1. No category

Urinproteinelektrofores
Lars-Olof Hansson
Mobile:
+46-73-5012340
email:
[email protected]
Nefronets uppbyggnad
Njurfunktion
Faktorer av betydelse för utsöndring av proteiner i urin

Glomerulär filtration av proteiner
Glomeruli membranets permeabilitet
Proteinets storlek, form och ytladdning
Filtrationstrycket
Blodflödet genom glomeruli

Tubulär resorbtion av proteiner
Flödet av primärurin
Primärurinens proteinkonc.
Tubulicellernas funktion
Indikationer för analys av proteiner i urin

Glomerulära skador - sjukdomar

Streptokockinfektioner

Diabetes

Hypertoni

Graviditet - Graviditetstoxikos

Myelom - lymfoproliferativa sjukdomar

Oklar hypogammaglobulinemi

Tubulära skador - sjukdomar

Tungmetallförgiftning

Hereditära tubuli funktions nedsättningar
Typ av proteinuri

Prerenal-overflow proteinuri
Ökad plasma konc av något specifikt protein
Fria kappa - lambda
Komplett immunoglobulin
Hemoglobin
Myoglobin
b2-mikroglobulin
Lysozym
Orosomukoid

Glomerulär proteinuri
Selektiv
Ökning av porteiner med MV < 100 KDa
Albumin, Transferrin, Orosomukoid
Alfa-1-Antitrypsin etc.
Oselektiv
Ökning också av porteiner. med MV > 100 KDa
IgG, IgA, Haptoglobin etc.

Tubulär proteinuri
Ökad utsöndring av proteiner i urin vid
intakt glomeruli membran.
a1-mikroglobulin
NAG - n-acetylglukosaminidas
Fria kappa -lambda (lätta Ig-kedjor)
Cystatin C
b2-mikroglobulin
Albumin
Tamm-Horsefall

Postrenal
Vid infammationer i urinblåsan och vid blåstumörer.
Immunoglobuliner
Albumin etc.
Hemoglobin
Låggradig albuminuri / Mikroalbuminuri
20 - 200 µg/min
20 - 200 mg/L
≈ 30 - 300 mg/d
Glomerulär albuminuri
Graden av albuminuri beror på graden av permiabilitetsrubbning
i glomeruli samt antalet skadade men fungerande glomeruli.
Av viss betydelse är också albumin konc i plasma
ffa när denna är kraftigt sänkt.
Lätt albuminuri
Måttlig albuminuri
Kraftig albuminuri
< 1000 mg/L
1500 mg/d
1000 - 4000 mg/L 1500 - 6000 mg/d
> 4000 mg/L
> 6000 mg/d
Tubulär albuminuri
Tmax för protein = 0.15 - 0.30 mg/min ( 200 - 400 mg/d)
Konkurrens mellan olika proteiner vid reabsorbtionen.
Vid tubulär skada ses en lätt ökad albuminutsöndring i urinen
vanligen 50 - 500 mg/d.
U-IgG
IgG har en molekylmassa 150 kDa dvs ca 2,5 x albumin
En viktig faktor för filtrationen av molekyler genom
glomerulimembranen utgör molekylens storlek
En ökning av U-IgG ses vid glomerulär proteinuri
Ju mer U-IgG som utsöndras ffa i relation till U-Albumin
ju mer oselektiv är den glomerulära skadan
Referensintervall
U-IgG
<10 mg/L,
10 µg/min, 15 mg/dygn
U-IgG / U-Albumin kvot:0,1 - 0,57
(0,096 - 0,569)
Fria lätta Ig-kedjor, kappa (k) och lambda (l)
MV 22 - 44 - 66 kDa
Passerar fritt genom glomeruli, reabsorberas i proximala tubuli
Tmax.
Ref. intervallet i urin är ≤ 10 mg / L av polyklonala lätta kedjor.
Utsöndring av både polyklonala kappa och lambda vid
tubulär skada och uremi
Ökad utsöndring av monoklonala lätta kedjor är patologiskt
Bence-Jones proteinuri
AL-Amyloidos
a1-Mikroglobulin = HC-protein
MV 27 kDa
Referensintervall:
Plasma ca < 30 mg/L (fritt a1-Mikro)
Urin
<10 mg/L
Plasma konc korrelerar med GFR.
Ofta i komplex med albumin el IgA.
Ökar ej i konc vid inflammatoriska sjukdomar.
Filtreras relativt fritt genom glomeruli.
Normalt reabsorberas > 99.8 % i prox tubuli.
a1-Mikro bryts troligen ej ner i urinen.
3.0
20
mg/L
Kombinerad
tubulär och
kraftig
glomerulär
proteinuri
Lätt
glomerulär
proteinuri
Kraftig
glomerulär
proteinuri
10
Tubulär
proteinuri
Kombinerad
tubulär och
lätt
M åttlig
glomerulär
proteinuri
1.0
100
10
Normalt
1
1
Låggradig
albuminuri
10
100
30 mg/L
M åttlig
1000
200 mg/L
U-Albumin
U-HC/krea mg/mmol
U-afla1-mikroglobulin
U-HC mg/L
1000
400 mg/mmol
100
U-Albumin/kreatinin mg/mmol 1.0
10000 mg/L
4000 mg/L
Beställning och bedömning av U-Proteiner
Karolinska sjukhuset
Pt(U)-Proteinfraktioner
KS
Referensintervall
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
U-Albumin
U-Immunglobulin G
U-Protein HC
U-Kappakedjor
U-Lambdakedjor
Pt(U)-Albumin, dygn
U-Alb/Krea, dag
U-IgG/Krea
U-Protein HC/Krea
U-Kappakedjor/Krea
U-Lambdakedjor/Krea
< 20 mg/L
< 10 mg/L
< 12 mg/L
< 10 mg/L
< 10 mg/L
< 30mg/d
< 5,0 mg/mmol
< 0,8 mg/mmol
< 0,7 mg/mmol
saknas
saknas
Bedömning av U-Proteiner KS
• Kontrollerar uppgifter om tid och volym
• Bedömer förekomst av glomerulär proteinuri. Selektiv/oselektiv.
• Bedömer tubulär proteinuri.
• Bedömer förekomst av M-komponent, komplett eller lätta kedjor.
• Monoklonala lätta immunglobulinkedjor påvisas med immunfixation om kvoten
mellan U-Kappa och U-Lambda avviker från det normala, dvs är < 1 eller > 3
(förutsatt att U-Kappa eller U-Lambda är > 10 mg/L.
• Vid normala nivåer av både kappa- och lambdakedjor är det sällan indicerat att
immunfixera, såvida inte amyloidosfrågeställning föreligger eller kunden beställt
immunfixation.
KS
Ref.
Lätt
Måttlig
Kraftig
U-Albumin
dygn
<30mg/d
30-100
1000-4000
>4000
U-Albumin
<20mg/L
20-1000
1000-4000
>4000
U-IgG
<10mg/L
U-protein HC
<12mg/L
Ökad nivå innebär oselektiv glomerulär
proteinuri.
12-50
50-100
>100
Sahlgrenska sjukhuset
Sahlgrenska
• På Klinisk kemi Sahlgrenska har vi slutat med en sedvanlig
urinelektrofores, och utför istället immunfixation av alla prov där
”urinelektrofores” beställts.
• Vi kvantifierar endast U-protein HC och U-IgG på extra beställning.
Sahlgrenska
•
Vi använder EQUALIS referensgränser.
•
Vi värderar albuminutsöndringen: Lätt albuminuri 30 - 300 mg/24 timmar och glomerulär
proteinuri >300 mg/24 timmar.
•
•
•
U-tidsperiod insamling
U-volym 24 timmar
U-kreatinin/L
•
•
•
•
U-albumin/L
tU-albumin/24 timmar
U-albumin/min
U-albumin/kreatinin
•
•
•
U-kappa/L
tU-kappa/24 timmar
U-kappa/kreatinin
•
•
•
U-lambda/L
tU-lambda/24 timmar
U-lambda/kreatinin
Sahlgrenska
”Bedömningarna har blivit enklare och säkrare att påvisa BenceJones proteinuri, vilket vi av och till upptäcker även när kvantifieringar
av kappa eller lambda är under detektionsgränserna (kan var viktigt
fynd vid t.ex. amyloidosmisstanke).
Dessutom får vi ytterligare information såsom utsöndring av hel Mkomponent, utsöndring av polyklonala tunga kedjor som
vid oselektiv glomerulär proteinuri (vi kvantifierar inte U-IgG), och
tecken på tubulär proteinuri om immunfixation visar polyklonala lätta
kedjor (förutsatt att inte glomerulär proteinuri också föreligger).”
Akademiska sjukhuset
Akademiska sjukhuset
Urinelfores
kan beställas som stickprov eller dygnsmängd, stickprov vanligast
U-Albumin
U-Kappa
U-Lambda
U- Kreatinin för kvoter
Bedöms kvantitativt.
Skickar U-elfores och U-imfix till andra lab.
Lätta kedjor i urin
kan beställas som stickprov eller dygnsmängd.
U-Kappa
U-Lambda
U- Kreatinin för kvoter.
Akademiska sjukhuset
U-Protein HC
kan beställas som stickprov eller dygnsmängd
U-Protein HC
U-Kreatinin för kvoter.
U-Albumin
kan beställas som stickprov eller dygnsmängd
U-Albumin
U-Kreatinin för kvoter.
Region Skåne
Region Skåne
U-proteinprofil
U-kreatinin
U-Albumin/krea-kvot
U-IgG/Krea-kvot
U-Kappa/krea-kvot
U-lambda/krea-kvot
U-Protein HC/krea-kvot
U-kappa (mg/L) ev dygnsmängd bifogas som kommentar
U-lambda(mg/L) ev dygnsmängd bifogas som kommentar
Region Skåne
U-elfores utförs ej
U-Immunofixation - avgörs av bedömande läkare
Karlstad och Gävle
Karlstad och Gävle
•
•
•
•
U-Albumin
U-Kappa
U-Lambda
U-Kreatinin
• U-elektrofores på ca 100 X konc urin (Gävle)
• U-immunofix av nya M-komp i urinen eller vid tveksamheter, inte
om solklart att det är en Kappa eller Lambda M-komp.
Karlstad och Gävle
Vi analyserar på dygnsmängd (tidssamlad), morgonurin eller stickprov
Svaret innehåller:
• U-Alb
mg/L
• U-Alb
mg/d
• U-Alb/Krea
g/mol
utan ref intervall
• U-Kappa
• U-Kappa
• U-Kappa/Krea
mg/L
mg/d
g/mol
utan ref intervall
• U-Lambda
• U-Lambda
• U-Lambda/Krea
mg/L
mg/d
g/mol
utan ref intervall
• U-Kappa/Lambda
Karlstad och Gävle
• Bedömer Albuminurigraden (glomerulär proteinuri):
Låggradig 20-200 mg/L,
Lätt 200 - 1000 mg/L,
Måttlig 1000 - 4000 mg/L
Kraftig >4000 mg/L
• Bedömer kappa o lambda o M-komp om sådant finns
• Har skippat oselektiv glomerulär proteinuri och tubulär proteinuri!
Karlstad och Gävle
Analyserna kommer att utföras på både stickprov och hel dygnsmängd.
Kvantiteringarna av de enskilda proteinerna kommer att ges dels i mg/L, mg/d och i g/mol
kreatinin.
Referensintervall:
Stickprov mg/L
Dygn mg/d
g/mol kreatinin
U-Albumin
<20
<30
Saknas
U-Kappa
<10
<15
Saknas
U-Lambda
<10
<15
Saknas
U-Kappa/U-Lambda ratio
0.7-6.2
0.7-6.2
Karlstad och Gävle
Tolkning av U-Kappa/U-Lambda ratio
Ett kappa/lambda (K/L) ratio >6.2 indikerar förekomst av monoklonal kappa kedja.
Ett K/L ratio <0.7 indikerar förekomst av monoklonal lambda kedja.
En >90%-ig ökning av koncentrationen indikerar progress eller relaps.
En >90%-ig sänkning av En >90%-ig ökning av koncentrationen indikerar regress
och svar på behandlingen.
Karlstad och Gävle
Ett normalt kappa/lambda (K/L) ratio utesluter inte ett monoklonalt
proteinband, och ett onormalt ratio är inte liktydigt med ett monoklonalt
proteinband.
Urinelektrofores och immunofixation är mer sensitivt och mer specifikt.
Ökade koncentrationer av kappa och/eller lambda kedjor kan ses vid
både benigna (polyklonal) och maligna (monoklonal) sjukdomar.
Om ratiot U-kappa/lambda är mellan 1-4 talar det oftast för en ökad
utsöndring av polyklonala fria kappa-och lambdakedjor och/eller
polyklonalt komplett immunglobulin. Den fysiologiska bakgrunden är
ofta en pågående immuniseringsprocess, en tubulär proteinuri eller en
oselektiv glomerulär proteinuri.
Glomerulär proteinuri
Tubulär proteinuri
M-komponenter
Light chain disease
Urinimmunfixation
Sahlgrenska
Utsöndring av polyklonala tunga kedjor som tecken på
oselektiv glomerulär proteinuri. Dessutom förekomst av
polyklonala lätta kedjor sannolikt associerade med
utsöndringen av polyklonala tunga kedjor. Inga
monoklonala fria lätta kedjor påvisade dvs. inga hållpunkter
för Bence-Jones proteinuri (immunfixation utförd).
Urinimmunfixation
Sahlgrenska
Utsöndring av monoklonala fria lätta kedjor
typ lambda, dvs. Bence-Jones proteinuri
(immunfixation utförd).
(Värt att notera: Bence-Jones påvisat trots att
U-lambda kvantifierats < 4 mg/L dvs. under
BNProsPec lägsta kvantifieringsgräns)
Utsöndring av monoklonala
fria lätta kedjor typ kappa,
dvs. Bence-Jones proteinuri
(immunfixation utförd).
Urinimmunfixation
Sahlgrenska
Utsöndring av monoklonala tunga kedjor och lätta kappa-kedjor, såsom vid utsöndring av hel
M-komponent, sannolikt av typ IgG-kappa vilket patienten har i serum.
Dessutom tecken på oselektiv glomerulär proteinuri (utsöndring av polyklonala tunga kedjor
synliga vid immunfixation).