Charlotte Dahle, ANA-diskussion, ANCA och IU passar inte
PR3-ANCA och IU passar inte ihop Charlotte Dahle Klinisk immunologi Universitetssjukhuset Linköping Princip oavsett metod Serum med ANCA Y Y Y YY YY Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y IF-ANCA Y Y Blot YY Y Y Y ELISA Multiplex Detektion av PR3-ANCA • Olika metoder ger olika resultat Beror på vilka epitoper som exponeras i testen ANCA epitoper 25 epitoper 7 epitoper 4 epitoper Diagnos Prognos Terapi PR3 C-ANCA 1985 2013 Van der Woude...........................................................Roth Proteinas 3 • PR3 – serin proteas • Olika patienter har ak mot olika epitoper • Ett mönster under ett skov • Ibland nytt mönster vid nytt skov Proteinas 3 PR3 - ett proteas (alpha 1 antitrypsin är inhibitor) Alfa-1-antitrypsinbrist värre sjd vid PR3-ANCA vaskulit ANCA med vissa specificiteter kan hämma enzym aktivitet eller blockera bindning till alfa-1-antitrypsin ELISA capture/sensitive eller direkt? Monoklonala antikroppar mot PR3 PR3G-3 4A5 WGM2 WGM3 4A3 MC-PR3-2 Hz1F12 12.8 PR3G-2 6A6 PR3G-4 PR3G-6 PR3 MABs % inhibition av patient sera 4A5 39 6A6 11 4A5 and 4A3 22 None of the mabs 28 Sommarin 1994, Van der Geld et al. 1999 Epitopspridning under sjukdomsförlopp At diagnosis At relapse Rarok et al. 2003 Vilken metod bör användas för screening? IF eller ELISA för screening? Epidemiologisk studie i Skåne • Uppföljning av alla positiva ANCA-resultat 1997-2003 (analyserade vid 2 lab) • Retrospektiv journalgenomgång för diagnos • Lab 1 IF: 227 positiva, 29 med vaskulit – (annan diagnosis 174, ingen diagnosis 25) • Lab 2 ELISA: 77 positiva, 50 med vaskulit – (annan diagnosis 16, ingen diagnosis 11) Mohammad et al. Rheumatology (Oxford), 2007 Capture PR3-ANCA international jämförelse Medelvärde från 6 lab, 60 patienter och 60 kontroller Teknik Direkt Capture Sensitivitet % 64 Specificitet % 99 74 100 Csernok Rheumatology 2004; 43:174 Vilken metod är bäst för PR3-ANCA? • capture- eller sensitive teknik eller motsvarande • direkt ELISA • IF-screening (C-/P-ANCA) • Blot Ingen metod är heltäckande! Utsvarning av resultat • PR3-ANCA besvaras i IU/ml • CDC-reference serum (IS 2721) • Frystorkat serum från en patient med PR3-ANCA vaskulit dvs ak mot vissa epitoper • Godkänd av “International standardisation committee of autoantibodies in Rheumatic and related disorders” Viktigt att komma ihåg Resultaten varierar mellan olika metoder även om resultaten anges i IU/ml! Bakgrund till fallbeskrivning • Läkaren på aktuell klinik var van vid PR3-ANCAresultat från Wieslab (capture-ELISA) . Metoden ger ofta resultat >200 IU/mL (ref <7,0) • 50 årig kvinna utreds pga oklar njurpåverkan • PR3-ANCA beställs. Serum skickas till ett “nytt” rutinlab som analyserar PR3-ANCA med Phadia sensitive teknik. Resultat: PR3-ANCA 26 IU/mL (ref <2,0) • Med “Wieslab ögon” är det ett lågt värde och vaskulitmisstanken tonas ner. • 2 veckor senare inkommer patienten akut med lungblödningar. • Ny provtagning och provet skickas både till Wieslab och laboratoriet som analyserar med Phadia sensitive teknik. Resultat PR3-ANCA – Wieslab: 226 IU/ml – Phadia: 40 IU/ml PR3-ANCA med Phadias sensitive-metod ger andra numeriska värden än Wieslabs capture-metod CapPR3 Wieslab vs PR3s Phadia y = 0,3727x R2 = 0,3604 PR3s Phadia 500 400 Serie1 300 Linjär (Serie1) 200 Linjär (Serie1) 100 0 0 100 200 300 400 500 600 CapPR3 Wieslab CapPR3 Wieslab vs PR3s Phadia låga nivåer y = 0,4662x R² = 0,5121 120 100 80 60 40 20 0 Serie1 Linjär (Serie1) 0 20 40 60 80 100 120 140 160 50 PR3s Phadia PR3s Phadia CapPR3 Wieslab vs PR3s Phadia lågt område y = 0,5947x R2 = 0,146 40 30 Serie1 20 Linjär (Serie1) 10 0 0 CapPR3 Wieslab 10 20 30 CapPR3 Wieslab 40 50
© Copyright 2024