‫ארבל הדר‬
‫מנחים‪ :‬ד"ר קרן ג'קסון‪ ,‬רותם בן שושן‬
‫‪1‬‬
In vitro toxicology lab
2
‫קרינת ‪UV‬‬
‫• קרינה אולטרה סגולה ( ‪ (UV‬הינה קרינה אשר חודרת אל פני כדור הארץ‪ .‬קרינה‬
‫זו מגיעה בעיקר מן השמש ומתחלקת לשלושה סוגים‪ UVB,UVA :‬ו‪.UVC -‬‬
‫‪3‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
‫מבנה העור‬
‫עור חזיר ‪H&E stain‬‬
‫עור אדם ‪H&E stain‬‬
‫• עור החזיר מאוד דומה לעור אנושי מבחינת נוכחות זקיקי שיער‪,‬‬
‫בלוטות זיעה‪ ,‬שומן תת עורי וכן חלוקה לתת שכבות‪.‬‬
‫‪4‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
UVB ‫נזקי קרינת‬
Thymidine dimmers
In vitro toxicology lab
5
‫נזקי קרינת ‪UVB‬‬
‫)‪Sun burn cells (SBC‬‬
‫‪ )SBCs) Sun burn cells ‬אלו תאים‬
‫קרטינוציטים אשר עוברים תהליך‬
‫אפופטוטי כמנגנון הגנה כנגד קרינת‬
‫‪.UVB‬‬
‫‪ ‬תהליך זה קורה כאשר לתא נגרם‬
‫נזק בלתי הפיך‪ ,‬אשר אינו ניתן‬
‫לתיקון‪.‬‬
‫‪ ‬התאים הופכים מצומקים‪ ,‬ובעלי‬
‫גרעין כהה‪.‬‬
‫‪6‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
‫חרסיות‬
‫• חרסית היא מונח הכולל שילוב של סוג אחד או יותר של מינרלי חרסית יחד עם‬
‫כמויות משתנות של חומרים אורגניים וחומרי בלייה‪.‬‬
‫משפחת‬
‫המחטיים‬
‫‪S-9‬‬
‫משפחת‬
‫הלוחיים‬
‫‪Syn-1‬‬
‫• הרעיון לשימוש בחרסית הגיע משום שחרסיות הן בעלות מקדם שבירה גבוה‬
‫מאוד ולכן יוכלו לשמש כמגן מפני קרינה‪.‬‬
‫‪7‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
‫מטרת המחקר‬
‫• מטרת המחקר היא לבדוק את השפעתם של חרסיות על הגנת עור חזיר‬
‫מפני קרינה ‪ UVB‬במערכת ‪ in vitro‬ע"י‪:‬‬
‫‪ .1‬אפיון הנזק שנגרם לרקמה ע"י שיטות היסטולוגיות‪.‬‬
‫‪ .2‬כימות הנזק הנגרם לרקמה ע"י שיטות אימונוהסטוכימיות‪.‬‬
‫‪8‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
‫המחקר‬
In vitro toxicology lab
9
‫שיטות וחומרים‬
‫הקרנה ב ‪UVB‬‬
‫‪ 30‬דקות‬
‫התאוששות‪ :‬למשך לילה‬
‫(‪ 12‬שעות )באינקובטור‪.‬‬
‫צביעת ‪ H&E‬לאיתור ‪SBCs‬‬
‫‪10‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
‫צביעה אימונוהיסטוכימית‬
‫לאיתור ‪T.D‬‬
‫תוצאות‬
‫מורפולוגית הרקמה בתנאי ‪in vitro‬‬
‫רקמה ללא חשיפה ל‪UVB-‬‬
‫לאחר ‪ 12‬שעות התאוששות‬
‫‪11‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
‫רקמה "טרייה" ללא חשיפה‬
‫ל‪ UVB-‬וללא התאוששות‬
‫היווצרות ‪SBCs‬‬
‫כל הדגימות נחשפו לקרינת ‪ UVB‬למשך ‪ 30‬דקות ולאחריה התאוששות באינקובטור‬
‫למשך ‪ 12‬שעות‬
‫רקמת עור ללא טיפול‬
‫‪12‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
‫רקמת עור מטופלת בחרסית א'‬
‫רקמת עור מטופלת בחרסית ב'‬
‫‪13‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
‫רקמת עור מטופלת ב‪Titanium oxide -‬‬
‫היווצרות ‪TD‬‬
‫ביקורת‪ -‬ללא חשיפה ל‪ UVB‬וללא התאוששות‬
‫רקמת עור מטופלת בחרסית א'‬
‫‪14‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
‫ביקורת ‪Titanium oxide -‬‬
‫רקמת עור מטופלת בחרסית ב'‬
TD ‫השפעה טיפולים שונים על היווצרות‬
60.00%
‫אחוז תאים שהגיבו חיובי לנוגדן‬
50.00%
40.00%
30.00%
20.00%
10.00%
0.00%
fresh
titanium s-9 ‫ חרסית‬syn-1 ultra pure no UVB, s-9 ‫ חרסית‬syn-1
‫א‬
‫ חרסית ב‬water
oxide
no
‫ א‬no UVB ‫חרסית ב‬
no UVB
treatment
‫טיפול‬
In vitro toxicology lab
15
‫מסקנות‬
‫• ראינו שחשיפת עור חזיר במערכת ‪ in vitro‬לקרינת ‪ UVB‬גורמת לנזקים הניתנים‬
‫למדידה‪.‬‬
‫• היווצרות של ‪ TD‬היא ספציפית לחשיפה לקרינת‪. UVB‬‬
‫• ראינו כי לרקמות אשר לא נחשפו לקרינת‪ , UVB‬לא נגרם נזק כלל‪.‬‬
‫• ראינו כי ‪ Titanium oxide‬יעיל בחסימת קרני‪. UVB‬‬
‫• ראינו כי חרסית סוג א' אינה יעילה בחסימת קרינת‪. UVB‬‬
‫• ראינו כי חרסית סוג ב' אינה יעילה בחסימת קרינת ‪ UVB‬ואף מגבירה אותה‪.‬‬
‫• ראינו כי טיפול של העור עם חרסיות אינו גורם לנזק לתאים‪.‬‬
‫‪16‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
‫מבט לעתיד‬
‫• לאחר שנוכחנו כי שני סוגי החרסית שנבדקו אינם יעילים בחסימת קרינת‬
‫‪ UVB‬וכי יש הבדל בין סוגי החרסיות‪ ,‬אני מציע לעשות מחקרים דומים אך‬
‫בסוגי חרסית אחרים‪.‬‬
‫• בנוסף הועלה הרעיון להשתמש בחרסית ‪ ,syn-1‬זו שהגבירה את הקרינה‪.‬‬
‫במכוני שיזוף כדי להאיץ את תהליך השיזוף‪.‬‬
‫‪17‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
‫תודות‬
‫• תודה למנחות שלי קרן גק'סון ורותם בן שושן‬
‫• תודה לתל‪-‬חי על העזרה בכתיבת העבודה‬
‫• תודה למכון מיגל של שנתנו להשתמש במעבדה שלהם‬
‫• תודה לאמא על הטרמפ‬
‫‪18‬‬
‫‪In vitro toxicology lab‬‬
In vitro toxicology lab
19