Medicinsk service
Gäller from
Metodbeskrivning
Godkänd av:
2016‐03‐01
Revision
12
Sida
1(4)
tU-Metoxykatekolaminer
Gäller för
LU
Klinisk kemi
Pt(U)-Metoxykatekolaminer på LCMSMS
Pt(U)-3-MA/Kreatinin (NPU10002)
Pt(U)-3-MNA/Kreatinin (NPU10003)
Bakgrund, indikation och tolkning
Adrenalin och noradrenalin är biogena aminer vilka ffa syntetiseras i binjuremärgen resp.
sympatiska nervsystemet. Såväl adrenalin som noradrenalin metaboliseras huvudsakligen i
lever och njurar. De kvantitativt dominerande metaboliterna i urinen utgörs av
metoxyadrenalin, metoxynoradrenalin samt 3-metoxy-4-hydroxymandelsyra (VMA,
vaniljmandelsyra); koncentrationen av VMA i urin är cirka 100 ggr större än utsöndringen av
de oförändrade katekolaminerna och dessutom betydligt mindre labil. Då utsöndringen ofta
varierar är det lämpligt att samla tre konsekutiva dygnsmängder för att få ett bättre mått på
den totala produktionen av katekolaminer. Analyserna utförs vid misstanke på
feokromocytom, neuroblastom och besläktade tumörer.
Analysprincip
Efter sur hydrolys av urinen genom kokning med saltsyra, tillsätts internstandard (deutererad
metoxyadrenalin och metoxynoradrenalin) och komplexbildare. Provet renas med hjälp av
fast fas extraktion och analyseras därefter med vätskekromatografi kopplad till en s.k. ”trippel
quadropole” masspektrometer. Masspektrometern separerar komponenter baserat på deras
kvot mellan massa/laddning (m/z).
Provet joniseras med elektrospray-teknik. De joniserade komponenterna passerar därefter
genom masspektrometerns tre quadropoler. Quadropole 1 (Q1) är ett massfilter och separerar
ut en specifik jon (s.k. moderjon) från vardera metoxyadrenalin och metoxynoradrenalin. Till
quadropole 2 (Q2), som är en kollisionscell, går endast respektive utvald moderjon från Q1. I
Q2 fragmenteras moderjonen. Dessa fragment, s.k. dotterjoner, går vidare till quadropole 3
(Q3) som liksom Q1 är ett massfilter. Q3 sorterar ut två specifika dotterjoner från respektive
moderjon.
Är kvoten mellan de två dotterjonerna inom fastlagda gränser är en interferens mycket
osannolik. Koncentrationen av respektive substans baseras på att en av de uppmätta
dotterjonerna relateras till den interna standarden.
Utarbetad av
Dokumentförvaltare
Dokument id
C-3529
Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.
Medicinsk service
Gäller from
Metodbeskrivning
Godkänd av:
2016‐03‐01
Revision
12
tU-Metoxykatekolaminer
Gäller för
LU
Klinisk kemi
Referensintervall
tU-Metoxynoradrenalin (tU-MNA)
Barn
0-1 år
80-1400 µmol/mol kreatinin
1-2 år
80-1200 -"-
2-3 år
80-600
-"-
3-5 år
80-500
-"-
5-15 år
80-400
-"-
80-360
-"-
Vuxna
tU-Metoxyadrenalin (tU-MA)
Barn
0-1 år
20-1200 µmol/mol kreatinin
1-2 år
20-1000 -"-
2-3 år
20-500
-"-
3-5 år
20-300
-"-
5-15 år
20-250
-"-
20-200
-"-
Vuxna
Källa för referensintervall:
Vuxna:
Eget material, frisk laboratoriepersonal.
Barn:
Eget material, barn från Barn klin, MAS och Lunds lasarett.
Ursprunglig metod införd i mitten av 60-talet.
Metodkarakteristika
Interferenser och felkällor
Enligt egen utredning okt -93 påverkas inte resultaten märkbart av bristande surgörning.
Enligt all tillgänglig referenslitteratur är dock syratillsats nödvändig, varför det markeras i
svaret om surgörningen varit otillräcklig, men analysen utförs ändå.
Utarbetad av
Dokumentförvaltare
Dokument id
C-3529
Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.
Sida
2(4)
Medicinsk service
Gäller from
Metodbeskrivning
Godkänd av:
2016‐03‐01
Revision
12
Sida
3(4)
tU-Metoxykatekolaminer
Gäller för
LU
Klinisk kemi
Enligt litteraturreferens (Clin Chem 2002; 48:3, 533-539) ger acetaminophen upp till 50 mg/L
ingen interferens. Inte heller följande substanser som är kända för att interferera med HPLCmetoder interfererar med LC-MS/MS:
Chlorpromazine, desipramine, ephedrine sulfate, epinephrine, norepinephrine och dopamine.
Mätområde
Mätområdet är 0,1-80 µmol/L. Vid koncentrationer >80 µmol/L späds provet 1:10 med HCl
0,1 mol/L. Mätområdet är då 0,1-800 µmol/L.
Detektionsgräns
Lägsta detektionsnivå är 0,1 µmol/L.
Mätosäkerhet
Mätosäkerheten är grundad på 6-månaders statistik av internkontrollerna
Metoxyadrenalin:
Nivå 0,60 µmol/L, CV = 5,0 %
Nivå 3,00 µmol/L, CV = 5,0 %
Metoxynoradrenalin:
Nivå 1,90 µmol/L, CV = 6,0 %
Nivå 6,50 µmol/L, CV = 6,0 %
Spårbarhet
Kalibrator BioRad Biogenic Amines, art nr 195-5384.
Ackreditering
Metoden är ackrediterad.
Referenser
1.
Laurells Klinisk kemi i praktisk medicin pp 322-323Studentlitteratur. 9:e upplagan,
2012.
2.
Whiting MJ. Annals of Clinical Biochemistry 2009; 46: 129-136. Simultaneous
measurement of urinary metanephrines and catecholamines by liquid chromatography
with tandem mass spectrometric detection.
3.
Talwar D, Williamson C, McLaughlin A, Gill A, O’Reilly D. Journal of
Chromatography B, 769 (2002) 341-349. Extraction and separation of urinary
Utarbetad av
Dokumentförvaltare
Dokument id
C-3529
Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.
Medicinsk service
Gäller from
Metodbeskrivning
Godkänd av:
2016‐03‐01
Revision
12
Sida
4(4)
tU-Metoxykatekolaminer
Gäller för
Klinisk kemi
LU
catecholamines as their diphenyl boronate complexes using C18 solid-phase extraction
sorbent and high-performance liquid chromatography.
4.
Taylor R and Singh R. Clinical Chemistry 48:3 (2002) 533-539. Validation of Liquid
Chromatography-Tandem Mass Spectrometry Method for Analysis of Urinary
Conjugated Metanephrine and Normetanephrine for Screening of Pheochromocytoma.
Utarbetad av
Dokumentförvaltare
Dokument id
C-3529
Original lagras elektroniskt! Användaren ansvarar för att gällande revision används.