eSwab prøvetagningssæt. Prøvemængde: Ca. 2 ml. Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Kort transporttid bør sikres. Forsendelsen bør ske i kølekasse. Ved transport med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: RSV og influenza: Udføres alle ugens dage vinter og tidligt forår. Prøver ankommet til KMA inden kl. 10.00 besvares samme dag. I sommerhalvåret udføres ikke respirationsvirus i weekenden, og der ventes ikke til kl. 10 inden analsyen startes op. Øvrige virus: Udføres med 1-2 dages svartid. Tolkning: Positivt svar kan anvendes som: Beslutning om isolation af inficerede patienter (Influenza A/B og RSV). Ætiologisk udredning. Malaria Princip: Indikation: Prøvemateriale: Mikroskopisk undersøgelse for malariaparasitter. Immunkromatografisk undersøgelse. Patienter mistænkt for malaria skal henvises til prøvetagning på hospital. Den immunkromatiske undersøgelse kan ikke stå alene, og er kun et supplement til mikroskopien. Akut undersøgelse: Feber (kontinuerlig, intermitterende eller periodisk), hovedpine, influenzalignende symptomer, evt. diaré eller opkastninger, samt trombocytopeni efter rejse eller ophold i troperne, hvis det er mindre end 3 måneder siden man har forladt malariaområdet, og især hvis man har været i tropisk Afrika. Anæmi, trombocytopeni og splenomegali hos en person med etnisk baggrund fra lande med endemisk malaria. Perifert blod uden tilsætning (2 udstrygningspræparater og 2 dråbepræparater). Blodprøve i EDTA-glas. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 95 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: plasmodium (mikroskopi) (malaria?) Materiale: pakke (udstrygning og dråbepræparat, husk også EDTAblod) Tidspunkt for prøvetagning: Så snart diagnosen mistænkes, en gang dagligt i tre dage. Utensilier: Engangslancet. 4 støvfri, rensede objektglas uden ridser og fingeraftryk, med slebne kanter og matteret skrivefelt. Et objektglas med afskårne hjørner til udstrygning. Forsendelsesetui til objektglas. EDTA-glas, minimum 3 ml og blodprøvetagningsudstyr. Prøvetagning: Kvaliteten af præparaterne er helt afgørende for den mikroskopiske undersøgelse. Vejledningen skal derfor følges omhyggeligt. Blod tilsat antikoagulans eller koaguleret fuldblod er ikke egnet til malariamikroskopi. Rekvisionsnummer anføres med blyant i skrivefeltet på objektglasset. Der skal kun anvendes én rekvisition til de 4 præparater. Huden desinficeres og lufttørres inden punkturen. Med engangslancet prikkes i øreflippen eller lateralt på fingerens yderstykke mellem neglevold og pulpa. Hos små børn kan hælen også anvendes. Første bloddråbe aftørres. Der fremstilles herefter 2 dråbepræparater og 2 udstrygningspræparater: Dråbepræparater: Midt på 2 objektglas anbringes en bloddråbe, der straks spredes med lancetten til et kvadrat på ca. 1 cm2. Den spredte bloddråbe skal have en tykkelse, så trykt skrift lige netop kan læses igennem præparatet. Udstrygningspræparater: En lille blodmængde opsamles midt på den korte ende af et slebet objektglas med afskårne hjørner. Dette glas bringes i kontakt med præparatglasset i en vinkel på 45°, nær den matterede del og således at blodet befinder sig i vinklen mellem de to glas. Vent til dråben har bredt sig til de afskårne hjørner på ”udstrygnings”-objektglasset og udstryg herefter med en jævn, glidende bevægelse. Udstrygningspræparatet skal være tyndt og må ikke nå ud til objektglassets kanter. Blod i EDTA-glas tages på vanlig vis. Emballering: Både dråbe- og udstrygningspræparaterne tørres støvfrit i vandret stilling, før de anbringes i forsendelsesetui, og sendes samtidig med EDTA-glas med blod. Bemærkning: Rejseanamnese og evt. malariaprofylakse skal altid angives. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 96 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Opbevaring: Stuetemperatur. Forsendelse: Ved akut undersøgelse skal dette ske efter forudgående aftale med vagthavende læge på KMA. Præparaterne, inklusive EDTA-glas, sendes først når såvel udstrygnings- som dråbepræparaterne er helt tørre. Svarafgivelse: Akutte prøver samt positive fund besvares straks telefonisk til en autoriseret patientansvarlig medarbejder. Tolkning: Under behandlingen af falciparum malaria skal parasitæmigraden følges dagligt, til negative udstryg foreligger, og igen 7 dage efter behandlingsstart. Klinisk bedring og fald i parasitæmien indtræder sædvanligvis i løbet af 1.-3. behandlingsdøgn. Manglende fald i parasitæmigraden inden for de første døgn eller forekomst af trofozoitter på 7. dagen efter behandlingsstart er ensbetydende med behandlingsresistens, også selv om patienten er velbefindende. Derimod er forekomst af gametocytter på 7. dagen ikke udtryk for resistens. Parasitæmigraden skal ikke følges ved benign malaria, og disse patienter kan udskrives, så snart den kliniske tilstand tillader det. Ved infektion med P. vivax eller P. ovale følges behandlingen op med primakin til behandling af leverfasen i alt 14 dage. Fund af andre blodparasitter i dråbe- eller udstrygningspræparaterne (filaria, trypanosomer, babesia, leishmania) vil også blive meddelt. Hvis malariaundersøgelsen er negativ, og der fortsat er mistanke, må undersøgelsen gentages de 2 følgende dage. Maarburg Virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof Se SSI Diagnostik Ved mistanke om akut hæmorrhagisk feber, tages to prøver – en til serologi og en til PCR. Prøven til serologien opbevares under rette sikkerhedsforanstaltninger på hospitalsafdelinge på køl indtil resultatet på PCR analysen foreligger. Ved negativ PCR, indsendes denne prøve til test for overstået infektion. Prøven til PCR tilsættes blå inanktiverinsbuffer (se ovenfor) og sendes samme dag. Kan prøven ikke sendes samme dag, skal den opbevares op køl (2 – 8 C) og sendes hurtigst muligt. Her testes for akut Ebola hæmorrhagisk feber. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 97 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: Marburg virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof. Materiale: PCR: blod tilsat SSIs blå inaktiverinsmedie, kontakt vagthavende SSI tlf 3268 3460 eller 4033 6379. Serologi: serum koagel blod eller blod i EDTA glas MTB kompleks mikroskopi og PCR På formalifikserede præparater Se SSI Diagnostik Efter aftale med KMA Meningokok antistoffer (MAT) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: neisseria menningitidis antistof (MAT) Materiale: serum eller koagelblod Morbillivirus IgM og IgG antistof, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Morbilli virus IgM og IgG antistof (sygdom?) Materiale: Blod (EDTA-glas), blod (bloddyrkningskolbe), spinalvæske eller urin – midtstråle. Morbillivirus IgG antistof immunstatus, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: morbilli virus IgG antistof (immunstatus) Materiale: serum eller koagelblod P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 98 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Morbillivirus DNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: morbilli virus DNA/RNA (mæslinger) Materiale: Blod(EDTA-glas), serum eller koagelblod, slimhindepodning, spinalvæske eller urin. Samt evt. lokalisation. MRSA (meticillinresistente S. aureus) Princip: Undersøgelse for MRSA. Prøven opformeres i et særligt medium, inden udsåning på screeningsplader. Almindelige følsomme bakterier vil ikke blive påvist ved denne metode. Ønskes dyrkning for almindelige følsomme bakterier sendes podning til almindelig dyrkning og resistens Indikation: Se MRSA, hygiejnehåndbog på VIP-portalen Prøvemateriale: Podning fra næse, svælg, perineum. Hvis relevant endvidere podning fra sår/bylder, eksem eller psoriasis, intravenøse indstikssteder, perkutane sonder, drænsteder, Urin, hvis pt. Har urinvejskateter, trakealsekret hvis patienten er intuberet, stomi ved hudniveau. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Under undersøgelse: vælg: staphylococcus aureus (MRSA) (dyrkning) Materiale vælg: ekspektorat, podning – indstikssted, podning, sårpodning eller urin. Samt evt. lokalisation. Kan også bestilles som pakke vælg: MRSA-screening. Det er vigtigt for tolkning af svaret at feltet om antibiotika er udfyldt rigtigt. Tidspunkt for prøvetagning: Før antibiotisk behandling startes. Utensilier: eSwab med podepind. Prøvetagning: Næse: Podepinden føres gennem det yderste af næsen (cavum nasi) 0,5 – 1 cm op. Podepinden drejes rundt mod indersiden af begge næsefløje, 5-6 gange, samtidig med at et fast tryk opretholdes. Samme podepind bruges til begge næsebor: Svælg: Podepinden føres henover begge tonsiller med et let tryk P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 99 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Perineum: Podepinden føres henover perineum med et fast tryk. Det er vigtigt at der specifikt bedes om MRSA Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på op til 2-4 dage efter prøvens modtagelse i KMA For hospitalsindlagte patienter udføres en hurtigtest samme dag med PCR analyse. Patienter negative med hurtigtest for alle indsendte prøver kan afisoleres. Patienter positive for hurtigtest forbliver i isolation.. Tolkning: Svaret afgives som vækst/ikke vækst af MRSA. Patienter der har fået antibiotika indenfor den sidste uge inden prøvetagning kan udkomme med falsk negativt dyrkningssvar. Ved vækst af MRSA påføres svaret en resistensbestemmelse. Ved vækst af MRSA vil KMA kontakte rekvirenten med henblik på opfølgning. For hurtigtest svares MRSA påvist/ikke påvist. Der kan i enkelte tilfælde være uoverensstemmelse mellem hurtigtest og dyrkningssvar. I så fald vil dyrkningssvaret være gældende medmindre prøven er taget under antibiotisk behandling. Bemærkninger: Se i øvrigt MRSA, hygiejnehåndbogen, VIP portalen. Link til MRSA , hygiejnehåndbog og sundhedsstyrelsens MRSA vejledning Link til Sundhedsstyrelsens MRSA vejledning MRSA er anmeldelsespligtig. Hvis prøven er positiv for MRSA vil anmeldelsespapirer blive tilsendt fra KMA. For særligt udvalgte afdelinger kan undersøgelse for MRSA udføres med PCR teknik. Til denne analyse kræves podning med eSwab fra lokalisationer som beskrevet ovenfor. Resultat af analysen besvares som negativt, positiv eller ubedømmeligt og efterfølges altid af en dyrkning for MRSA. Ved ubedømmeligt resultat eller uoverensstemmelse mellem PCR resultat og dyrkning, som kan forekomme i sjældne tilfælde, må KMA kontaktes for at træffe nærmere aftale om infektionshygiejniske forholdsregler. MTB kompleks mikroskopi og PCR, (se Mycobacterium dyrkning og DNA/RNA (TB)). Mycobacterium tuberculosis (MTB) kompleks, rifampicin og isoniazid resistens (kan udføres på mikroskopipositive og andet ekspektorater) Se SSI Diagnostik P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 100 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Ønskes denne undersøgelse kontakt venligst KMA. Mycobacterium dyrkning og DNA/RNA (TB) Se SSI Diagnostik Bemærk: ved bestilling af denne prøve, vil der blive foretaget mikroskopi på SSI! Prøvebestilling i Opus/Webreq: Under undersøgelse: vælg: mycobacterium dyrkning og DNA/RNA (TB) Materiale: Vælg blandt de mulige Samt evt. lokalisation. Mycoplasma, (se Non-gonoroisk, non-klamydiel urethrit/cervicit udredning DNA/RNA) Mycoplasma pneumoniae IgG og IgM antistof, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) Denne undersøgelse anbefales erstattet af en PCR-analyse, der er langt mere sensitiv og specifik ved akut sygdom. Send i stedet halspodning i eSwab medie til komb. us. (chlamydophila- og mycoplasma pneumoniae DNA/RNA) eller luftvejssekret til PCR for pneumoni-udredning (atypisk- pneumonI). Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: mycoplasma pneumoniae IgG og IgM antistof (sygdom?) Materiale: Serum eller koagelblod. Mycoplasma pneumoniae DNA/Chlamydophila pneumoniae DNA Denne undersøgelse indgår også i den samlede undersøgelse: pneumoniudrening(atypisk pneumoni) på luftvejssekreter, der er en samlet PCR undersøgelse for legionella, mycoplasma pneumoniae, chlamydophila pneumoniae og chlamydiai psitacci. Princip: Indikation: Påvisning af Mycoplasma pneumoniae og chlamydophila pneumoniae DNA med PCR-teknik. Atypisk pneumoni. Langvarig hoste. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Prøvemateriale: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 101 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Podemateriale fra svælget Ekspektorat Trakealsekret BAL Nasopharynxsug Prøvebestilling i Opus/Webreq: Afhængig af materiale: Undersøgelse: komb. us. (Chlamydophila- og mycoplasma pneumoniae DNA/RNA) Materiale: slimhindepodning Lokalisation: Næsesvælgrum(nasopharynx) Eller Undersøgelse: Pneumoniudredning (atypisk pneumoni) Materiale: trachealsekret, ekspektorat, Bronkoalveolær lavge(BAL), bronkialsekret bronkoskopisk ophentet, Tidspunkt for prøvetagning: Tidligst muligt i sygdomsforløbet. Utensilier: eSwab. Ekspektoratdåse i forsendelsescontainer eller trakealsugesæt. Prøvetagning: Podepinden gnides mod slimhinden i svælget, optimalt nasopharynx, hvorefter den afknækkes i transportmediet svarende til knækpunktet. Ekspektorat, trakealsekret eller BAL tages som beskrevet eller BAL. Opbevaring: I køleskab ved 4-8° C. Forsendelse: eSwab fremsendes i forsendelseshylster. Ekspektorat fremsendes i dåse med tilsvarende forsendelsescontainer. Trakealsekret og BAL i sterilt spidsglas i transporthylster. Luftvejssekret fremsendes om muligt i kølekasse. Svarafgivelse: En til tre hverdage efter modtagelse af prøven. Bemærkninger: Infektion med Mycoplasma pneumoniae er næsten altid selvlimiterende. Relevant antibiotisk behandling (makrolid) kan dog afkorte sygdomsvarigheden og (måske) reducere smittespredning. Analysen udføres altid i kombination med chlamydophila pneumoniae DNA/RNA. Se denne. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 102 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Mykobakterier atypiske PCR (kan udføres på mikroskopipositive og ekspektorater) Se SSI Diagnostik Ønskes denne undersøgelse kontakt venligst KMA. Mæslinger, (se Morbillivirus DNA). Neisseria gonorrhoeae antistof, (se Gonokok antistof (GAT)). Neisseria gonorrhoeae (gonokokker)(dyrkning) Princip: Dyrkning for Neisseria gonorrhoeae samt følsomhedsbestemmelse. Indikation: Mænd: Udflåd fra urethra, dysuri Kvinder: Øget eller ændret vaginalt udflåd, smerter i bækkenregionen, dysuri, pletblødning og metrrhagia. Analudflåd eller perianale smerer (rektal gonoré). Øjenbetændelse hos nyfødte < 1 måned. Smitte – og kontaktopsporing (30-50 % asymptomatiske). Prøvemateriale: Podning fra urethra, svælg og rectum. Kvinder podes desuden fra endocervix. Nyfødte podes kun fra øjne. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Neisseria gonorrhoeae (gonokokker)(dyrkning) Materiale: slimhindepodning Vælg lokalisation. Tidspunkt for prøvetagning: Inden antibiotisk behandling påbegyndes. Utensilier: eSwab. Vatpind, hvid. Prøvetagning: Urethra: Der bør gå mindst 1 time efter sidste vandladning. Er der ikke synligt pus, indføres podepinden hos mænd 2-3 cm i urethra og roteres mod slimhinden i 5-10 sekunder. Hos kvinder trykkes P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 103 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 urethra mod symfysen, og der anvendes samme teknik. Svælg: Der podes fra tonsiller og pharynx posterior. Rectum: Podepinden føres 3 cm ind i analkanalen og roteres i 10 sekunder. Ved fækal kontamination kasseres podepinden, og proceduren gentages. Cervix: Podepinden føres 2 cm ind i cervikalkanalen og roteres forsigtigt fra side til side i 5-10 sekunder. Det er vigtigt, at podepinden ikke kommer i berøring med vaginalslimhinden. Øjne: Pus eksprimeres til mediale øjenkrog og opsamles på podepind, uden at huden berøres. Ved fravær af pus skrabes indersiden af nedre øjenlåg med en hvid podepind. Opbevaring: I køleskab (4-8° C). Forsendelse: Da bakterien er meget sart, skal prøven være KMA i hænde senest et døgn efter prøvetagning. Ved forsendelse med postvæsenet sendes i forsendelseshylster. Må ikke indsendes fredage eller op til en helligdag. Svarafgivelse: Foreløbigt svar afgives et døgn efter modtagelse af prøven. Slutsvar afgives efter 2-5 døgn. Prøver med vækst af gonokokker besvares telefonisk. Bemærkninger: Svælggonoré er sædvanlig asymptomatisk, men podning fra svælg hører med i udredningen og har behandlingsmæssig konsekvens. N. gonorrhoeae kan påvises samtidig med Chlamydia trachomatis ved genamplifikation. Dyrkning og resistensbestemmelse for N. gonorrhoeae er dog fortsat vigtig for at kunne vælge den rigtige behandling og bør altid foretages ved positivt resultat. Neisseria meningitidis antistof (MAT), (se Meningokok antistoffer). Non-gonorrhoisk, non-chlamydia urethrit/cervicit Princip: Påvisning af Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum og Ureaplasma parvum ved hjælp af PCR teknik Indikation: Symptomer på urethit eller cervicit, hvor undersøgelse for Chlamydia trachomatis og Neisseria gonorrhoea har været negativ. Uforklaret feber, pneumoni, sepsis eller meningitis hos spædbørn, især præmature, i neonatalperioden. Prøvemateriale: Podning fra cervix og/eller urethra i eSwab, first-void urin i spidsglas uden tilsætning, fra spædbørn luftvejssekret eller spinalvæske. Tidspunkt for prøvetagning: P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Utensilier: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 104 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Til cervix og urethrapodning anvendes eSwab prøvetagningssæt med podepind og transportmedium, til urin urinprøvetagningssæt og sterilt spidsglas, transporthylster. Til andre prøver (spædbørn): sterilt spidsglas til luftvejssekret eller spinalvæske. Prøvemængde: 5-10 mL urin Opbevaring: ved stuetemperatur Forsendelse: Ved stuetemperatur, ved postforsendelse anvendes transporthylster Svarafgivelse: Undersøgelsen udføres 2 x ugentlig og besvares samme dag. Tolkning: Svar angives som Mycoplasma genitalium (M. hominis, U. urealyticum, U. parvum) påvist eller ikke påvist. Fund af M. hominis, U. urealyticum eller U. parvum har tvivlsom betydning hos voksne, da op til 50 % af mænd og kvinder kan være koloniseret med disse bakterier i kønsvejene uden sygdom. Hos spædbørn med symptomer på infektion må fund af disse bakterier i luftvejssekret eller spinalvæske dog regnes for signifikant. Bemærkninger: Ved fund af M. genitalium suppleres undersøgelsen med en PCR metode til påvisning af makrolidresistens. Resultatet af denne undersøgelse har betydning for valg af behandling, idet resistens indebærer, at standard behandling med azithromycin er uvirksom. Alternativt behandlingsforslag er moxifloxacin 400 mg x 1 i 7 dage. Non-gonoroisk, non-chlamydia uretrit PCR (der skal laves krydshenvisning til Mycoplasma genitalium og Ureaplasma urealyticum) Princip: Undersøgelse for Mycoplasma genitalium og Ureaplasma urealyticum DNA med PCR teknik Indikation: Uretrit, cervicitis og underlivsbetændelse, hvor Neisseria gonorrhoeae og Chlamydia trachomatis er udelukket. Hos kvinder desuden ved opklaring af febrilia efter abort eller fødsel. Hos nyfødte (især for tidligt fødte) ved uforklaret pneumoni, meningitis eller sepsis. Prøvemateriale: Tidspunkt for prøvetagning: Utensilier: Urin eller podning Ved urinprøvetagning skal der helst være gået mindst to timer siden sidste vandladning. Til urin anvendes sterilt spidsglas uden tilsætning, til podninger eSwab. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 105 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvetagning: God kontakt mellem podepind og slimhinde er vigtig. Kvinder podes fra urethra eller cervix. Podepinden føres 3-4 cm ind i urethra/cervix og roteres adskillige gange. Podepinden knækkes af i transportmediet og låget skrues på. Urinprøvetagning foregår med opsamling af 10-15 ml first-catch urin uden afvaskning i steril beholder og forsendelse i sterilt spidsglas. Opbevaring: I køleskab indtil transport Forsendelse: Ved transport med postvæsenet anvendes forsendelseshylster Svarafgivelse: 2-4 dage efter modtagelse Tolkning: Svar afgives som M. genitalium eller U. urealyticum påvist, ikke påvist eller ubedømmelig. Påvisning af Ureaplasma hos voksne er i de fleste tilfælde udtryk for kolonisering og ikke infektion. Non-gonoroisk, non-klamydiel urethrit/cervicit udredning DNA/RNA Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: non-gonoroisk, non-klamydiel uretrit/cervicit udredning. Materiale: slimhindepodning eller urin. Samt evt. lokalisation. Norovirus, (se Gastroenteritis, diagnostik) Orm, æg og cyster, (se Gastroenteritis, diagnostik) Orm (identifikation) Princip: indsendelse af orm og larver fundet i afføring eller hudpustler til identifikation. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: orm (identifikation) Materiale: orm P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 106 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Parainfluenza virus antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på Hospital. Undersøgelse: Parainfluenza virus antistof Materiale: Serum eller koagelblod. Parechovirus, (se Enterovirus IgM). Parotitisvirus IgG antisstof (immunstatus), (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Parotitisvirus IgG antistof (immunstatus) Materiale: Serum eller koagelblod. Parotitisvirus IgM og IgG antistof, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: parotitisvirus IgM og IgG antistof (sygdom?) Materiale: serum eller koagelblod Parotitisvirus DNA/RNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: parotitisvirus DNA/RNA Materiale: blod (EDTA-glas), serum eller koagelblod, slimhindepodning, spinalvæske eller urin. Samt evt. lokalisation Parvovirus B-19 IgM og IgG antistof P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Princip: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 107 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Påvisning af IgM og IgG antistoffer mod parvovirus B-19 med CLIA chemoluminescens immunoassayhhv. Sandwich og indirekte CLIA. Indikation: Mistanke om akut infektion med parvovirus B-19 (erythema infectiosum/lussingesyge), specielt hos gravide med udslæt. Bestemmelse af immunstatus, fx hos gravide, der har været eksponeret for smitte. Udredning i forbindelse med artraligier og anæmitilstande. Akut hepatitis, hvor andre mere hyppige årsager ikke har kunnet påvises. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Prøvemateriale: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 108 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Blod (serum) uden tilsætning. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Parvovirus B19 IgM og IgG antistof (sygdom?) Materiale: serum eller koagelblod. Tidspunkt for prøvetagning: Så tidligt som muligt, evt. efterfulgt af ny undersøgelse efter 1-2 uger. Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Minimum 0,6 ml bl od (0,3 ml serum). Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på op til 7 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Tolkning: Parvovirus IgM Parvovirus IgG Negativ < 0,9 Negativ < 0,9 Positiv Negativ/positiv ≥ 1,1 Negativ < 0,9 Tolkning Ingen tidligere infektion (ikke immun) eller nyligt smittet Akut infektion <0,9/≥1,1 Positiv ≥ 1,1 Tidligere infektion (immun) Bemærkninger: Udslæt hos gravide bør altid medføre undersøgelse for både parvovirus og rubellavirus, også selvom der er påvist IgM antistoffer mod parvovirus, idet der kan være tale om enten krydsreaktion eller dobbeltinfektion. Hos immunsupprimerede med parvovirusinfektion kan antistofrespons mangle, og undersøgelse for antistoffer bør suppleres med parvovirus PCR undersøgelse af blod (Statens Serum Institut). P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 109 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Parvovirus DNA/RNA, (se Rigshospitalets prøvevejledning) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: parvovirus DNA/RNA Materiale: biopsi, fostervand, knoglemarv, plasma, spinalvæske eller serum eller koagelblod. Plasmodium (mikroskopi) (malaria), (se Malaria). Plasmodium arter (malaria) antistof IgM, IgG Kan kun bruges til at påvise mistanke om overstået eller tidligere malaria. Ved mistanke om aktuel malariasygdom bestilles altid ”plasmodium (mikroskopi) (malaria?)” Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Plasmodium antistof (malaria) Materiale: serum eller koagelblod. Pneumocystis jiroveci (tidl. carinii) DNA Princip: Påvisning af Pneumocystis jiroveci DNA med PCR-teknik Prøvemateriale: Bronkoalveolær lavage (BAL), evt. trachealskret Indikation: Tidspunkt for prøvetagning: Pneumoni hos patient med nedsat immunforsvar (fx ved neutropeni, efter organtransplantation, eller ved HIV infektion) Snarest efter at indikation er stillet Utensilier: Sterilt spidsglas Prøvetagning: Se under BAL (s. 23) Opbevaring: I køleskab (4-8 ºC) Forsendelse: Evt. i kølekasse Svarafgivelse: I løbet af 1-2 hverdage Tolkning: Et positivt svar er foreneligt med klinisk betydende infektion med P. jiroveci. Dog kan et positivt resultat også ses hos ca. 5 % af patienter med pneumoni af andre årsager. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 110 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på Hospital. Undersøgelse: vælg: pneumocystis jiroveci (tidl. Carinii) NA/RNA. Materiale: vælg: bronoalveolær lavage (BAL el. mini-BAL), ekspektorat-induceret, mundskyllevæske eller trakealsekret fra tube. Pneumokok antistof (23 valent) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: streptococcus pneumoniae antistof (23 valent) Materiale: serum eller koagelblod Pneumonok antistof (7/13 valent) Se SSI Diagnostik Opus/Webreq: Undersøgelse: streptococcus pneumoniae antistof (7/13 valent) Materiale: serum eller koagelblod Pneumoniudredning (atypisk pneumoni) Princip: Prøvemateriale: Indikation: pneumoniudredning(atypisk pneumoni) på luftvejssekreter, er en samlet PCR undersøgelse for legionella, mycoplasma pneumoniae, chlamydophila pneumoniae og chlamydiai psittaci. Sekret fra de dybe luftveje, ekspektorat, trakealsekret eller bronkialskyllevæske (BAL). Klinisk mistanke om infektion med Legionella i, mycoplasma pnemonia, chlamydophila pnemoniae eller chlamydia psitiaci, herunder pnemoni hos: Immunsupprimeret patient Patient hjemvendt fra udlandsrejse Patienter, som ikke responderer på behandling med batalaktamantibiotika. Se desuden indikation under de enkelte mikroorganismer. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 111 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Pneumoni-udredning (atypisk pneumoni). Materiale: trachealsekret, ekspektorat, Bronkoalveolær lavge(BAL), bronkialsekret bronkoskopisk ophentet,. Tidspunkt for prøvetagning: Så tidligt i sygdomsforløbet som muligt, gerne inden antibiotisk behandling iværksættes. Utensilier: Ekspektoratdåse Trakealsugesæt eller sterilt spidsglas. Prøvetagning: Som ved almindelig bakteriologisk undersøgelse. Prøvemængde: Mindst 1 ml sekret. Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Undersøgelsen udføres dagligt og 1 gang hver weekend. I sjældne tilfælde indeholder prøverne faktorer, der hæmmer amplifikationsprocessen. Resultatet besvares i så fald som: “Prøven ubedømmelig som følge af hæmning”. Tolkning: Sensitiviteten af undersøgelsen afhænger af prøvematerialets egnethed, specielt for legionella infektion. Et negativt svar udelukker derfor ikke infektion, og hvis der er fortsat er mistanken om atypisk pneumoni kan undersøgelsen gentages med optimal prøvetagningsteknik, trakealsug eller BAL. Podning fra cervix Princip: Indikation: Dyrkning for hæmolytiske streptokokker, Staphylococcus aureus, Listeria, Haemophilus influenzae og anaerobe bakterier. Dyrkning for Neisseria gonorrhoeae og påvisning af Chlamydia trachomatis (SDA) Gravide undersøges for hæmolytiske streptokokker, Listeria og Staphylococcus aureus. Ved angivet mistanke om intra uterin infektion, endometrit m.m., undersøges også for andre bakterier inklussiveanaerobebakterier. Udflåd, kløe og dyspareunia. Klinisk risiko for gruppe B streptokoksygdom (GBS). P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 112 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Tidligere fødsel af barn med invasiv GBS. GBS bakteriuri i aktuelle graviditet. Præterm fødsel, febrila (>38,5 C) intrapartum, lang-varig vandafgang > 24 timer. Mistanke om intrauterin infektion i forbindelse med graviditet. Mistanke om toksisk shock syndrom (TSS) for årsaget af stafylokokker eller streptokokker. Mistanke om endrometrit. o o o Prøvemateriale: Slimhindesekret fra cervikalkanalen. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Dyrkning og resistens. Materiale: Podning. Lokalisation: Cervix. Utensilier: eSwab. Prøvetagning: Materiale fra slimhinden opsamles i eSwab. Prøvemængde: Tilstrækkeligt til at fugte podepinden. Opbevaring: I køleskab (4-8° C). Forsendelse: Så vidt muligt i kølekasse. Der bør gå mindre end 1 døgn fra prøvetagning til modtagelsen i KMA, idet hurtig forsendelse er afgørende for et positivt dyrkningsresultat. Svarafgivelse: Foreløbigt svar afgives 1 døgn efter modtagelse af prøven. Slutsvar afgives efter 2-5 døgn. Tolkning: Fund af Staphylococcus aureus er ikke altid udtryk for betydende infektion. Bemærkninger: Der undersøges ikke for Gardnerella vaginalis, da denne bakterie ikke er den ætiologiske agens til bakteriel vaginose, men kun en indikator for ændring af vaginalfloraens sammensætning. Bakteriel vaginose påvises ved opfyldelsen af 3 ud af 4 kriterier: tyndt, hvidligt homogent vaginalsekret påvisning af clue cells vaginalsekret pH >4,5 frigivelse af fiskeagtig lugt ved pådrypning af 10 % KOH Ovennævnte undersøgelser udføres i egen klinik. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 113 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Poliovirus neutraliserende antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: poliovirus antistof Materiale: Serum eller koagelblod. Polyomavirus Ki, Wu Se SSI Diagnostik Bemærkninger: Klinisk betydning uafklaret. Denne undersøgelse er kun indiceret hos immunsupprimerede patienter, med lungesymptomer med ukendt ætiologi. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital Undersøgelse: KI-polymavirus DNA/RNA eller WU-polymavirus DNA/RNA. Materiale: nasopharynxsekret, slimhindepodning eller trakealsekret. Posaconazol serumkoncentration Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: posaconazol (koncentrationsmåling) Materiale: blod (EDTA-glas), plasma eller serum eller koagelblod Poxvirus DNA/RNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: poxvirus DNA/RNA. Materiale: biopsi, podning eller Vesikelvæske. Samt evt. lokalisation. PUT, (se Streptococcus pneumoniae (pneumokok) antigen i urin (PUT)). P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 114 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Q-feber, (se Coxiella burnetii antistof) Rabiesvirus antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: rabiesvirus antistof. Materiale: Serum eller koagelblod. Rickettsia arter DNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på Hospital. Undersøgelse: Rickettsia DNA/RNA. Materiale: biopsi eller blod(EDTA-glas) Rift Valley virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: rift valley virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof. Materiale: blod(EDTA-glas) eller serum eller koagelblod RSV, (se Luftvejspanel). Rotavirus, (se Gastroenteritis, diagnostik) Rubellavirus IgM og IgG antistof Princip: Påvisning af IgM og IgG antistoffer mod rubellavirus med CLIA (chemo luminescen simmunoassay). P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 115 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Indikation: Mistanke om akut rubellainfektion, fx ved udslæt hos gravide, eller kongenit rubellainfektion. Bestemmelse af immunstatus. Prøvemateriale: Blod (serum) uden tilsætning. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: rubella virus IgM og IgG antistof (sygdom?) Materiale: serum eller koagelblod. Tidspunkt for prøvetagning: Diagnostisk undersøgelse ved formodning om akut infektion: Første blodprøve ved sygdomsdebut, næste blodprøve ca. 1 uge senere. I særlige tilfælde derefter ny blodprøve med 2 ugers interval (se Tolkning). Kongenit rubellainfektion: En prøve udtaget snarest efter fødslen (navlesnorsblod eller blodprøve fra barnet selv). Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Minimum 1 ml blod (0,5 ml serum). Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på op til 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Tolkning: Positiv reaktion for rubella IgG antistoffer (titer >15 IE/ml): Patienten er immun over for rubellavirus. Negativ reaktion for rubella IgG antistoffer (titer <10 IU/ml): Patienten er ikke immun overfor rubellavirus. Hvis patienten er gravid, tilrådes ny blodprøve ved udgangen af 16. graviditetsuge, og vaccination tilrådes efter afsluttet graviditet. Under rubellaepidemi tilrådes serologisk kontrol hver anden uge indtil udgangen af 16. graviditetsuge. Positiv reaktion for rubella IgM antistoffer: Forenelig med akut rubellainfektion. IgM antistoffer kan sædvanligvis kun påvises 1-2 mdr. efter infektionen, men enkelte personer er vedvarende IgM positive. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 116 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Bemærkninger: Ved fund af IgM antistoffer mod rubellavirus hos en gravid sørger KMA for videresendelse af blodprøven til IgG antistof aviditetsundersøgelse på Statens Serum Institut til afklaring af, om det drejer sig om entidligere eller akut infektion.. Udslæt hos gravide bør altid medføre undersøgelse for både parvovirus og rubellavirus, også selvom der er påvist IgM antistoffer mod parvovirus, idet der kan være tale om enten krydsreaktion eller dobbeltinfektion. Rubellavirus RNA/DNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: rubella virus DNA/RNA. Materiale: plasma, urin, slimhindepodning, spinalvæske eller serum eller koagelblod. Salmonella antistof(enteritidis og typhimurium) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: salmonella antistof (enteritidis og typhimurium) Materiale: serum eller koagelblod. Sandfly Toscana virus PCR og antistof IgM, IgG Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Sandfly Toscana virus PCR og antistof IgM, IgG Materiale: blod (EDTA-glas), spinalvæske, serum eller koagelblod Schistosoma (bilharziose) antistof, (se Rigshospitalets prøvevejledning) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: sehistosoma antistof (billharzia) Materiale: serum eller koagelblod. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 117 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 118 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Schistosomiasis (Bilharziose), mikroskopi Princip: Mikroskopi af urin, faeces og rectum biopsier for Schistosoma æg efter opkoncentrering ved sedimentation. Mikroskopi af faeces og snipbiopsier fra rectum Indikation: Cystitis symptomer, hæmaturi, diaré, mavesmerter og træthed hos personer, der har badet eller haft kontakt med ferskvand i søer eller vandløb i det meste af Afrika, flere øer i det Indiske Ocean, Mellemøsten og det vestlige Asien. Prøvemateriale: Mindst 500 ml urin, evt. døgnurin. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: schistosoma (mikroskopi) Materiale: Urin. Tidspunkt for prøvetagning: Fra 4-8 uger efter kontakt med inficeret ferskvand. Udskillelsen af æg i urinen er størst i tidsrummet kl. 12.00 - 14.00 og øges ved fysisk anstrengelse. Utensilier: Plastflaske 1l. med skruelåg, faecesrør med forsendelsescontainer, spidsglas med fysiologisk saltvand. Prøvetagning: Urin: Lades i bækken, beholder eller direkte i transportflasken. De sidste dråber af urinen medtages, idet de ofte indeholder den største mængde æg. Faeces: Der sendes 3 prøver, som beskrevet under faeces for orm, æg og cyster Symptomer og geografisk anamnese skrives på rekvisitionen. Opbevaring: I køleskab (4-8° C) i højst 1 time. Hvis prøven ikke når KMA indenfor denne time, tilsættes 5 ml formalin. Forsendelse: Urin: Akut transport i kølekasse. Faeces: Som under orme, æg og cyster. Svarafgivelse: Slutsvar afgives 1-2 hverdage efter modtagelse af prøven. Tolkning: Schistosoma æg kan udskilles i årevis efter vellykket behandling Bemærkninger: Hvis der trods mistanke om schistosomiasis ikke findes æg, bør undersøgelsen gentages og evt. undersøges for Schistosoma IFAT antistoffer, som udføres på Statens Serum Institut. Sektionsmateriale P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 119 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Princip: Dyrkning og identifikation af isolerede bakterier og svampe. Indikation: Infektionsdiagnostisk udredning af dødsårsag. Prøvemateriale: Tidspunkt for prøvetagning: Hjerteblod og væv (lever, milt, nyrer og lunger) samt andre infektionssuspekte områder. Før udtagning af organblokken. Utensilier: Spidsglas med skruelåg, sterile. Ekspektoratdåser med forsendelsescontainere. Sterile pipetter. Prøvetagning: Prøverne udtages sterilt på følgende måde: Kropshulen åbnes efter huddesinfektion x 2 med jodsprit 2,5 % eller klorhexidinsprit 0,5 % og med anvendelse af sterile handsker og instrumenter. Inden udtagning af organblokken aspireres med sterile pipetter fra hjertet og relevante organer. Aspirat overføres til sterile spidsglas, og vævsprøver overføres til ekspektoratdåser. Lignende teknik anvendes ved fund af fokale infektionsprocesser. Prøvemængde: Spidsglas med aspireret materiale må højst fyldes halvt. Vævsprøver bør ikke være >1 x 1 cm. Opbevaring: I køleskab (4-8º C). Rekvisitionsseddel: Dødstidspunkt og klinisk problemstilling angives. Forsendelse: Fremsendes hurtigst muligt i kølekasse. Svarafgivelse: Foreløbigt svar afgives 1 døgn efter modtagelse af prøven. Slutsvar afgives efter 2-5 døgn. Den beskrevne teknik er den optimale til at undgå kontamination. Ved positive fund må tolkning ske i samråd med KMA. Tolkning: Serumkoncentration af antituberkuløse midler Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: anti-tuberkuløsemidler (koncentrationsmåling) Materiale: Serum eller koagelblod. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 120 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Serumkoncentration af svampemidler, (se Flucytosin serum koncentration, Posaconazol serumkoncentration, Voriconazol serumkoncentration eller Itraconazol serum koncentration). Staphylococcus areus (MRSA) (dyrkning), (se MRSA (meticillin-resistente S. aureus)). Spinalvæske og hjerneventrikelvæske Princip: Mikroskopi og aerob dyrkning med identifikation og følsomhedsbestemmelse af isolerede bakterier og svampe. Spinalvæsker og hjerneventrikelvæsker fra neurokirurgiske patienter dyrkes også anaerobt. Indikation: Klinisk meningit: Akut opstået hovedpine, påvirket almentilstand, nakke- og rygstivhed, bevidsthedssvækkelse, Kernigs symptom og hos spædbørn spændt frontanelle. Differentialdiagnostisk udredning ved meningoencefalit (Listeria, svmape, TB): Bevidsthedssvækkelse, sukken, smasken, pillen og kranienervepareser. Differentialdiagnostisk udredning ved klinisk encefalit: Akut opstået hovedpine, svimmelhed, kvalme, kramper, bevidsthedssvækkelse, symptomer fra temporal- og pandelap. Mistanke om cerebrospinal shuntinfektion eller kontrol af drænagevæsken for infektion. Mistanke om neuroborreliose. Prøvemateriale: Spinalvæske eller hjerneventrikelvæske. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Dyrkning og resistens. Materiale: Spinalvæske/Hjerneventrikelvæske. Tidspunkt for prøvetagning: Så hurtigt som muligt efter at mistanke om intracerebral infektion er opstået. Utensilier: Sterile spidsglas med skruelåg. Prøvetagning: Der udføres huddesinfektion med 2 x jodsprit 2,5 % SAD liniment eller hos patienter med jodallergi med klorhexidin 0,5 % i alkohol 70 %. Desinfektionsmidlerne skal tørre mellem påføringerne og inden punkturen. Hvis spinalvæsken er blodig, kasseres de første dråber. Herefter P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Udarbejdet af Prøvevejledning Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 121 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 opsamles væske til mikrobiologisk undersøgelse og dernæst til Klinisk Biokemisk Afdeling. Prøvemængde: 1-3 ml væske i ét glas til KMA. Opbevaring: I køleskab (4-8º C) indtil forsendelse. Rekvisition: Husk altid at angive på rekvisitionen, hvis indikationen er meningitis. Forsendelse: Det er den rekvirerende afdeling, der har ansvaret for den akutte forsendelse. Inden afsendelse kontaktes vagthavende mikrobiolog og leveringsstedet aftales. Rutinepunkturvæske sendes med første ordinære transport. Ved spinalvæsker fra patienter med formodet viral meningit eller klar spinalvæske afventes svar på celletal, differentialtælling, spinalprotein og spinalglukose. Såfremt disse svar tyder på viral ætiologi (se bemærkninger), kan spinalvæsken eventuelt sendes med første ordinære transport til KMA. Svarafgivelse: Svar på akut mikroskopisk undersøgelse meddeles straks telefonisk til en autoriseret patientansvarlig person, og fundets relevans og patientbehandling diskuteres. Vækst i såvel akutte som ikkeakutte prøver meddeles straks telefonisk. Prøver uden vækst besvares efter 3. døgn. Tolkning: Meningitisdiagnosen stilles på basis af kliniske symptomer, påvisning af pleocytose i spinalvæsken og evt. dyrkningsresultat Spinalvæskeforhold hos normale og patienter med meningitis sammenholdt med normale værdier Ætiologi Udseende Celletype, dominerende Celletal x 106/l Normale værdier 1. leveuge 2.-4. leveuge >5. leveuge + voksne Bakteriel Listeria Tuberkuløs Svampe Borrelia Enterovirus Herpes simplex virus Varicella zoster virus klar klar klar skyet/purulent Skyet klar/skyet klar/skyet klar/skyet klar/skyet klar/skyet klar/skyet variabel variabel mononukleær granulocytær blandet mononukleær mononukleær mononuklæer mononukleær mononukleær mononukleær <15 <10 <5 800-20.000 >200 100-400 >10 6-10.000 25-800 5-500 5-500 CSF-glukose Blod-glukose CSF protein 0.56-0.7 0-0.3 0.2-0.5 <0.45 0.3-0.45 0,4-0.6 0.4-0.6 0.4-0.7 0.4-0.7 0.15-0.5 0.8-5 0.5-3 0.8-4 >0.5 0.25-2.2 0.2-1.2 <0.5 <0.5 Tidligt i forløbet af bakteriel meningitis kan den dominerende celletype være mononukleær. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx g / L Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 122 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Bemærkninger: Hvis der ved lumbalpunkturen er mistanke om bakteriel meningitis bør der altid samtidig foretages bloddyrkning og dyrkning fra svælg samt andre potentielle foci og evt. foretages mikroskopi/dyrkning fra petekkier Spinalvæske til undersøgelse for borrelia Spinalvæske til undersøgelse for enterovirus Spinalvæske til undersøgelse for Herpes simplex virus Spinalvæske til undersøgelse for Variella zoster virus Spinalvæske til undersøgelse for TB skal sendes til KMA som videresender prøven tl Statens Serum Insitut. Ved klinisk biokemisk undersøgelsesresultat tydende på bakteriel meningitis (se ovenstående tabel) og negativt mikroskopi- og dyrkningsfund kan spinalvæsken undersøges med en multiplex PCR for DNA fra de tre hyppigst forekommende ætiologier (S. pneumoniae, N. meningitidis og H. influenzae). Streptococcus pneumoniae antistof (23 valent), (se Pneumokok antistof (23 valent)). Streptococcus pneumoniae antistof (7/13 valent), (se Pneumonok antistof (7/13 valent)). Streptococcus pneumoniae (pneumokok) antigen i urin (PUT) Princip: Påvisning af polysakkaridantigen fra S. pneumoniae i urin med immunkromatografisk metode. Indikation: Klinisk mistanke om pneumokokinfektion, fx hvor forudgående antibiotikabehandling af pneumoni, bakteriæmi eller meningitis kan have givet (falsk) negativt dyrkningsresultat Prøvemateriale: Urin Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: streptococcus pneumoniae antigen i urin(PUT) Materiale: Urin. Tidspunkt for prøvetagning: Så tidligt som muligt i sygdomsforløbet, evt. gentaget efter 1-2 dage. Utensilier: Urinprøvesæt eller sterilt spidsglas. Prøvetagning: Midtstråleteknik. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 123 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvemængde: 1-5 ml urin. Opbevaring: I køleskab (4-8º C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Prøven analyseres og besvares samme dag. I weekenden udføres analysen i dagarbejdstiden. Resultatet angives som negativt eller positivt. Tolkning: Negativt resultat udelukker ikke infektion med pneumokokker. Det kan være nødvendigt med gentagne urinantigen bestemmelser, da den udskilte antigenmængde varierer i sygdomsforløbet. Undersøgelsen er ikke egnet til børn (1-15 år), da alene kolonisering i luftvejene med S. pneumoniae også kan give positivt resultat i denne aldersgruppe. Bemærkninger: Undersøgelsen bør altid forudgås af eller suppleres med mikroskopi og dyrkning af relevant prøvemateriale (luftvejssekret, blod eller spinalvæske). Se endvidere under spinalvæske (påvisning af DNA fra S. pneumoniae, N. meningitidis og H. influenzae med PCR). Strongyloides antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: strongyloides antistof. Materiale: Serum eller koagelblod. Strongyloides dyrkning, (se Rigshospitalets prøvevejledning) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: strongloides (dyrkning) Materiale: Faeces Syfilisantistoffer i spinalvæske, (se CSV-syfilisantistoffer). Syfilisantistoffer intrathekal syntese Se SSI Diagnostik P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 124 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 125 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: treponema pallidum antistof (intrathekal test) Materiale: Pakke koblet spinalvæske og serum. Svælgpodning for ß-hæmolytiske streptokokker Princip: Indikation: Prøvemateriale: Dyrkning for β-hæmolytiske streptokokker. Akut tonsillit, faryngit: Tonsiller med rødme og/eller belægninger, synkesmerter og feber. Små børn med protraheret øvre luftvejsinfektion med rhinorrhea, suppurative konplikationer og subfebrilia. Smitteopsporing ved recidiverende familieepidemier. Podning fra tonsiller og ved tidligere tonsillektomi fra kryptlejer. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Dyrkning og resistens. Materiale: podning. Lokalisation: Svælg Tidspunkt for prøvetagning: Før antibiotisk behandling startes. Utensilier: eSwab. Prøvetagning: Podepinden gnides fast over begge tonsiller, så eventuelle belægninger tages med. Det er vigtigt kun at berøre det slimhindeområde, der skal undersøges. Opbevaring: I køleskab (4-8º C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anbringes eSwab i forsendelseshylster. Svarafgivelse: Slutsvar afgives 1-2 døgn efter modtagelse af prøven. Tolkning: Hverken pneumokokker, hæmofilusarter, andre Gram-negative stave eller stafylokokker giver anledning til halsbetændelse. Bemærkninger: Af de hæmolytiske streptokokker er kun gruppe A (Streptococcus pyogenes) en sikker årsag til tonsilfaryngit. Gruppe C og G er enkelte gange isoleret fra epidemisk optræden af faryngit, hvor anden ætiologi ikke har kunnet påvises. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 126 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Svælgpodning, andet Princip: Indikation: Undersøgelse for Haemophilus influenzae, type b (epiglottit), Corynebacterium diphtheriae (difteri), Neisseria meningitidis (meningokoksygdom) vil kun ske, hvis indikationen er anført på rekvisitionen. Symptomer på epiglottit. Symptomer på difteri (faryngit med grålige, fastsiddende membraner, ødem af svælg og hals, svælgparalyse). Meningokoksygdom. Prøvemateriale: Podning fra pharynx og tonsiller. Tidspunkt for prøvetagning: Før antibiotisk behandling startes. Utensilier: eSwab. Prøvetagning: Podepinden gnides fast over tonsillerne, så eventuelle belægninger tages med. Det er vigtigt kun at berøre det slimhindeområde, der skal undersøges. Ved kliniske tegn på epiglottitis må prøvetagning først foregå, når der er sikret frie luftveje. Opbevaring: I køleskab (4-8º C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anbringes eSwab i forsendelseshylster. Svarafgivelse: Foreløbigt svar afgives skriftligt 1 døgn efter modtagelse af prøven, dog kun relevante positive svar til praksis. Slutsvar efter 2-5 døgn. Bemærkninger: Undersøgelse for meticillinresistente Staphylococcus aureus (MRSA). Se Hygiejnehåndbogen på VIP-portalen. Ønskes undersøgelse for kighostebakterier, indsendes særlig prøve og rekvisition. Ønskes undersøgelse for gonokokker, indsendes særlig prøve og rekvisition. Yderligere undersøgelse for bakterier og svampe kan komme på tale hos svært immunosupprimerede patienter og hos patienter, hvor P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 127 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 der er mistanke om Lemierre’s syndrom (nekrobacillose) forårsaget af Fusobacterium necrophorum. Taenia solium antistof (cysticercosis) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: taenia solium antistof (cysticercosis) Materiale: Serum eller koagelblod. Tarmpatogene bakterier, inklusive Clostridium difficile, (se Gastroenteritis, diagnostik) TBE antistof, (se Tick born encephalitis (TBE) IgG og IgM). TBE DNA/RNA, (se Tick born encephalitis (TBE) DNA/RNA). Tetanustoksin antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: tetanustoksin antistof. Materiale: Serum eller koagelblod. Tick born encephalitis (TBE) IgG og IgM Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: tick born encephalitis virus (TBE) IgG og IgM Materiale: serum eller koagelblod eller spinalvæske. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 128 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Tick born encephalitis (TBE) DNA/RNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: tick bone encephalitis virus (TBE) DNA/RNA Materiale: spinalvæske eller blod(EDTA-glas) Toscana virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof. Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestille på hospital. Undersøgelse: toscana virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof. Materiale: blod (EDTA-glas), spinalvæske eller serum eller koagelblod Toxocara antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: toxocara antistof Materiale: Serum eller koagelblod. Toxoplasma gondii IgG og IgM antistof Princip: Indikation: Prøvemateriale: Påvisning af IgM og IgG antistoffer mod T. gondii med CLIA (Chemoluminescens immunoassay). Bestemmelse af immunstatus. Mistanke om kongenit infektion eller reaktivering, fx ved chorioretinitis hos børn og voksne. Mistanke recidiv hos immunsupprimeret patient. Mistanke om akut toxoplasmose. Blod (serum) uden tilsætning. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: toxoplasma gondii IgG og IgM antistof (sygdom?) Materiale: Serum eller koagelblod. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Tidspunkt for prøvetagning: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 129 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Så tidligt som muligt efter at indikationen er stillet. Ved formodning om akut infektion under graviditet yderligere en prøve udtaget 2 – 3 uger efter. Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Minimum 1 ml blod (0,5 ml serum). Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på op til 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Svaret angives som negativt, tvivlsomt positivt eller positivt for IgM og IgG. Tolkning: Positivt resultat for IgM antistoffer ( ≥ 8 AU/ml) tyder på akut infektion med T. gondii. IgM kan dog påvises i op til 12 mdr. efter infektion. Hvis prøven alene har positivt resultat for IgG (≥ 8,8 AU/ml) drejer det sig om en tidligere infektion. Bemærkninger: I tilfælde af positiv IgG og IgM hos en gravid vil KMA desuden foretage aviditetsbestemmelse af IgG antistof, hvorved smitte for mere eller mindre end 4 mdr. siden kan fastlægges. Ved behov for supplerende undersøgelser på Statens Serum Institut (udredning af smittetidspunkt ved positiv IgM hos en gravid) sørger KMA for at videresende prøven. Toxoplasma gondii (nyfødte) Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestille på hospital. Undersøgelse: vælg: toxoplasma gondii IgG og IgM antistof. Til undersøgelse for kongenit infektion, kræves der en serumprøve fra både mor og barn. Under kliniske oplysninger skrives: udredning for kongenit infektion. Mærk prøven med personnr. og samme prøvenr. fra mor og barn. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 130 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Toxoplasma gondii DNA/RNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: toxoplasma gondii DNA/RNA. Materiale: fostervand eller spinalvæske. Treponema pallidum antistoffer, intrathekaltest, (se Syfilisantistoffer intrathekal syntese). Treponema pallidum antistoffer i spinalvæske, (se CSV-syfilisantistoffer). Treponema pallidum antistoffer (syfilis screening) Princip: Påvisning af antistoffer mod T. pallidum med Chemo luminescens immunoassay (CLIA) teknik. Analysen er en treponemaltest. Indikationer: Klinisk mistanke om syfilis, herunder kongenit infektion, eksposition for syfilis, risikoadfærd samt forebyggelse af medfødt syfilis ved undersøgelser af gravide risikopatienter. Hvis patienten screenes i forbindelse med graviditet, sendes prøven til Blodbanken. Prøvemateriale: Blod (serum) uden tilsætning. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: treponema pallidum antistof(syfilis) Materiale: Serum eller koagelblod. Tidspunkt for prøvetagning: Så tidligt som muligt efter indikationen er stillet. Evt. efterfølgende prøver med 1-4 ugers interval. Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Minimum 0,6 ml blod (0,3 ml serum). P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Rekvisitionsseddel: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 131 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Det er vigtigt, at indikationen for undersøgelsen anføres, og at man oplyser, om pt. evt. tidligere har fået konstateret syfilis. Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på op til 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Et negativt fund besvares umiddelbart. Ved positiv eller tvivlsom positiv reaktion indsender KMA prøven til konfirmatorisk analyse på KMA, Hvidovre Hospital og besvares endeligt, når svar foreligger herfra. Tolkning: Positivt fund tyder på aktuel eller tidligere syfilis. CLIA testen kan være negativ i de første sygdomsuger, hvorfor man må gentage undersøgelsen ved negativt resultat, hvis klinisk mistanke om syfilis foreligger. Bemærkninger: Visse autoimmunsygdomme og infektioner med andre (tropiske) treponema-arter (T. pertenue (forårsager yaws), T. carateum (forårsager pinta)) kan give falsk positive reaktioner. Treponema pallidum DNA/RNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: treponema pallidum DNA/RNA. Materiale: biopsi eller sårpodning. Samt lokalisation. Trichinella spiralis antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: trichinella spiralis antistof. Materiale: Serum eller koagelblod. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 132 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Trofozoitter af Giardia intestinalis i duodenalsekret Princip: Direkte mikroskopi for trofozoitstadiet af E. histolytica eller G. intestinalis. Foruden mikroskopi udføres PCR for Giardia, cryptosporidier og entamoeba histolytica. Indikation: Prøvemateriale: Slim og blod i afføringen af mere end 5 dags varighed efter rejse eller ophold i troperne. Slim og blod i afføringen hos et barn adopteret fra lande med høj incidens af E. histolytica (incl. Østeuropa). Diaré og dårlig trivsel hos et barn, hvor PCR af fæces ikke har givet diagnosen (Giardia). Tynd, frisk fæces med blod og/eller slim, pus fra tarmulcerationer (E. histolytica) eller duodenalsekret (G. intestinalis). Der er ikke indikation for at undersøge formet fæces. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: tarmpatogene parasitter DNA/RNA. Materiale: Aspirat (opsug) Lokalisation: Duodenum Tidspunkt for prøvetagning: Om formiddagen på hverdage. Utensilier: Fæcesrør med forsendelsescontainer. Termobeholder (udlånes af KMA). Prøvetagning: KMA skal underrettes telefonisk, inden prøven tages. Prøven udføres kun på hverdage i dagåbningstiden. Prøvematerialet anbringes i fæcesrøret, som lukkes tæt og anbringes i termobeholderen, som i forvejen er fyldt halvt op med 37° C varmt vand. For at undgå smitte til andre personer må fæcesrøret ikke forurenes på ydersiden, og efter påfyldningen skal skruelåget skrues hårdt til, så lækage under transport undgås. Prøvemængde: Fæcesrøret må højst fyldes 1/3. Opbevaring: Prøven skal fremsendes straks og må ikke opbevares. Forsendelse: Prøven skal transporteres ved 37° C i termobeholder, som kan lånes på KMA. Svarafgivelse: Positivt svar afgives straks telefonisk til en autoriseret patientansvarlig medarbejder, skriftligt svar følger. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 133 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Bemærkninger: Symptomerne ved colitis ulcerosa og akut amøbedysenteri kan ligne hinanden så meget, at en patient med en mulig eksposition altid bør undersøges for infektion med E. histolytica, inden der startes behandling med glukokortikoider. Tropheryma whipplei DNA/RNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: tropheryma whipplei DNA/RNA. Materiale: vævstype. Trypanosoma antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: trypanosoma antistof Materiale. Serum eller koagelblod. Ureaplasma ureayticum, (se Non-gonoroisk, non-klamydiel urethrit/cervicit udredning DNA/RNA). Urin Princip: Indikation: Kvantitativ dyrkning med identifikation og følsomhedsbestemmelse af bakterier og svampe. Recidiverende cystit hos kvinder. Pyleonefrit. Urinvejsinfektion hos børn og mænd. Kompliceret urinvejsinfektion med kateter, sten, refluks og >100 ml residualurin. Screening for asymptomatiske bakteriuri ved anvasive urologiske indgreb, under graviditet, hos børn i manglende trivsel eller efter total fjernelse af et permanent urinkateter. Dette bør ske ved dyrkning, da urinstiks (nitrittest kombineret med leukocytesterasetest) kan være falsk negativ. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 134 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Prøvemateriale: Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 135 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Midtstråleurin. Urin udtaget ved suprapubisk blærepunktur. Praktiserende læger anbefales semikvantitativ dyrkning på dipslide, eller lignende, og indsendelse af borsyreglas ved positivt dyrkningsresultat. Dyrkning af kateterurin er sædvanligvis kun indiceret, hvis patienten er febril, hvor også bloddyrkning er indiceret. En undtagelse er dog svært neutropene eller immuninkompetente patienter. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Dyrkning og resistens. Materiale: Urin – midtstråle Urin – engangskaterisation (ren teknik) Urin – suprapubisk punktur Urin fra J-J kateter Urin fra nefrpstomikateter/nyrepelvis Urin fra nyrepelvis Urin fra ureterkateter Urin fra kateter a demeure Urin (art angives i annamnese feltet i fri tekst) Urine fra kolbe/bækken/pose/uridom (anbefales ikke) Tidspunkt for prøvetagning: Morgenurin eller tidligst (2) - 4 timer efter sidste vandladning. Utensilier: Urinprøvesæt. Udvidet undersøgelse af uriner fra praktiserende læger: Borsyreglas (Urin Monovette). Bestilles hos KMA. Kateterurin: Sterilt spidsglas med skruelåg, fra praksis dog i borsyreglas. Prøvetagning: Indersiden af urinprøvesættets bæger må ikke berøres. Kvinder: Fugtighedsservietten anvendes til grundig afvaskning af skamlæber og skedeindgang. Lidt af urinen lades i toilettet. Herefter lades urinen i bægeret, indtil det er ca. halvfuldt. Bægerets indhold hældes i reagensglasset, som fyldes halvt. Hætten skrues på igen. Børn, der ikke kan lade vandet på opfordring: Urinen opsamles i plastpose, der hæftes på barnet, efter at genitalia er vasket med rent vand. Posen tilses hver 10. minut for at kontrollere, om der er urin i posen. Mænd: Forhuden føres tilbage, og urinrørsmundingen afvaskes grundigt med fugtighedsservietten. Lidt af urinen lades i toilettet. Herefter lades urinen i bægeret, indtil det er ca. halvfuldt. Bægerets P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 136 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 indhold hældes i reagensglasset, som fyldes halvt, og hætten skrues på igen. Prøvemængde: 3-5 ml. Det sterile spidsglas må højst fyldes halvt. Borsyreglas 10 ml. Opbevaring: Prøven sættes straks i køleskab (4-8° C) i max. 24 timer. Forsendelse: I kølekasse. Uafkølet urin fremsendt via postvæsenet undersøges ikke på grund af risiko for sekundær bakteriel opformering under transporten. Borsyreglas kan dog fremsendes med postvæsenet. Svarafgivelse: Foreløbigt svar afgives oftest 1 døgn efter modtagelse af prøven. Slutsvar efter 2-5 døgn. Tolkning: Alle positive fund ved dyrkning af sterilt udtaget urin er signifikant. Signifikansniveau for andre opsamlingsmåder er afhængig af prøvens art og kvalitet samt af patientens diagnose. Dette vil fremgå af det afgivne svar. Bemærkninger: Hos yngre kvinder kan det være vanskeligt at skelne cystit fra vaginit og urogenital klamydiainfektion. I første trimester bør gravide kvinder udredes for asymptomatisk bakteriuri, der øger risikoen for akut pyelonefrit og for tidlig fødsel. Påvises bakteriuri i første trimester, skal urinen kontroldyrkes en gang månedlig under resten af graviditeten. Urin til undersøgelse for TB skal sendes til KMA som videresender prøven til Statens Serum Institut. (Rekvireres som undersøgelse: Mycobacterium dyrkning og DNA/RNA (TB), Materiale: Urin – midtstråle) Urogenitiale mycoplasmer, (se Non-gonoroisk, non-klamydiel urethrit/cervicit udredning DNA/RNA). Vaginalpodning for gær Princip: Dyrkning for gær. Ønskes undersøgt for Trichomonas vaginalis skal det anføres på rekvisitionen Indikation: Udflåd, kløe og dyspareunia. Prøvemateriale: Slimhindesekret fra vagina. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 137 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Dyrkning gærsvampe (Trichomonas vaginalis) Materiale: Slimhindepodning Lokalisation: Vagina Utensilier: eSwab. Prøvetagning: Materiale fra slimhinden opsamles i eSwab. Prøvemængde: Tilstrækkeligt til at fugte podepinden. Opbevaring: Stuetemperatur. Forsendelse: Ved forsendelse med postvæsenet anbringes eSwab i forsendelsesrør. Svarafgivelse: Slutsvar afgives 2-4 hverdage efter modtagelse af prøven. Bemærkninger: Gær og T. vaginalis kan også påvises ved direkte mikroskopi af vaginalsekret. Der undersøges ikke for Gardnerella vaginalis, da dyrkning er uspecifik og ikke får behandlingsmæssige konsekvenser. Bakteriel vaginose påvises ved opfyldelsen af 3 ud af 4 kriterier: tyndt, hvidligt homogent vaginalsekret påvisning af clue cells vaginalsekret pH >4.5 frigivelse af fiskeagtig lugt ved pådrypning af 10 % KOH Ovennævnte undersøgelser udføres i egen klinik. Varicella zoster virus (VZV) antistoffer Princip: Påvisning af IgG antistoffer mod VZV med hjælp af Chemoluminescens immuno assay (CLIA) teknik. Indikation: Bestemmelse af immunstatus. For gravide med ukendt immunstatus med relevant eksponering, laves akut undersøgelse. Dette aftales med vagthavende læge på KMA. Mistanke om primær infektion (påvisning af serokonversion) eller reaktivering dvs. zoster. Prøvemateriale: Tidspunkt for prøvetagning: Blod (serum) uden tilsætning Så tidligt som muligt efter symptomdebut. Til evt. opfølgning tages en ny blodprøve efter 2 uger med angivelse af indikation samt oplysning om tidligere prøve. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Utensilier: Tørglas. Prøvetagning: Venepunktur. Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 138 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvemængde: 4-5 ml blod (2 ml serum). Minimum 1 ml blod (0,5 ml serum). Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: Der må påregnes en svartid på 1-3 dage efter prøvens modtagelse i KMA. Tolkning: Ved primær VZV-infektion optræder serokonversion (skift fra negativt IgG resultat til positivt resultat). Titerbestemmelse udføres ikke, da det har ringe diagnostisk værdi. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: varicella-zoster virus IgG antistof. Materiale: Serum eller koagelblod. Varicella zoster virus (VZV) DNA Princip: Påvisning af VZV med PCR-teknik. Indikation: Symptomer på VZV læsioner på hud eller slimhinder. Pneumoni i forbindelse med primær skoldkoppeinfektion hos voksne. Pneumoni hos immunsupprimerede. Viral encephalitis Se encephalitudredning. Prøvemateriale: Vesikelvæske eller podning fra læsioner på hud eller slimhinder. Trakealsekret. BAL Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: varicella-zoster virus DNA/RNA. Materiale: vælg: brokoalveolær lavage(BAL), ekspektorat, slimhindepodning, trakealsekret eller vesikelvæske. Samt evt. lokalisation. Ved mistanke om encephalit vælges: encephalit- udredning(HSV+VZV) DNA/RNA. (Se denne) Tidspunkt for P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 139 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 prøvetagning: Tidligst muligt i sygdomsforløbet, svarende til det vesikulære eller væskende stadium. Virus kan ikke påvises, når læsionerne er indtørrede eller skorpedækkede. Utensilier: eSwab til svælg- og vesikelpodning, trakealsekret og BAL. Prøvetagning: Bristede vesikler podes med podepind eSwab, som presses eller rulles mod sårets bund. Podepinden anbringes i det medfølgende transportmedium og afknækkes. Materiale fra de dybe luftveje udtages i sterilt spidsglas og sendes uden tilsætning. Opbevaring: I køleskab ved 4 - 8° C. Forsendelse: Evt. i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anvendes forsendelseshylster. Svarafgivelse: En til to hverdage efter modtagelsen. Venezuelansk equine encephalitis virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Venezuelan equine encephalitis virus DNA/RNA, IgG og IgM Antistof. Materiale: blod(EDTA-glas), spinalvæske eller serum eller koagelblod. VZV, (se Varicella zoster virus (VZV) DNA) VZV antistof, (se Varicella zoster virus (VZV) antistoffer). Voriconazol serumkoncentration Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: voriconazol (koncentrationsmåling) P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 140 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Materiale: Serum eller koagelblod. Væsker, led-, pleura-, perikardie-, p-dialysevæske, ascites m.m. Princip: Mikroskopi, dyrkning, identifikation og følsomhedsbestemmelse af bakterier og svampe. Indikation: Symptomer på infektion i den pågældende anatomiske region. Prøvemateriale: Pleura-, perikardie-, peritonealdialysevæske samt ascites. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Dyrkning og resistens. Materiale: Ledvæske – Lokalisation vælges (fx albueled) Pleuravæske/Pleuravæske (bloddyrkningskolbe) Perikardievæske Peritonealdialysevæske (bloddyrkningskolbe) Acitesvæske/Acitesvæske (bloddyrkningskolbe) Ammemælk Bursavæske – lokalisation vælges (fx fri tekst) Cystecæske – lokalisation vælges (fx pilonidal) Drænvæske – lokalisation vælges (fx galdeblære/galdegang) Galde Hæmatom – anatomisk lokalsation vælges i fri tekst Fostervand Serom (Lymfe- og sårvæske) – anatomisk lokalisation vælges i fri tekst Sæd Væske – lokalisation vælges (fx peritoneum) Tidspunkt for prøvetagning: Utensilier: Prøvetagning: Før antibiotisk behandling startes. 1. Sterilt spidsglas med skruelåg. 2. Aerob og anaerob bloddyrkningskolber benyttes til perikardie-, pdialyse- og asitesvæsker. 3. Børnedyrkningskolbe til ledvæsker fra børn 4. Sprøjte 2 ml med Luer Lock Omhyggelig aseptisk teknik er helt afgørende. Der udføres huddesinfektion med 2 x jodsprit 2,5 % SAD liniment, eller hos patienter med jodallergi 2 x klorhexidinsprit 0,5 % i alkohol 70 %. Desinfektionsmidlerne skal tørre mellem påføringerne og inden punkturen. Efter desinfektion af indstiksstedet må dette ikke berøres, med mindre man har sterile handsker på. For at undgå jodforbrænding, P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 141 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 aftørres jodet med sprit efter blodtagningen. Led-, pleura- og andre væsker: 2-5 ml kommes i spidsglas. Ved meget små prøvemængder, kan ledvæsken undtagelsesvis forblive i den sprøjte, der anvendtes til aspiration (se Abscesmateriale, aspiretet pus). Ledvæske fra børn: Der injiceres 0,5 – 2 ml i børnebloddyrkningskolbe efter desinfektion af membranen med 70% sprit (ikke jodsprit). Perikardievæske, p-dialysevæske og ascites: 5 ml injiceres i bloddyrkningskolbe efter desinfektion af membranen. Et par ml kommes i sterilt spidsglas. NB! Jodsprit må ikke anvendes til desinfektion af membranerne. Prøvemængde: Se under prøvetagning, spidsglasset må kun fyldes halvt. Opbevaring: Prøvemateriale i spidsglas opbevares i køleskab (4-8º C). Bloddyrkningskolber opbevares som ved bloddyrkninger. Forsendelse: Spidsglas sendes i kølekasse, bloddyrkningskolber ukølet. Svarafgivelse: Såfremt der ved mikroskopi påvises bakterier og svampe, vil dette blive meddelt telefonisk til en autoriseret patient-ansvarlig medarbejder. Foreløbigt svar afgives 1 døgn efter modtagelse af prøven. Slutsvar afgives efter 2-5 døgn. Væv, knogle og vævs-biopsier Princip: Mikroskopi, dyrkning, identifikation og følsomhedsbestemmelse af isolerede bakterier og svampe. Indikation: Infektion i subcutis, fascie, muskel, knogle eller organer. Lokaliseret infektion i organ. Purulent artrit. Ulcus duideni. Petekkialt udslæt ved meningokoksygdom. Prøvemateriale: Vævsprøver udtaget ved kirurgisk indgreb, inkl. hjerteklapper og karproteser. Aspirat fra inficerede områder i organer, fx knoglemarv, lever eller nyre. Vævs- og knoglebiopsier fra 5 forskellige områder i det operative felt med nyt sterilt instrument ved hver biopsi, idet eventuelle fistelgange bør undgås. Ledvæsker. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 142 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Ventrikelbiopsi for Helicobacter pylori (se nedenfor). Petekkier til undersøgelse for meningokokker (se nedenfor). Tidspunkt for prøvetagning: Før antibiotisk behandling startes. Utensilier: Utensilievalget afhænger af prøvematerialet. Sprøjte Luer Lock Forsendelsesrør til sprøjte Spidsglas med skruelåg, sterilt. eSwab til ventrikelbiopsi. Objektglas og forsendelsesetui. Prøvetagning: Aseptisk teknik. Ved små biopsier og ved forsendelsestid ud over nogle timer bør spidsglasset forsynes med 2-3 dråber sterilt fysiologisk saltvand for at undgå udtørring. Gastroskopisk ophentet biopsier anbringes i et eSwab. Det skal fremgå tydeligt af rekvisitionen, at der ønskes undersøgt for Helicobacter pylori. Petekkier Ved bakteriæmi med petekkier, hvor der ikke kan påvises bakterier i spinalvæsken, kan mikroskopi og dyrkning af en petekkie i visse tilfælde give en hurtig bakteriel diagnose. Teknik: Efter desinfektion med hospitalssprit, løftes petekkien med steril kanyle og afsnittes med skalpel. Petekkien sendes i et par dråber sterilt fysiologisk saltvand til mikroskopi og dyrkning I tilfælde af specielle undersøgelser eller særlige problemstillinger bør vagthavende mikrobiolog kontaktes. Prøvemængde: Vævsstykker bør ikke være >1 x 1 cm. Kun ét vævsstykke pr. spidsglas. Spidsglas med aspireret materiale fyldes halvt. Opbevaring: I køleskab (4-8º C). Forsendelse: Så vidt muligt i kølekasse. Fremsendes hurtigst muligt. Svarafgivelse: Telefonisk svar til en autoriseret patientansvarlig medarbejder afgives ved prøver mærket ”hastesvar” fra den rekvirerende afdeling samt efter lægeligt skøn. Foreløbigt svar afgives 1 døgn efter modtagelse af prøven. Slutsvar afgives efter 2-5 døgn. Tolkning: Sker i reglen i samarbejde med klinisk mikrobiolog. Bemærkninger: Ved undersøgelse for ventrikelbiopsi for Helicobacter pylori, foretages ikke rutinemæssig følsomhedsbestemmelse, men dette kan rekvireres for amoxicillin, metronidazol, tetracyclin og clarithromycin. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 143 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Weil Felix Proteus antistof ved rickettsiose Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestille på hospital. Undersøgelse: weil-felix’prøve (rickettsiose) Materiale: Serum eller koagelblod. West Nile virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: west nile virus DNA/RNA, IgG og IgM antistof. Materiale: Serum eller koagelblod. Yellow fever, (se Gul feber virus PCR og antistof IgM, IgG). Yersinia enterocolitica 0:3 antistof, (Se Analyser der udføres på Hvidovre Hospital) Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: yersinia enterocolitica 0:3 antistof Materiale: Serum eller koagelblod. Yersinia pestis DNA Se SSI Diagnostik Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: yersinia pestis DNA/RNA. Materiale: aspirat(opsug), trakealsekret eller væv. Samt evt. lokalisation. Zoonotisk fugle- og svineinfluenza Se SSI Diagnostik P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 144 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Prøvebestilling i Opus/Webreq: Kan kun bestilles på hospital. Undersøgelse: influenza DNA/RNA (zoonotiske fugle- og svineinfluenzavirus) Materiale: slimhindepodning Lokalisation: svælg. Øjenpodning Princip: Indikation: Prøvemateriale: Dyrkning, identifikation og følsomhedsbestemmelse af isolerede bakterier og svampe. Evt. påvisning af Acanthamoeba. Øjenpodninger fra nyfødte (<1 måned) undersøges rutinemæssigt for gonokokker. Ønskes undersøgelse for Chlamydia trachomati eller Neisseria gonorrhoeae, anføres dette på prøvebestillingen. Purulent konjunktivit. Keratin (OBS kontaktlinsebrugere). Endoftalmin, posttraumatisk, postoperativ eller endogen. Pus fra conjunctiva, korneaskrab eller corpus vitreum væske. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Dyrkning og resistens. Materiale: Podning. Lokalisation: Øje. For undersøgelse for Chlamydia og Gonokokker: Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøglese: Chlamydia go gonokokker DNA/RNA Materiale: slimhindepodning. Lokalisation: Øje. Tidspunkt for prøvetagning: Før antibiotisk behandling påbegyndes. Utensilier: eSwab. Objektglas og forsendelsesetui. Prøvetagning: Podning foretages med eSwab. Hvis der er rigeligt pus, således at kontakt med slimhinden kan undgås, kan podepind benyttes (optimalt for gonokokker). Til direkte mikroskopi rulles en hvid podepind med materialet på den midterste del af et objektglas. Objektglasset mærkes med nummeret fra rekvisitionen på samme side, som materialet er ud- P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 145 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 strøget. Efter lufttørring fremsendes objektglasset i forsendelsesetui ledsaget rekvisitionen. Opbevaring: I køleskab (4-8o C). Forsendelse: Så vidt muligt i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anbringes eSwab i forsendelsesrør og objektglas i forsendelsesetui. Svarafgivelse: Foreløbigt svar afgives 1 døgn efter modtagelse af prøven. Slutsvar efter 2-5 døgn. Påvisning af gonokokker meddeles telefonisk til rekvirenten. Ved fund af potentielt patogene bakterier suppleres med resistensbestemmelse for kloramfenikol og fusidin. Tolkning: Direkte mikroskopi af øjensekret kan være vejledende for initial diagnostik og behandling. Ved keratit bør viral ætiologi overvejes (herpes simplex, varicella zoster og adenovirus) overvejes. Ved conjunctivitis med negativ bakteriologi, bør adenovirusinfektion overvejes. Bemærkninger: Ved øjenpodninger fra patienter med keratit eller endoftalmi bør diagnosen tydeligt fremgå af rekvisitionen, idet mindre virulente bakterier og svampe kan være årsag til infektion hos disse patienter. Ørepodning Princip: Aerob dyrkning, identifikation og følsomhedsbestemmelse af potentielt patogene bakterier og svampe. Anaerob dyrkning udføres kun efter særlig anmodning og begrundelse, fx mastoidit, kronisk otit media eller hjerneabsces. Indikation: Akut otitis media i tilslutning til paracentesen. Diagnistisk udredning ved sekretorisk kronisk otitis media. Akut diffus ekstern otit eller malign ekstern otit. Prøvemateriale: Sekret fra mellemøre eller ydre øregang. Prøvebestilling i Opus/Webreq: Undersøgelse: Dyrkning og resistens. Materiale: Podning. Lokalisation: Øre (mellemøre), Øre (ydre øre). Tidspunkt for prøvetagning: Før antibiotisk behandling påbegyndes. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx Internt nr. Prøvevejledning Udarbejdet af Godkendt af Gyldig fra KMA-ALM-004 Side 146 af 146 LN, DSH, IMB, JB, AKA, TPL JOJ 01.02.2015 Utensilier: eSwab. Prøvetagning: Sekret eller pus opsamles på podepinden. Hvis prøven tages fra mellemøret i forbindelse med paracentesis, bør prøven tages gennem øretragt. Opbevaring: I køleskab (4-8 C). Forsendelse: Så vidt muligt i kølekasse. Ved forsendelse med postvæsenet anbringes eSwab i forsendelsesrør. Svarafgivelse: Foreløbigt svar afgives 1 døgn efter modtagelse af prøven. Slutsvar afgives efter 2-5 døgn. Tolkning: Et evt. bakteriefund må bedømmes med forsigtighed pga. risiko for tilblanding af normalflora fra tilgrænsende områder. Bemærkninger: Der bør anføres under indikation på rekvisitionen om podningen stammer fra en patient med akut eller sekretorisk otitis media, ekstern otit, malign ekstern otit, og hvorvidt prøven er taget under operation. P:\Klinisk Mikrobiologisk Afdeling M\Dokumenter\Akkreditering\Instrukser\Alment\KMA-ALM-004 Prøvevejledning, version 13.docx
© Copyright 2024