1. No category

04.02.2015
Kromatografi
Kirsten M Olsen
Avdeling for rusmiddelforskning og metodeutvikling Folkehelseintituttet
Kromatografi benyttes til:
Først og fremst til å separere stoffer fra hverandre ved at de vandrer med forskjellig hastighet i et system med en mobil‐ og en stasjonær fase.
Et stoff veksler mellom å være I mobilfasen og bundet tilsatsjonærfasen.
Kvalitativ identifisering: Sammenligne stoffenes retensjonstider med kjente
standarder.
Kvantitativ bestemmelse v.h.a. kalibreringskurver
1
04.02.2015
Kromatografiske metoder
• Kromatografisk separasjon
–
–
–
–
Gasskromatografi
Væskekromatografi
Tynnsjiktskromatografi
Papirkromatografi
2
04.02.2015
3
04.02.2015
Kromatogram.
• BAC1
• Retensjonstid:
•
•
•
•
Metanol: 0,9 min
Etanol: 1,2 min
Aceton: 1,7 min N‐propanol: 1,9 min
• Relativ Retensjonstid
•
•
•
Metanol: 0,9/1,9 = 0,474
Etanol: 1,2/1,9 = 0,632
Aceton: 1,7/1,9 = 0,895
Viser prinsippet av en TLC‐
separasjon
•
4
04.02.2015
• Gasskromatografi
Vanligvis helium
GC-kolonne = 15-30 meter lang
9
• Væskekromatografi
LC-kolonne = 2-30 centimeter lang
10
5
04.02.2015
Kromatografiske metoder
• Detektorer
FID
NPD
UV
Fluoresens
Massespektrometri
TOF
Prinsipp for MS
• Danner og analyserer ioner
– stoffet ioniseres og spaltes (fragmenterer)
• Analyserer i vakuum (gassfase)
• Svært spesifikk teknikk
 veier ioner! Derav navnet
massespektrometri
12
6
04.02.2015
Analyse med TOF
• Gir en meget sikker identifikasjon av komponenter og baserer seg på:
• Eksakt masse
• Retensjonstid
• Spektertreff
• Isotopfordelingsmønster
7