Total β-hCG
da Total β-hCG system 7K78 B7K786 G4-3636/R13 Læs markerede ændringer Revideret i marts 2014 Total β-hCG Kundeservice: Kontakt den lokale Abbott-repræsentant, eller find landespecifikke kontakt oplysninger på www.abbottdiagnostics.com. Anvisningerne i denne brugsanvisning skal følges nøje. Hvis anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Symbolforklaring Bestillingsnummer RV-celler Medicinsk udstyr til in vitrodiagnostik Prøvekopper Lotnummer Gummimembran Serienummer Ekstra skruelåg Udløbsdato Reagenslot Opbevares ved 2-8 °C Globalt varenummer Se brugsanvisningen Produceret i Irland Fabrikant Oplysningerne gælder kun for USA Se afsnittet REAGENSER for nærmere oplysninger om de enkelte reagenssymboler. 1 BETEGNELSE Analysefortyndingsopløsning ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50) 1 flaske (100 ml) ARCHITECT • i Multi-Assay Manual Diluent indeholdende saltvandsopløsning i fosfatbuffer. Konserveringsmiddel: antimikrobielt middel. ARCHITECT Total β‑hCG ANVENDELSE ARCHITECT Total β-hCG er en kemiluminescensmikropartikelimmunanalyse (CMIA) til kvantitativ og kvalitativ bestemmelse af humant betachoriongonadotropin (β-hCG) i humant serum og plasma og anvendes til tidlig påvisning af graviditet. Andre reagenser ARCHITECT i Pre-Trigger Solution Prætriggeropløsning indeholdende 1,32% • (w/v) hydrogenperoxid. ARCHITECT i Trigger Solution • Triggeropløsning indeholdende 0,35N natriumhydroxid. ARCHITECT i Wash Buffer BEMÆRK: Flaskens størrelse afhænger af reagenssættets størrelse. • Vaskebuffer indeholdende fosfatbuffer. Konser veringsmidler: antimikrobielle midler. RESUME OG ANALYSEFORKLARING Humant choriongonadotropin (hCG) er et sialoglykoprotein med en molekylvægt på ca. 46.000 dalton.1 hCG secerneres af trofoblastcellerne i placenta kort efter implantation af det befrugtede æg i livmodervæggen.2,3 hCG er en udmærket markør til tidlig påvisning og overvågning af graviditet, fordi hCG-niveauet stiger hurtigt i serum efter befrugtningen. hCG’s funktion er tilsyneladende at vedligeholde corpus luteum, hvorved progesteron- og østrogensyntese muliggøres til modning af endometriet. Hvis graviditeten er ukompliceret, overtager placenta gradvist produktionen af disse hormoner. Koncentrationen af hCG i serum stiger hurtigt og falder derefter for at finde et fast niveau. Hos kvinder, hvis graviditet er ukompliceret, cirkulerer hCG som et intakt molekyle i serum. Kæderne spaltes hurtigt fra og udskilles af nyrerne.4 Placentahormonet hCG minder om det luteiniserende hormon (LH), det follikelstimulerende hormon (FSH) og det tyreoideastimulerende hormon (TSH). De er alle glykoproteiner, der består af to ikke-kovalent forbundne forskellige kæder, kaldet alfa og beta, hvortil der er bundet sidekæder bestående af kulhydrater. Glykoproteinernes alfakæder ligner hinanden meget, mens beta-kæderne er bestemmende for den biologiske og immunologiske specificitet.5,6 Betakæderne i hCG og LH er ret ensartede med hensyn til indhold af aminosyrer. Aminosyreresterne i betakæden i hCG er bestemmende for den immunologiske specificitet.7 Ved hjælp af sensitive analyser til kvantitativ måling af β-hCG i serum er det blevet muligt at bestemme hCG-niveauet og dermed forudsige spontane aborter,8,9 påvise ekstrauterin graviditet8,10,11 og multipel graviditet.8 VIGTIGE FORHOLDSREGLER • • Til in vitro-diagnostisk brug • Anvisningerne i denne brugsanvisning skal følges nøje. Hvis anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. Sikkerhedsforanstaltninger • VIGTIGT: Brug af dette produkt kræver håndtering af humane prøver. Det anbefales, at alle prøver af human oprindelse betragtes som potentielt smittefarlige og håndteres i overensstemmelse med det amerikanske arbejdsmiljøinstitut OSHA’s standard Bloodborne Pathogens.12 Biosafety Level 2 13 eller andre gældende sikkerheds 14,15 bør anvendes ved foranstaltninger for biologisk materiale håndtering af materiale, der indeholder eller mistænkes for at indeholde smittefarlige stoffer. • Sikkerhedsdatablade er til rådighed på www.abbottdiagnostics.com eller kan fås ved henvendelse til kundeservice. • Se kapitel 8 i ARCHITECT-brugermanualen for en nærmere beskrivelse af sikkerhedsforanstaltningerne ved betjening af systemet. ANALYSEPRINCIPPER ARCHITECT Total β-hCG analysen er en totrinsimmunanalyse til bestemmelse af forekomsten af β-hCG i humant serum og plasma og er baseret på kemiluminescensmikropartikelimmunanalyseteknologi (CMIA) med fleksible analyseprotokoller, kaldet Chemiflex. I første trin blandes prøvemateriale og paramagnetiske mikropartikler, der er coatet med anti-β-hCG. Prøvens indhold af β-hCG bindes til mikropartiklerne, der er coatet med anti-β-hCG. I andet trin, efter udført vask, tilsættes acridinmærket anti-β-hCG-konjugat. Derefter tilsættes prætrigger- og triggeropløsning i reaktionsblandingen. Den efterfølgende kemiluminescerende reaktion måles i form af relative lysenheder (RLU). Mængden af β-hCG i prøven og mængden af RLU, som ARCHITECT i Systems optik påviser, er direkte proportional. For yderligere oplysninger om systemet og analyseteknologien henvises til kapitel 3 i ARCHITECT-brugermanualen. Forholdsregler ved anvendelse • Anvend ikke reagenssæt, hvor udløbsdatoen er overskredet. • Bland ikke reagenser fra forskellige reagenssæt. • Før ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit placeres i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler blandes grundigt, så mikropartikler, som har bundfældet sig under transporten, resuspenderes. For anvisninger om blanding af mikropartikler henvises til afsnittet PROCEDURE, Analyseprocedure i denne brugsanvisning. • Gummimembraner SKAL anvendes for at undgå fordampning og kontaminering og for at sikre reagensernes holdbarhed. Hvis ikke gummimembraner anvendes som anført i denne brugsanvisning, kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres. • Brug rene handsker for at undgå kontaminering, når gummimembran sættes på en åben reagensflaske. • Når den åbne reagensflaske er forsynet med en gummimembran, må flasken ikke vendes, da dette vil medføre udsivning af reagens, hvilket vil kunne påvirke testresultaterne. • Med tiden vil tilbagebleven væske kunne tørre fast på gummimembranen. Der vil typisk være tale om indtørrede salte, der ikke har nogen betydning for testningen. • Se kapitel 7 i ARCHITECT-brugermanualen for en nærmere beskrivelse af forholdsreglerne ved betjening af systemet. REAGENSER Reagenssæt, 100 tests/500 test BEMÆRK: Reagenssættenes konfiguration varierer afhængigt af bestillingen. BEMÆRK: Nogle reagenssæt kan ikke fås i alle lande eller til anvendelse på alle ARCHITECT i Systems. Kontakt den lokale forhandler. ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit (7K78) • 1 eller 4 flasker (6,6 ml/27,0 ml) mikropartikler, der er coatet med anti-β‑hCG (mus, monoklonalt), i TRIS-buffer med okseproteinstabilisatorer. Minimumskoncentration: 0,06% tørstof. Konserveringsmidler: antimikrobielle midler. • 1 eller 4 flasker (2,1 ml/7,4 ml) acridinmærket anti-β‑hCG-konjugat (mus, monoklonalt) i MES-buffer med okseproteinstabilisatorer. Minimumskoncentration: 2,9 µg/ml. Konserveringsmiddel: antimikrobielt middel. Opbevaring • ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit skal opbevares ved 2-8 °C og kan anvendes, straks efter at det er fjernet fra køl (2-8 °C). • Reagenserne er holdbare indtil udløbsdatoen ved opbevaring og håndtering efter forskrifterne. 2 • Hvis testningen udsættes mere end 24 timer, bør serum eller plasma fjernes fra koaglet, gelen eller de røde blodlegemer. Prøver kan opbevares i op til 7 dage ved 2-8 °C inden testning. Hvis testningen udsættes mere end 7 dage, bør prøverne opbevares i frossen tilstand ved -10 °C eller koldere. Prøver, der har været nedfrosset ved -10 °C eller koldere i 12 måneder, har ikke vist nogen forskel i ydeevne. • Gentagne nedfrysninger og optøninger bør undgås. For at sikre ensartede resultater skal prøver blandes GRUNDIGT efter optøning, enten ved at vortexe dem ved LAV hastighed eller ved forsigtigt at vende dem, samt centrifugeres før brug for at fjerne røde blodlegemer eller udfældninger. • Ved forsendelse skal prøverne pakkes og mærkes i overensstemmelse med gældende nationale og internationale regler for transport af kliniske prøver og smittefarlige stoffer. Prøverne skal forsendes på køl eller nedfrosne (tøris). Det anbefales at fjerne prøverne fra koaglet, gelen eller de røde blodlegemer inden forsendelse. • ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit kan opbevares i ARCHITECT i System i maks. 30 dage, hvorefter det skal kasseres. For oplysninger om styring af reagensholdbarhed i systemet henvises til kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen. • Reagenserne kan opbevares i eller uden for ARCHITECT i System. Hvis reagenserne fjernes fra systemet, skal de opbevares ved 2-8 °C (med gummimembraner og nye skruelåg) i oprejst stilling. Det anbefales i så fald at placere dem i de originale bakker og æsker, hvori de står korrekt. Hvis flasken med mikropartikler ikke står oprejst (forsynet med gummimembran) på køl uden for systemet, skal reagenssættet kasseres. Når reagenserne fjernes fra systemet, skal en scanning bestilles for at opdatere systemets holdbarhedstimer. Indikation af reagenshenfald Hvis en kontrolværdi ligger uden for det specificerede område, kan dette være et tegn på reagenshenfald eller procedurefejl. Testresultaterne kan være ugyldige, og retestning kan være påkrævet. Rekalibrering kan være påkrævet. Se kapitel 10 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om fejlfinding. PROCEDURE Medfølgende produkter • 7K78 ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit INSTRUMENTPROCEDURE • ARCHITECT Total β‑hCG-rutineprotokollen (analysenummer 651) skal installeres på ARCHITECT i2000 fra ARCHITECT i System Assay CD-ROM, inden analysen køres. Analysefilen med ARCHITECT Total β‑hCG-rutineprotokollen (analysenummer 651) og/eller STATprotokollen (analysenummer 030) skal installeres på ARCHITECT i System med STAT-protokol fra ARCHITECT i System Assay CD-ROM, inden analysen køres. Se kapitel 2 i ARCHITECT-brugermanualen for nærmere oplysninger om installation af analysefiler. • ARCHITECT Total β‑hCG-rutineprotokollen (totrins 18-4) er tilgængelig til brug på ARCHITECT i Systems. ARCHITECT Total β‑hCG STATprotokollen (totrins 4-4) er tilgængelig til brug på ARCHITECT i System med STAT-protokol. • Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om udskrivning af analyseparametre. • Se ARCHITECT-brugermanualen for nærmere oplysninger om systemprocedurer. • Standardresultatenheden for ARCHITECT Total β‑hCG-analysen er mIU/ml. Det er muligt at anvende resultatenheden IU/l. Dette gøres ved at ændre analyseparameteret “Result concentration units” til IU/L. Systemet anvender omregningsfaktor 1. Nødvendigt tilbehør og udstyr • ARCHITECT i System • ARCHITECT Total β-hCG-analysefilen fra: • ARCHITECT i System e-Assay CD-ROM, som findes på www.abbottdiagnostics.com • ARCHITECT i Assay CD-ROM • 7K78-01 ARCHITECT Total β‑hCG Calibrators • 7K78-10 ARCHITECT Total β‑hCG Controls • 7D82-50 ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent • ARCHITECT i • ARCHITECT i • ARCHITECT i • ARCHITECT i • ARCHITECT i • ARCHITECT i • ARCHITECT i • Se kapitel 9 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om nødvendigt udstyr til brug ved vedligeholdelsesprocedurer. • Pipetter eller pipettespidser (valgfrit) til at dispensere de mængder, der er specificeret på patientprøve- og kontrolbestillingsskærmbilledet. PRØVETAGNING OG KLARGØRING • Både humant serum (herunder serum udtaget i gelglas) og plasma udtaget i litiumheparin, natriumheparin eller kalium-EDTA kan anvendes til ARCHITECT Total β-hCG-analysen. Ingen andre antikoagulanser er valideret til anvendelse med ARCHITECT Total β-hCG-analysen. Følg rørfabrikantens brugervejledning for serum- og plasmaprøvetagningsglas. • ARCHITECT i System kontrollerer ikke prøvetypen. Det er brugerens opgave at kontrollere, at de korrekte prøvetyper anvendes til ARCHITECT Total β‑hCG-analysen. • Utilstrækkelig centrifugering eller forekomst af fibrin eller udfældninger kan forårsage fejlagtige resultater. • Abbott Laboratories anbefaler anvendelse af plasma til STAT-testning. Da plasma ikke som serum skal koagulere før anvendelse, er der mindre sandsynlighed for, at prøven indeholder fibrin og andre udfældninger. • Vær forsigtig ved håndtering af patientprøver for at undgå krydskontaminering. Det anbefales at bruge engangspipetter eller -pipettespidser. • Undersøg alle prøver for bobler for at opnå optimale resultater. Fjern alle bobler med en rørepind, inden analysen påbegyndes. Anvend en ny rørepind til hver prøve for at undgå krydskontaminering. • For at opnå optimale resultater bør serum- og plasmaprøver være fri for fibrin, røde blodlegemer og udfældninger. • Kontrollér, at prøven er fuldstændig koaguleret inden centrifugering. Nogle prøvers koagulationstid er forlænget, især hvis de er udtaget fra patienter, der er i antikoagulant eller trombolytisk behandling. Hvis prøven centrifugeres før den er fuldstændig koaguleret, kan fibrin medføre fejlagtige resultater. Analyseprocedure • Før ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit anbringes i systemet første gang, skal flasken med mikropartikler vendes for at få mikropartikler, som har bundfældet sig under transporten, til at resuspendere: • Vend flasken med mikropartikler 30 gange. • Kontrollér, at mikropartiklerne er resuspenderet i flasken. Hvis der stadig sidder mikropartikler fast i flasken, skal den vendes, indtil mikropartiklerne er resuspenderet i flasken. • Skru låget af, når mikropartiklerne er resuspenderet, og kassér det. Tag en gummimembran ud af indpakningsposen. Brug handsker. Sæt forsigtigt gummimembranen fast på flaskeåbningen. • ANVEND IKKE mikropartiklerne, hvis de ikke kan resuspenderes i opløsningen. Kontakt Abbotts kundeservice. • Bestil testene. • Anbring ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit i ARCHITECT i System. Kontrollér, at alle nødvendige reagenser forefindes. Kontrollér, at alle reagensflasker er forsynet med en gummimembran. • Prøvekoppens minimumsvolumen udregnes af systemet og fremgår af bestillingsudskriften (Orderlist report). Der må maks. udføres 10 gentagelser fra samme prøvekop. For at reducere følgen af fordampning kontrolleres, at der er nok prøvemateriale i prøvekoppen, inden testen køres. • Hasteprøver: 75 µl til den første Total β‑hCG-test plus 25 µl til hver yderligere Total β‑hCG-test fra samme prøvekop. • ≤ 3 timer i systemet: 150 µl til den første Total β‑hCG-test plus 25 µl til hver yderligere Total β‑hCG-test fra samme prøvekop. • > 3 i systemet: Yderligere prøvevolumen er nødvendig. Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om fordampning af prøvemateriale og prøvevolumen. 3 • Når en ARCHITECT Total β‑hCG-kalibrering er godkendt og lagret, kan alle efterfølgende prøver testes uden yderligere kalibrering, medmindre: • Et reagenssæt med et nyt lotnummer tages i brug • Kontrollerne ligger uden for området • Se kapitel 6 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om analysekalibrering. • Ved brug af primære og sekundære rør bør der anvendes prøvemåler for at sikre, at der er nok prøvemateriale. • For at opnå de nødvendige mængder af ARCHITECT Total β‑hCGkalibratorer og -kontroller holdes flaskerne lodret, og 4 dråber af hver kalibrator eller 3 dråber af hver kontrol dispenseres ned i de respektive prøvekopper. • Isæt prøverne. • Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om isætning af prøver. • Tryk på RUN. ARCHITECT i System udfører følgende funktioner: • Flytter prøven hen til aspirationspositionen • Transporterer en RV-celle ind i det indre analyseringsområde • Aspirerer og overfører prøvematerialet til RV-cellen • Rykker RV-cellen én position frem og dispenserer mikro partiklerne ned i RV-cellen • Blander, inkuberer og vasker reaktionsblandingen • Tilsætter konjugat i RV-cellen • Blander, inkuberer og vasker reaktionsblandingen • Tilsætter prætrigger- og triggeropløsning • Måler emissionen af kemiluminescens for at bestemme mængden af β‑hCG i prøven • Aspirerer indholdet i RV-cellen og overfører det til beholderen til flydende affald, mens RV-cellen overføres til beholderen med fast affald • Udregner resultatet • Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om bestilling af patientprøver, kalibratorer og kontroller samt generelle betjeningsprocedurer. • For at opnå optimal ydeevne er det vigtigt at følge procedurerne for rutinevedligeholdelse som beskrevet i kapitel 9 i ARCHITECTbrugermanualen. Hvis hyppigere vedligeholdelse kræves ifølge laboratoriets procedurer, bør disse følges. PROCEDURER FOR KVALITETSKONTROL For at overholde kontrolkravene til ARCHITECT Total β-hCG-analysen bør alle kontrolniveauerne testes i enkeltbestemmelse én gang i døgnet på kørselsdage. Hvis laboratoriets procedurer for kvalitetskontrol kræver hyppigere brug af kontroller til verifikation af testresultater, bør disse procedurer følges. Kontrollér, at kontrolværdierne ligger inden for de koncentrationsområder, der er angivet i brugsanvisningen. På grund af analysekomponenternes og/eller matricernes forskellige sammensætning vil eksterne kvalitetskontroller og referenceprøver muligvis ikke udvise identiske resultater for alle hCG-analysemetoder. Kvalitetskontroller og referenceprøver fra andre producenter end Abbott kan indeholde høje niveauer af frie beta-kæde-hCG-molekyler. Kvalitetskontroller og referenceprøver fra andre producenter end Abbott kan give forskellige resultater, når hCG-analyser med intakte molekyler sammenlignes med Total β-hCG-analyser. Det enkelte laboratorium bør afgøre, hvorvidt kontrolmaterialet er egnet til den pågældende immunanalyse og validere materialet, før det tages i brug. Verifikation af analysens dokumenterede egenskaber Se appendiks B i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om procedurer til verifikation af analysens dokumenterede egenskaber. ARCHITECT Total β‑hCG-analysen hører til metodegruppe 1. RESULTATER Til udregning af kalibreringskurven anvender ARCHITECT Total β‑hCGanalysen en 4-parameterdatareduktionsmetode til kurvetilpasning (4PLC, Y-vægtet). Andre resultatenheder Prøvefortyndingsprocedurer • Standardresultatenheden for ARCHITECT Total β-hCG-analysen er mIU/ml. Hvis resultatenheden IU/l vælges, benytter systemet omregningsfaktor 1. • Omregningsformel: (koncentration i mIU/ml) x (1) = IU/l Prøver med en Total β-hCG-værdi, der er større end 15.000,00 mIU/ml, markeres med koden “>15,000.00” og kan fortyndes automatisk eller manuelt. • Hvis den automatiserede fortyndingsprocedure anvendes, udfører systemet en 1:15-fortynding af prøven og udregner automatisk koncentrationen af den fortyndede prøve og afgiver resultater. • Manuel fortynding skal udføres, som beskrevet nedenfor: • Den anbefalede fortynding til Total β‑hCG er 1:15. Fortyndingsforholdet bør ikke overstige 1:75. • Til en 1:15-fortynding tilsættes 20 µl patientprøve i 280 µl ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50). • Det er brugerens opgave at indtaste fortyndingsfaktoren på patientprøve- og kontrolbestillingsskærmbilledet. Systemet anvender denne fortyndingsfaktor til automatisk at beregne prøvens koncentration før fortynding. Dette resultat vil blive afgivet. Resultatet (dvs. før anvendelse af fortyndingsfaktoren) bør være større end 467,00 mIU/ml. • Hvis brugeren ikke indtaster fortyndingsfaktoren, vil det afgivne resultat referere til den fortyndede prøve. Resultatet (dvs. før anvendelse af fortyndingsfaktoren) bør være større end 467,00 mIU/ml. • BEMÆRK: Hvis resultatet “< 7000.00 mIU/mL” (1:15 automatiseret fortyndingsprocedure) vises på enten skærm eller udskrift, betyder dette, at prøven bør retestes enten i en lavere fortynding eller ufortyndet. Resultatet skal hverken fortolkes eller frigives. • Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysning om bestilling af fortyndinger. Flag • Nogle resultater kan indeholde oplysninger i flagfeltet. For en beskrivelse af de flag, der kan forekomme i dette felt, henvises til kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen. Fortolkning af resultater Til kvalitativ fortolkning af ARCHITECT Total β-hCG-resultater vil prøver med et β-hCG-niveau, der er mindre end eller lig med 5,00 mIU/ml, blive vist i fortolkningsfeltet INTERPRETATION på resultatskærmbilledet (Test Results) eller udskriften som “NEGATIVE”. Prøver med et β-hCG-niveau, der er større end eller lig med 25,00 mIU/ml, vil blive vist som “POSITIVE”. Prøver med et β-hCG-niveau, der er større end 5,00 mIU/ml og mindre end 25,00 mIU/ml, vil kun blive vist med koncentrationen. Der vil ikke blive foretaget nogen fortolkning af sådanne resultater. PROCEDUREBEGRÆNSNINGER • Denne analyse kan påvise både intakte hCG-molekyler og frie β-hCGkæder. • Til diagnostisk brug bør hCG-resultaterne altid anvendes sammen med andre data, f.eks. anamnesen, symptomer, resultater fra andre analyser, kliniske indtryk osv. Ekstrauterin graviditet kan ikke skelnes fra normal graviditet alene ved måling af hCG.10,11 Resultater fra denne eller andre analyser bør kun anvendes og fortolkes som en del af det samlede kliniske billede. • Hvis hCG-niveauet ikke stemmer overens med eller ikke understøttes af det kliniske indtryk, bør resultatet søges konfirmeret med en anden hCG-analysemetode, som f.eks. en kvalitativ urinanalyse.16 Hvis der ikke kan påvises hCG i urinen, kan det betyde, at hCG-resultatet i serumprøven er falsk forhøjet. Resultatet kan også søges konfirmeret ved seriel prøvefortynding. Prøver indeholdende interfererende stoffer vil som regel – men ikke altid – udvise non-lineære resultater, når de fortyndes. Kalibrering • Kalibrator A, B, C, D, E og F skal testes i dobbeltbestemmelse, når der udføres en ARCHITECT Total β-hCG-kalibrering. Alle Total β-hCGkontrolniveauerne skal testes i enkeltbestemmelse for at evaluere kalibreringen. Kontrollér, at kontrolværdierne ligger inden for de koncentrationsområder, der er anført i brugsanvisningen. Kalibratorer bør håndteres som hasteprøver. • Kalibreringsområde: 0,00 - 15.000,00 mIU/ml. • Rutine- og STAT-protokollerne skal kalibreres separat, men kun ét reagenssæt er påkrævet. 4 • ARCHITECT Total β‑hCG er kun valideret til tidlig påvisning af graviditet. Den er ikke godkendt til anden anvendelse, såsom screening for tumormarkører, monitorering af tumormarkører eller lignende, og den bør ikke anvendes til andet. • I sjældne tilfælde kan hCG-niveauerne forekomme forhøjede, hvilket bl.a. kan skyldes forekomst af:16,17,18,19,20,21 - heterofile antistoffer - uspecifik proteinbinding - hCG-lignende stoffer - trofoblastiske eller non-trofoblastiske neoplasmer • Som i enhver immunkemisk reaktion kan ukendte interferenser fra medikamenter eller endogene stoffer påvirke resultatet. • Forhøjet hCG-niveau har været forbundet med visse patologiske tilstande (f.eks. trofoblastiske og non-trofoblastiske neoplasmer),22,23 og resultatet fra denne analyse bør ikke anvendes til diagnose af disse tilstande. Ifølge litteraturen har der været tilfælde, hvor personer har modtaget unødvendig medicinsk behandling (bl.a. kemoterapi) og er blevet opereret unødigt (hysterektomi), fordi hCG-resultatet er blevet brugt til diagnosticering af abnorme tilstande. • Interfererende stoffer (såsom heterofile antistoffer, uspecifikke proteiner eller hCG-lignende stoffer) kan give enten falsk nedsatte eller forhøjede resultater. Sådanne interfererende stoffer kan forårsage falske resultater over hele analysens måleområde, og altså ikke bare i den lave ende, og angive forekomst af hCG, selv når der ingen forekomst er. • Påvisning af et meget lavt hCG-niveau udelukker ikke graviditet.18 Lavt hCG-niveau kan ses hos tilsyneladende raske kvinder, som ikke er gravide.24,25 Eftersom hCG-værdien fordobles ca. hver 48. time ved normal graviditet,18 vil det være nødvendigt at reteste kvinder med et meget lavt hCG-niveau efter 48 timer på nye blodprøver. • Prøver fra postmenopausale kvinder kan udvise et svagt positivt resultat på grund af et lavt hCG-niveau, som ikke skyldes graviditet. For svagt positive resultater er det god laboratoriepraksis (GLP) at udtage nye prøver 48 timer senere og teste dem eller at udføre en testning med en anden hCG-analysemetode. • På grund af analysens høje sensitivitet kan prøver, der var positive i de første dage efter befrugtningen, senere vise sig at være negative på grund af spontan abort. Spontan abort forekommer i 22% af alle klinisk upåviste graviditeter og i 31% af alle graviditeter.26 Det er god laboratoriepraksis at udtage nye prøver efter yderligere 48 timer og teste disse, hvis resultatet har været svagt positivt. • Prøver fra patienter, der i forbindelse med diagnosticering eller behandling har modtaget præparater indeholdende musemonoklonale antistoffer, kan indeholde humane anti-mus antistoffer (HAMA-effekt). Sådanne prøver kan udvise enten et falsk forhøjet eller falsk nedsat resultat, hvis de testes med analyser, hvori musemonoklonale antistoffer indgår.27,28 Sådanne prøver bør ikke testes med Abbott ARCHITECT Total β-hCG-analysen. • Heterofile antistoffer i humant serum kan reagere med immunglobulin i reagenset og dermed interferere med in vitro-immunanalyser.17,18,21 Denne interferens ses undertiden i prøver fra patienter, som ofte er i kontakt med dyr eller serumprodukter fra dyr, og afvigende resultater kan ses. Yderligere oplysninger kan være nødvendige til diagnosticering. Uger siden sidste menstruation 1 - 10 11 - 15 16 - 22 23 - 40 n 50 50 49 50 Min. <1,20 16.996 6.860 1.583 Maks. 417.430 247.465 50.239 65.911 Områder (mIU/ml) 2,5. percentil 202 22.536 8.007 1.600 97,5. percentil 231.000 234.990 50.064 49.413 Disse resultater er repræsentative data fra et studie. Det anbefales, at hvert laboratorium fastsætter sine egne forventede værdier. YDEEVNE Præcision ARCHITECT Total β‑hCG-analysen er udviklet til at have en præcision på < 10% (total CV). Der blev udført et studie af ARCHITECT Total β‑hCGanalysen baseret på CLSI’s (Clinical and Laboratory Standards Institute, tidligere NCCLS) dokument EP5-T2. 31 Et panel bestående af 3 prøver i forbehandlet humant serum blev testet i dobbeltbestemmelse med 2 reagenslot 2 gange dagligt i 20 dage. Data fra denne undersøgelse er opstillet i følgende tabel.* InPanel- Reagens- strumedlem lot ment 1 1 1 1 1 2 1 2 1 1 2 2 2 1 1 2 1 2 2 2 1 2 2 2 3 1 1 3 1 2 3 2 1 3 2 2 n 80 80 80 80 80 80 80 80 80 80 80 80 Middel konc.værdi (mIU/ml) 21,07 24,97 25,22 24,75 735,93 772,66 750,99 754,87 5.063,95 5.116,40 4.976,44 5.052,13 Intraseriel SD %CV 0,984 4,7 0,880 3,5 1,027 4,1 0,819 3,3 14,917 2,0 12,161 1,6 13,812 1,8 11,762 1,6 84,801 1,7 72,066 1,4 98,439 2,0 59,656 1,2 Total SD %CV 1,027 4,9 1,115 4,5 1,134 4,5 1,096 4,4 18,144 2,5 14,671 1,9 16,065 2,1 12,592 1,7 107,073 2,1 86,052 1,7 109,379 2,2 79,602 1,6 * Repræsentative data. Laboratoriets resultater kan afvige fra disse data. Genfindelse ARCHITECT Total β‑hCG-analysen er udviklet til at have en gennemsnitlig genfindelsesprocent på 100 ± 10% ved testning af prøver, der er tilsat kendte mængder β-hCG. 8 humane serumprøver blev tilsat en kendt hCG-koncentration (1.000,45 mIU/ml). β-hCG-koncentrationen blev bestemt med ARCHITECT Total β-hCG-analysen, og den deraf resulterende genfindelsesprocent blev udregnet. Genfindelsesprocenten for ARCHITECT Total β-hCG-analysen lå fra 104,1 til 108,8% med et gennemsnit på 106,7%. Dette er repræsentative data. Laboratoriets resultater kan afvige fra disse data. Fortyndingsverifikation Nøjagtigheden af ARCHITECT Total β-hCG-analysens automatiserede fortyndingsprocedure blev evalueret ved brug af humane serumprøver. Resultaterne af automatisk 1:15-fortyndede prøver, der var blevet testet i dobbeltbestemmelse, blev sammenlignet med resultater fra de samme prøver, der var fortyndet i forholdet 1:15 med ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent. Ydeevnen blev evalueret i form af genfindelsesprocent og blev beregnet ved hjælp af følgende ligning:* FORVENTEDE VÆRDIER Eftersom hCG normalt syntetiseres og secerneres fra placentaceller eller et forstadium deraf, er hormonniveauet hos raske og ikke-gravide kvinder enten meget lavt eller slet ikke målbart.22 β-hCG-koncentrationen i serum hos ikke-gravide kvinder er i henhold til litteraturen < 5 mIU/ml.29 β-hCG-koncentrationen i serum hos gravide kvinder stiger kraftigt tidligt i graviditeten. Et β-hCG-niveau på mellem 5 og 25 mIU/ml kan tyde på tidlig graviditet.2,30 β-hCG-værdien topper normalt i det første trimester og falder derefter langsomt i den resterende del af graviditeten. Prøver fra 199 gravide kvinder er blevet delt op i 4 kategorier i forhold til, hvor mange uger der var gået siden sidste menstruation (1-10, 11-15, 1622, 23-40), og er blevet testet med ARCHITECT Total β-hCG-analysen. Resultaterne er opstillet i følgende tabel. Genfindelsesprocent = 5 Automatisk fortyndet β‑hCG-konc. (mIU/ml) x 100 Manuelt fortyndet β‑hCG-konc. (mIU/ml) Prøve A B C D E BIBLIOGRAFI Manuelt fortyndet Automatisk fortyndet β‑hCG-konc. β‑hCG-konc. Genfindelses(mIU/ml) (mIU/ml) procent 98.488,05 102.152,34 103,7 27.534,10 27.199,45 98,8 47.730,65 46.994,66 98,5 13.413,25 13.438,39 100,2 10.391,55 9.463,34 91,1 1. Felig P, Baxter JD, Broadus AE, Frohman LA, eds. Endocrinology and Metabolism (2nd Ed.), New York: McGraw-Hill Book Co. 1987:253. 2. Braunstein GD, Rasor J, Adler D, Danzer H, Wade ME. Serum Human Chorionic Gonadotropin Levels Throughout Normal Pregnancy. Am J Obster Gynecol 1976: 126:678-81. 3. Brody S, Carlstrom G. Immunoassay of Human Chorionic Gonadotropin in Normal and Pathologic Pregnancy. J Clin Endocrinol Metab 1962;22: 564-74. 4. Lab Report For Physicians. Standardization of Human Chorionic Gonadotropin. December 1985; 7:92-4. 5. Swaminathan N, Bahl OP. Dissociation and Recombination of the Subunits of Human Chorionic Gonadotropin. Biochem Biophys Res Commun 1970; 40:422-7. 6. Human Reproduction Unit, World Health Organization, Geneva, Switzerland. Assay of Protein Hormones Related to Human Reproduction: Problems of Specificity of Assay Methods and Reference Standards. Acta Endocrinol 1972; 71:625-37. 7. Ross GT. Clinical Relevance of Research of the Structure of Human Chorionic Gonadotropin. Am J Obstet Gynecol 1977; 129:795-805. 8. Saxena BB, Landesman R. Diagnosis and Management of Pregnancy by the Radioreceptor Assay of Human Chorionic Gonadotropin. Am J Obstet Gynecol 1978; 131:97-107. 9. Manganiello PD, Nazian SJ, Ellegood JO, McDonough PG, Mahesh VB. Serum Progesterone, 17 α-Hydroxyprogesterone, Human Chorionic Gonadotropin, and Prolactin in Early Pregnancy and a Case of Spontaneous Abortion. Fertil Steril 1981; 36:55-60. 10. Kadar N, DeVore G, Romero R. Discriminatory hCG Zone: Its Use in the Sonographic Evaluation for Ectopic Pregnancy. Obstet Gynecol 1981; 58:156-61. 11. Kadar N, Caldwell BV, Romero R. A Method of Screening for Ectopic Pregnancy and Its Indications. Obstet Gynecol 1981; 58:162-6. 12. US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part 1910.1030, Bloodborne pathogens. 13. US Department of Health and Human Services. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; December 2009. 14. World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed. Geneva: World Health Organization; 2004. 15. Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline—Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2005. 16. Cole L A. Phantom hCG and phantom choriocarcinoma. Gynecol Oncol, 1998;71:325–9. 17. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34:27-33. 18. Hussa RO. The Clinical Marker hCG, Westport CT: Praeger Publishers. 1987: 77-95, 137-50. 19. Hussa RO, Rinke ML, Schweitzer PG. Discordant human chorionic gonadotropin results: causes and solutions. Obstet Gynecol, 1985;65:211–9. 20. Mishalani SH, Seliktar J, Braunstein GD. Four Rapid Serum-Urine Combination Assays of Choriogonadotropin (hCG) Compared and Assessed for Their Utility in Quantitative Determinations of hCG. Clin Chem. 40/10, 1944-1949 (1994). 21. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Chorionic gonadotropin Testing: Nomenclature, Reference Preparations, Assay Performance, and Clinical Application; Approved Guideline NCCLS Document 1/LA10-A, December 1996. 22. Braunstein GD, Vaitukaitis JL, Carbone PP, Ross GT. Ectopic Production of Human Chorionic Gonadotropin by Neoplasms. Ann Intern Med 1973; 78:39-45. 23. Hussa RO. Clinical Utility of Human Chorionic Gonadotropin and α-Subunit Measurements. Obstet Gynecol 1982; 60:1-12. 24. Alfthan H, Haglund C, Dabek J, Stenman U-H. Concentrations of human choriogonadotropin, its β-subunit, and the core fragment of the β-subunit in serum and urine of men and nonpregnant women. Clin Chem, 1992; 38:1981-7. 25. Borkowski A, Muquardt C. Human chorionic gonadotropin in the plasma of normal, nonpregnant subjects. N Engl J Med, 1979;301:298–302. * Repræsentative data. Laboratoriets resultater kan afvige fra disse data. Analytisk sensitivitet ARCHITECT Total β-hCG-analysen er udviklet til at have en analytisk sensitivitet på ≤ 1,2 mIU/ml. Analytisk sensitivitet defineres som koncentrationen ved 2 standardafvigelser fra den gennemsnitlige relative lysemission (RLU) fra ARCHITECT Total β-hCG Calibrator A (0,00 mIU/ml) og repræsenterer den lavest målbare koncentration af β-hCG, som er forskellig fra 0. Specificitet ARCHITECT Total β-hCG-analysen er udviklet til at have en gennemsnitlig analytisk specificitet på < 10% krydsreaktivitet med FSH, LH og TSH. Humane serumprøver indeholdende β-hCG blev tilsat 150 mIU/ml FSH, 250 mIU/ml LH og 100 μIU/ml TSH og testet for β-hCG. Krydsreaktiviteten blev beregnet som en procentvis interferens og viste sig at være mindre end 10% for hvert af de krydsreagerende stoffers vedkommende. Afsmitning Afsmitning fra en prøve, der indeholdt 1.000.000 mIU/ml β‑hCG, til en tilstødende prøve, som ikke indeholdt β‑hCG (0 mIU/ml), var mindre end 7,5 mIU/ml β‑hCG. BEMÆRK: Opmærksomheden henledes på, at individuelt forhøjede prøveværdier kan skyldes proteinophobning i prøveopsugningsnålen. Se kapitel 10 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om fejlfinding. Interferens ARCHITECT Total β‑hCG-analysen er udviklet til at have en potentielt interferens fra hæmoglobin, bilirubin, triglycerider og protein på < 10% ved de niveauer, der er angivet nedenfor. • • • • Hæmoglobin Bilirubin Triglycerider Protein - < 10% ved 500 mg/dl - < 10% ved 20 mg/dl - < 10% ved 3.000 mg/dl - < 10% ved 2 g/dl og 12 g/dl Korrelationsdata ARCHITECT Total β‑hCG-analysen har en hældning på 1,0 ± 0,15 og en korrelationskoefficient (r) på > 0,95 i området 0 - 15.000 mIU/ml i en sammenligning med AxSYM Total β‑hCG-analysen. Der blev foretaget en undersøgelse, hvor prøver blev testet med både ARCHITECT Total β‑hCG-analysen og AxSYM Total β‑hCG-analysen. Data fra denne undersøgelse blev analyseret under anvendelse af mindste kvadraters regressionsmetode og Passing-Bablok-regressionsmetoden.32 Resultaterne er opsummeret i nedenstående tabel.* Abbott ARCHITECT Total β‑hCG vs. Abbott AxSYM Total β‑hCG Metode Lineær regression ved mindste kvadraters metode Lineær regression ved PassingBablok** Antal prøver 93 192 471 AxSYMområde Hæld- Korrelations(mIU/ml) Skæring ning koefficient 3,40 1,00 0,945 21.0001 2 - 15.0002 58,34 0,89 0,980 0,986 2 - 200.0003 -672,30 0,82 93 192 471 21.0001 2 - 15.0002 2 - 200.0003 0,48 1,88 19,84 1,08 0,94 0,80 0,945 0,980 0,986 I denne undersøgelse lå serumprøver, som blev testet med ARCHITECT Total β-hCG-analysen, på: 11,99 til 1.262,17 mIU/ml, 21,99 til 14.934,93 mIU/ml, 31,99 til 180.620,00 mIU/ml. * Repræsentative data. Variabler, såsom forskelle i prøvemængde og -population, kan påvirke analysens korrelation. Derfor kan laboratoriets data afvige fra disse data. **En lineær regressionsmetode, der ikke forudsætter særlig fordeling af prøver og målefejl.32 6 26. Wilcox AJ, Weinberg CR, O’Connor JF, Baird DD, Schlatterer JP, Canfield RE, Armstrong EG, Nisula BC. Incidence of early loss of pregnancy. N Eng J Med 319:189-194, 1988. 27. Primus FJ, Kelly EA, Hansen HJ, Goldenberg DM. “Sandwich”-Type Immunoassay of Carcinoembryonic Antigen in Patients Receiving Murine Monoclonal Antibodies for Diagnosis and Therapy. Clin Chem 1988;34:261-4. 28. Schroff RW, Foon KA, Beatty SM, Oldham RK, Morgan AC Jr. Human Anti-Murine Immunoglobulin Responses in Patients Receiving Monoclonal Antibody Therapy. Cancer Res 1985;45:879-85. 29. Tietz NW, Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd Ed. 1995. p. 134‑136. 30. Lenton EA, Neal LM, Sulaiman R. Plasma Concentrations of Human Chorionic Gonadotropin from the Time of Implantation until the Second Week of Pregnancy. Fertil Steril 1982; 37:773-8. 31. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices - Second Edition; Tentative Guidelines. NCCLS Document EP5-T2. Villanova, PA: NCCLS, March 1992. 32. Passing H, Bablok W. A New Biometrical Procedure for Testing the Equality of Measurements from Two Different Analytical Methods. J Clin Chem Clin Biochem. 1983;21:709-20. ARCHITECT, AxSYM og Chemiflex er varemærker tilhørende Abbott Laboratories i visse jurisdiktioner. Abbott Ireland Diagnostics Division Lisnamuck, Longford Co. Longford Ireland +353-43-3331000 Distribueret i USA af Abbott Laboratories Abbott Park, IL 60064, USA Marts 2014 © 2006, 2014 Abbott Laboratories 7
© Copyright 2024