POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAANHOITOPIIRIN KUNTAYHTYMÄ
Oulun yliopistollinen sairaala
Laboratorio
OHJE HENKILÖKUNNALLE
1/8
SILMÄN ALUEEN MIKROBIOLOGISET NÄYTTEET
Näyte
Kuntaliiton nro
ja
tutkimuspyyntö
Tutkimus
3492 Pu-BaktVi2
(3508 Pu-SienVi)
Bakteeriviljely,pintanäyte
Sieniviljely
Geelikuljetusputki,
(suklaa- ja sabouraudmaljat)
Sarveiskalvonäyte,
etukammioneste ja
lasiainen
3491 Pu-BaktVi1
3508 Pu-SienVi
Bakteeriviljely, syvänäyte
Sieniviljely
Suklaa-ja sabour.-maljat,
mikrotioputki**, objektilasi
ja kuljetuskotelo
Hoitopiilolasi, piilolinssi,
piilolinssin säilytysliuos;
syvät vierasesineet
3491 Pu-BaktVi1
3508 Pu-SienVi
Bakteeriviljely, syvänäyte
Sieniviljely
Steriili putki. Kudosnäytteelle lisätään muutama
tippa steriiliä keittosuolaa.
Märkä- ja kudosnäytteet
silmän ympäristön
absessista ja haavasta
3491 Pu-BaktVi1
3508 Pu-SienVi
Bakteeriviljely, syvänäyte
Sieniviljely
Geelikuljetusputki,
anaerobiampulli tai
steriili putki (kiinteä kudos)
3294
1738
Rengaslasi
Vanutikku ja steriili putki
Bakteeri- ja sieninäyte*
Sidekalvoerite,
kyyneltiehyt-erite,
enukleoidun silmän erite
Klamydia- ja gc-näyte
Side-/sarveiskalvonäyte
Mykobakteerinäyte
Mikä tahansa silmästä
tai sen ympäristöstä
otettu näyte
Virusnäyte
Side-/sarveiskalvo-näyte
Sarveiskalvonäyte,
etukammioneste,
lasiainen
Näyteastia
1506
-GcVi
Chlamydia trachom antig
Chlamydia trachomatis ja
gonokokki, nukleiinihapot
Gonokokkiviljely
2813
2812
4490
-TbVr
-TbVi
-TbNhO
Mykobakteerivärjäys
Mykobakteeriviljely
M.tubercul. nukl happo
Steriili putki
1614
2975
-HSVAg
-VirVi
Herpes simplex-virus ag
Virusviljely
Rengaslasi
Virusviljelynäyteputki
2975
1860
-VirVi
-HSVNhO
-VZVNho
-CMVNh
Virusviljely
Herpes simplex-,
Varicella-Zoster- ja
sytomegaloviruksen
nukleiinihapon osoitukset
Virusviljelynäyteputki
Steriili putki
Steriili putki
Steriili putki
1715
-ChtrAg
-CtGcNhO
Geelikuljetusputki
Acanthamoeba-näyteputki
1808
-AcantVi Acanthamoeba, viljely
Parasiittinäyte
Steriili putki
1730 -ToxoNhO Toksoplasma gondiin
Sarveiskalvonäyte,
nukleiinihapon osoitus
piilolasi, lasiainen
*Samasta näytteestä voidaan tehdä sekä bakteeri- että sienitutkimukset OML:ssa.
**OYS:n sisäiseen käyttöön tarkoitettu silmän bakteeri- ja sieniviljelynäytteen kuljetus- ja
rikastusviljelyputki, jossa vähäinenkin bakteeri- ja sienimäärä voi lisääntyä tunnistettavaksi.
Tiedostonimi: Silmän alueen näytteen otto
M Koskela, R Kursula, Jaana Kauppila / 1.9.2010 / ver 1.0
Tiedostopolku: Y:\..\500 Laboratorion vastuualueen suojatut\Z\MIKROB\Näytteenoton käsikirja\
POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAANHOITOPIIRIN KUNTAYHTYMÄ
Oulun yliopistollinen sairaala
Laboratorio
OHJE HENKILÖKUNNALLE
2/8
Välineet (kts kuvaliite: Mikrobiologian näytteenottovälineet)
• Näytteenottokohdan puhdistukseen tarvittavat välineet
• Steriilit näytteen ottamiseen tarvittavat välineet (vanutikut, rikkaneula, kyretit, leikkausveitset, ym.)
• Steriili vanutikku ja geelikuljetusputki (sivelynäyte bakteeri- ja sienitutkimuksiin)
• Elatusainemaljat (suklaamalja, sabouraud-malja) suoraa bakteeri- ja sieniviljelyä varten
• Mikrotioputki bakteerin ja sienten rikastusviljelyä varten
• Anaerobiampulli bakteeri- ja sieniviljelyitä varten (kun näytettä yli 0,5 ml)
• Steriili putki tai purkki (kudosnäyte, vierasesine, säilytysliuos, näyte nukleiinihapon osoitusta varten)
• Virusviljelynäytteen kuljetusputki
• Acanthamoebanäytteen kuljetusputki
• Steriilejä vanutikkuja ja hiospäisiä objektilaseja (tavallisia ja rengaslaseja). Lasien kuljetuskotelo
• Potilastarrat ja näytteen laadun ja ottokohdan ilmaisevat lisätietotarrat
Lähete
• Potilaan henkilötiedot, tutkimuksen pyytäjä ja vastausosoite
• Kliininen kysymyksen asettelu ja diagnoosi
• Näytteen ottoalueen anatominen sijainti ja näytteenottopaikka, oikea vai vasen puoli mainittava.
• Mahdolliset altistavat sairaudet, toimenpiteet ja lääkitys ennen näytteen ottamista ja sen jälkeen.
Tarrat
• Kutakin näytettä varten tilataan potilastarra ja sen oheen tulostuva näytteen laadun ilmaiseva
lisätarra.
• Kun samaan astiaan otettavasta näytteestä pyydetään useampia tutkimuksia, astiaan liimataan
ensisijaisesti pyydetyn tutkimuksen tarrat ja muut tarrat lisätään sulkupussiin, jossa näyteputki
lähetetään mikrobiologian laboratorioon.
Yleistä silmänäytteistä ja silmänäytteiden ottamisesta
Silmänäytteitä otetaan toisesta tai molemmista silmistä samalla kertaa. Näytteitä voidaan ottaa silmän eri
paikoista, samoin esimerkiksi sarveiskalvon eri kohdista. Siksi näytteenottopaikka on tarkasti ilmaistava
jokaisen näytteen osalta lähetteessä ja näyteastiassa (putki, objektilasi tms.). Puudutteet voivat olla
toksisia mikrobeille, joten ainakin sidekalvonäyte tulisi ottaa ennen paikallispuudutusaineen käyttöä.
Puudutteen käyttö on mainittava lähetteen tarkenteessa.
Syville silmänäytteille on olennaista näytteen vähyys, mikä asettaa lisävaatimukset mikrobiologisen
tutkimuksen onnistumiselle ja kuinka monta eri tutkimusta näytteestä saadaan tehtyä. Siksi bakteeri- ja
sieniviljelyissä on OML:ssä käytössä suoran maljaviljelyn lisäksi rikastusviljely elatusaineputkeen
(mikrotioputki) otetusta näytteestä. Samoin klamydia- ja herpes -keratiittien diagnostiikassa käytetään
antigeenitutkimuksia nukleiinihappotutkimusten lisäksi.
Tiedostonimi: Silmän alueen näytteen otto
M Koskela, R Kursula, Jaana Kauppila / 1.9.2010 / ver 1.0
Tiedostopolku: Y:\..\500 Laboratorion vastuualueen suojatut\Z\MIKROB\Näytteenoton käsikirja\
POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAANHOITOPIIRIN KUNTAYHTYMÄ
Oulun yliopistollinen sairaala
Laboratorio
OHJE HENKILÖKUNNALLE
3/8
Sidekalvonäyte ja kyyneltiehye-erite bakteeri- ja sieniviljelyitä varten
(Pu-BaktVi2, -GcVi, Pu-SienVi)
Sidekalvonäyte otetaan yleensä alaluomen sidekalvolta potilaan katsoessa ylöspäin. Poista kuivunut
märkäerite keittosuolaan kastelluilla vanupuikoilla ja sideharsotaitoksilla. Vedä luomea sormella alaspäin
ja ota näyte vanutikulla (1) sidekalvoa sivellen niin että se ei kosketa muuta ihoa ja ympäristöä. Sulje
tikku geelikuljetusputkeen (2). Liimaa putken kylkeen potilastarra ja lisätarra peräkkäin niin, että ne voi
lukea viivakoodilukijalla. (3). Lähetä putki suojapussissa (4) mikrobiologian laboratorioon.
2
3
Tutkimus: Pu-BaktVi2
Näytteen laatu:
SIDEKALVOERITE
Näytteen tarkenne: oikea tai vasen
1
4
Näyte kyyneltiehyestä otetaan avaamalla tiehyt varovasti sormella silmän sisänurkasta kyynelpussin
kohdalta painaen niin, että näytteeksi saadaan tuoretta tiehyestä tulevaa märkäistä eritettä, jota
imeytetään vanutikkuun. Tikku suljetaan geelikuljetusputkeen ja lähetetään mikrobiologian laboratorioon.
Vrt. sidekalvonäytteen käsittely.
Bakteeriviljelynäyte silmäproteesin käyttäjän silmäkuopan pohjalta
(Pu-BaktVi2)
Näyte otetaan vanutikulla tulehtunutta silmänpohjaa sivellen. Tikku suljetaan geelikuljetusputkeen ja
lähetetään mikrobiologian laboratorioon. Vrt. sidekalvonäytteen käsittely.
Hoitopiilolasi, piilolinssi, piilolinssin säilytysliuos; syvät vierasesineet
(Pu-BaktVi1, Pu-SienVi)
Näyte tai sen osa siirretään aseptisesti steriiliin putkeen, jossa on muutama tippa steriiliä keittosuolaa.
Piilolinssin säilytysliuosta 1-2 ml steriilissä putkessa. Sulje putken korkki aseptisesti ja hyvin. Kiinnitä
potilas- ja lisätietotarrat näyteastiaan (1) ja sulje se suojapussiin ja lähetän mikrobiologian laboratorioon.
Tutkimus: Pu-BaktVi1,Pu-SienVi
Näytteen laatu:
PIILOLINSSI
Näytteen tarkenne: oikea tai vasen
1
Acantamoeba-viljelyä varten tarvitaan erillinen näyte piilolinssistä ja sen säilytysliuoksesta. Ne voidaan
lähettää sellaisenaan steriilissä putkessa. Piilolinssin voi lähettää myös Acanthamoeba-näytteen
kuljetusputkessa (joita saa OML:sta). Kts. sarveiskalvonäytteen Acanthamoebaviljelynäyte.
Tiedostonimi: Silmän alueen näytteen otto
M Koskela, R Kursula, Jaana Kauppila / 1.9.2010 / ver 1.0
Tiedostopolku: Y:\..\500 Laboratorion vastuualueen suojatut\Z\MIKROB\Näytteenoton käsikirja\
POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAANHOITOPIIRIN KUNTAYHTYMÄ
Oulun yliopistollinen sairaala
Laboratorio
OHJE HENKILÖKUNNALLE
4/8
Sarveiskalvonäytteet bakteeri- ja sienitutkimuksia varten
(Pu-BaktVi1, Pu-SienVi)
Lääkäri ottaa näytteet rikkaneulalla, kyretillä tms. ja steriilillä vanutikulla sarveiskalvon kohdasta, jossa
epäilty infektio näkyy parhaiten.
Suora maljaviljely. Ota maljat lämpenemään huoneen lämpöön 30 minuuttia ennen näytteen ottamista.
Ota näyte vanutikulla ja viljele se sillä suklaa- ja sabouraud-maljoille hajotusviljelmiksi (1,2,3). Kiinnitä
maljojen pohjiin näytetarrat (4) ja toimita maljat heti sen jälkeen mikrobiologian laboratorioon
hiilidioksidikaappiin inkuboitumaan.
2
3
1
1
1,2,3
4
Näyte mikrotioputkeen, joita saa OML:sta.
Ota näyte vanutikulla ja siirrä se aseptisesti syvien silmänäytteiden kuljettamiseen tarkoitettuun pieneen
kierrekorkilliseen elatusaineputkeen, mikrotioputkeen, sekoittamalla se näytetikun vanupäästä putkessa
olevaan nesteeseen. (1) Poista tikku putkesta ja sulje sen korkki aseptisesti. Lisää putkeen potilastarra
ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra.(2) Lähetä putki mikrobiologian laboratorioon sulkupussissa
(Minigrip-pussi tms).
1
2
Tiedostonimi: Silmän alueen näytteen otto
M Koskela, R Kursula, Jaana Kauppila / 1.9.2010 / ver 1.0
Tiedostopolku: Y:\..\500 Laboratorion vastuualueen suojatut\Z\MIKROB\Näytteenoton käsikirja\
POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAANHOITOPIIRIN KUNTAYHTYMÄ
Oulun yliopistollinen sairaala
Laboratorio
5/8
OHJE HENKILÖKUNNALLE
Bakteerivärjäysnäyte objektilasille (-BaktVr)
Ota tehdassteriili hiospäinen objektilasi pakkauksestaan. Merkitse sen taustapuolelle rasvakynällä
ympyrä (halkaisija n.1,5 cm ). Ota näyte vanutikulla ja sivele se objektilasille ympyrän sisälle. (1) Kirjoita
lyijykynällä lasin hiospäähän potilaan nimi ja syntymäaika, näytteen laatu (sik tai sak), näytteen
ottopaikka (os./pkl) ja päivämäärä. (2) Sulje lasi objektilasien kuljetuskoteloon ja kiinnitä siihen
potilastarra ja sen viereen näytteen laadun ilmaiseva lisätarra. (3) Toimita lasi kotelossaan
mikrobiologian laboratorioon tutkittavaksi.
3
1
2
Chlamydia trachomatis-antigeenitutkimusnäyte side-/sarveiskavolta rengaslasille. (-ChtrAg)
Tarkoituksena on saada näytteeksi Chlamydia trachomatiksen infektoimia epiteelisoluja objektilasille niin
paljon, että niistä voidaan diagnoosi tehdä. Tavallisin virhe on liian niukkasoluinen näyte!!
Ota näyte vanutikulla side-/sarveiskalvoa hangaten niin, että siihen tarttuu soluja. Siirrä solut vanusta
rengaslasille vanutikkua lasin pintaa pitkin kiertäen. (1). Ilmakuivaa näyte lasille. Kirjoita lyijykynällä lasin
hiospäähän potilaan nimi ja syntymäaika, näytteen laatu (sik tai sak), näytteen ottopaikka (os./pkl) ja
päivämäärä. (2) Sulje lasi objektilasien kuljetuskoteloon ja kiinnitä siihen potilastarra ja sen viereen
näytteen laadun ilmaiseva lisätarra. (3) Toimita lasi kotelossaan mikrobiologian laboratorioon
tutkittavaksi.
3
1
2
Tiedostonimi: Silmän alueen näytteen otto
M Koskela, R Kursula, Jaana Kauppila / 1.9.2010 / ver 1.0
Tiedostopolku: Y:\..\500 Laboratorion vastuualueen suojatut\Z\MIKROB\Näytteenoton käsikirja\
POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAANHOITOPIIRIN KUNTAYHTYMÄ
Oulun yliopistollinen sairaala
Laboratorio
OHJE HENKILÖKUNNALLE
6/8
Herpesvirus-antigeenäyte sarveiskalvolta. (-HSVAg)
Ota näyte vanutikulla side-/sarveiskalvoa hangaten niin, että siihen tarttuu soluja. Siirrä soluja vanusta
kaksirenkaisen objektilasin molempiin renkaisiin vanutikkua lasin pintaa pitkin kiertäen. (1). Varmista,
että soluja tulee tarpeeksi kumpaankin renkaaseen. Ilmakuivaa näyte lasille. Kirjoita lyijykynällä lasin
hiospäähän potilaan nimi ja syntymäaika, näytteen laatu (sik tai sak), näytteen ottopaikka (os./pkl) ja
päivämäärä. (2) Sulje lasi objektilasien kuljetuskoteloon ja kiinnitä siihen potilastarra ja sen viereen
näytteen laadun ilmaiseva lisätarra. (3) Toimita lasi kotelossaan mikrobiologian laboratorioon
tutkittavaksi.
3
Chlamydia trachomatis- ja gonokokki nukleiinihappotutkimusnäyte,
Herpesvirus nukleiinihappotutkimusnäyte side-/sarveiskavolta
(-CtGcNhO, -HSVNhO)
Ota steriili putki ja lisää siihen 5 tippaa steriliä keittosuolaa. Ota näyte vanutikulla side-/sarveiskalvoa
hangaten niin, että siihen tarttuu infektoituneita soluja. Siirrä näyte aseptisesti putkeen ja sekoita se
vanusta keittosuolaan. (1) Poista tikku putkesta ja sulje sen korkki aseptisesti ja hyvin. (2) Lisää putkeen
potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra.(2) Lähetä putki mikrobiologian laboratorioon
sulkupussissa (Minigrip-pussi tms). (3) Kutakin tutkimusta varten oma putki.
3
1
2
Tiedostonimi: Silmän alueen näytteen otto
M Koskela, R Kursula, Jaana Kauppila / 1.9.2010 / ver 1.0
Tiedostopolku: Y:\..\500 Laboratorion vastuualueen suojatut\Z\MIKROB\Näytteenoton käsikirja\
POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAANHOITOPIIRIN KUNTAYHTYMÄ
Oulun yliopistollinen sairaala
Laboratorio
7/8
OHJE HENKILÖKUNNALLE
Virusviljelynäyte side-/sarveiskavolta. (-VirVi)
Ota näyte vanutikulla side-/sarveiskalvoa hangaten niin, että siihen tarttuu viruksen infektoimia soluja.
Siirrä näyte aseptisesti virusviljelynäytteen kuljetusputkeen sekoittamalla se näytetikun vanupäästä
putkessa olevaan nesteeseen.(1) Poista tikku putkesta ja sulje sen korkki aseptisesti ja hyvin. Lisää
putkeen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra.(2) Lähetä putki mikrobiologian laboratorioon
sulkupussissa (Minigrip-pussi tms).
2
1
Acanthamoeba-viljelynäyte sarveiskavolta. (-AcantVi)
Ota näyte tukevavartisella vanutikulla side-/sarveiskalvoa hangaten niin, että siihen tarttuu ameban
infektoimia soluja. Siirrä näyte aseptisesti Acanthamoebanäytteen kuljetusputkeen sekoittamalla se
näytetikun vanupäästä putkessa olevaan nesteeseen.(1) Poista tikku putkesta ja sulje sen korkki
aseptisesti ja hyvin. Lisää putkeen potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra.(2) Lähetä putki
mikrobiologian laboratorioon sulkupussissa (Minigrip-pussi tms). (3)
2
1
Tiedostonimi: Silmän alueen näytteen otto
M Koskela, R Kursula, Jaana Kauppila / 1.9.2010 / ver 1.0
Tiedostopolku: Y:\..\500 Laboratorion vastuualueen suojatut\Z\MIKROB\Näytteenoton käsikirja\
POHJOIS-POHJANMAAN SAIRAANHOITOPIIRIN KUNTAYHTYMÄ
Oulun yliopistollinen sairaala
Laboratorio
OHJE HENKILÖKUNNALLE
8/8
Näytteet silmän sisältä (etukammioneste, lasiainen,ym)
(Pu-BaktVi1, Pu-SienVi, -HSVNhO, -VZVNhO, -CMVNh, -ToxoNhO, -VirVi-, TbVi, -TbNhO)
Ennen näytteen ottamista kliinikon tulee selvittää ja päättää, mitä kaikkia tutkimuksia näytteestä
pyydetään, sillä silmän sisältä saatavien näytteiden pieni määrä rajoittaa niistä tehtävien tutkimusten
lukumäärää. Yhteen tutkimukseen tarvitaan 10 – 200 µl näytettä, joten sitä joudutan laimentamaan, mikä
taas heikentää tuloksen luotettavuutta. Olisi suotavaa, että bakteeri-, sieni- ja virusviljelytutkimuksiin
saataisiin oma niihin jaettava näyte ja nukleiinihappotutkimuksiin toinen niihin jaettava näyte. 0,2 ml:n
(laimennetusta) näytteestä voi tehdä 3-(4) nukleiinihappotutkimusta.
Lääkäri ottaa näytteet operaation yhteydessä. Näyte otetaan aseptisesti neulalla ja ruiskulla
etukammiosta ja/tai lasiaisesta aspiroimalla ruiskussa olevaan keittosuolaan, jolloin (laimennetun)
näytteen kokonaistilavuus on 0,2 ml.
Viljely- ja värjäysnäytteen jakaminen eri tutkimuksia varten. Tarkemmat kuvalliset ohjeet: kts
sarveiskalvonäytteiden käsittely.
1.Bakteeriviljely (Pu-BaktVi1): Tiputa ruiskusta 1 tippa tuoreelle suklaamaljalle.
2.Sieniviljely (Pu-SienVi): Tiputa ruiskusta 1 tippa tuoreelle Sabouraud-maljalle.
3.Bakteerivärjäysnäyte ( -BaktVr): Tiputa yksi tippa näytettä hiospäiselle objektilasille neulaa lasille
koskettamatta.
4.Virusviljely (–VirVi). Tiputa ruiskusta 1 tippa virusviljelyputkeen neulaa putkeen koskettamatta.
5.Mikrotioputkinäyte. (Pu-BaktVi) Siirrä näytteen loppuosa ruiskusta neulalla aseptisesti
mikrotioputkeen ruiskuttamalla näyte elatusaineeseen, aspiroimalla elatusainetta ruiskuun ja
huuhtelemalla ruiskun sisäosa sillä putkeen.
Nukleiinihappotutkimusnäyte (-HSVNhO, -VZVNhO, -CMVNh, -ToxoNhO). Sulje
näytteenottoruisku aseptisesti steriilillä korkilla. Liimaa ruiskuun ensisijaisesti pyydettävän tutkimuksen
potilastarra ja näytteen laadun ilmaiseva lisätarra. Sulje ruisku ja muiden tästä näytteestä pyydettävien
nukleiinihappotutkimusten tarrat sulkupussiin. Lähetä pussi heti mikrobiologian laboratorioon.
Märkä- ja kudosnäytteet silmän ympäristön absessista tai haavasta.
Kts. ohje: Absessin (paiseen) ja märkänäppylöiden bakteeri- ja sieniviljelynäyte.
Silmän mykobakteeritutkimusnäytteet
(-TbVi, -TbVr, -TbNhO)
Näytteet (kiinteä tai nestemäinen) steriilissä kierrekorkillisessa putkessa. Lisää putkeen 2-5 tippaa
keittosuolaa näytteen kuivumisen estämiseksi. Mykobakteeriviljelytutkimuksen (-TbVi) voi pyytää myös
mikrotioputkeen otetusta näytteestä (vrt. edellä). Kiinnitä putkeen potilastarra ja näytteen laadun
ilmaiseva lisätarra ja lähetä se mikrobiologian laboratorioon.
Näytteiden säilyttäminen ja lähettäminen
Toimita näytteet laboratorioon mahdollisimman pian, mielellään saman päivän aikana. Säilytä niitä
huoneen lämmössä (lähetys samana päivänä) tai jääkaapissa viilennettynä (säilytys yli yön tai
viikonlopun).
Lisätiedot: OYS, mikrobiologian laboratorio: p. 08-3154000.
Tiedostonimi: Silmän alueen näytteen otto
M Koskela, R Kursula, Jaana Kauppila / 1.9.2010 / ver 1.0
Tiedostopolku: Y:\..\500 Laboratorion vastuualueen suojatut\Z\MIKROB\Näytteenoton käsikirja\