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Lieferumfang: 100 bp-DNA-Fluoro-Leiter,
50 µg in 500 µl [100 ng/µl]
Masse (ng) /
µg Marker
100 bp-DNA-Fluoro-Leiter
(ready-to-use)
100
100
100
100
100
150
Die Fragmente dieses Markers sind
vorgefärbt mit dem Fluoreszenzfarbstoff
EvaGreen®.
Die Herstellung erfolgte durch PCRAmplifikation auf Basis von
Lambdaphagen-Template-DNA. Nach
Amplifikation wurde die DNA gereinigt,
spektroskopisch vermessen und in den
angegebenen Mengen in den Marker
eingesetzt.
1
Fragmentgrößen
(in bp)
1000
900
800
700
600
500
400
300
200
100
1
DNA-Massen (ng/µl
Markerlösung)
10
10
10
10
10
15
10
10
10
10
Vor dem Hintergrund der Sequenziergenauigkeit
können wir bei der Angabe der Fragmentgrößen eine
Fehlerrate von <1 % garantieren.
100
100
100
100
Abbildung:
5 µl 100 bp-DNA-Fluoro-Leiter auf 2,4 % Agarose
Anwendung:
Unsere DNA-Fluoro-Leitern sind mit dem DNAFluoreszenzfarbstoff EvaGreen® vorgefärbt. Sie
können direkt auf ungefärbte Agarosegele
aufgetragen werden. Der Farbstoff EvaGreen®
hat nur eine geringe Membrangängigkeit und
ist daher weder mutagen noch toxisch. Er kann
durch UV-Licht und Blaulicht angeregt werden
und ersetzt gängige Farbstoffe wie
Ethidiumbromid oder SYBR® Green.
Die 100 bp-DNA-Fluoro-Leiter ist eine ideale
Ergänzung zu dem mit EvaGreen®
vorgefärbten Gelladepuffer Roti®-Load
DNAstain 2 (Best.-Nr. 5784).
®
EvaGreen : Biotium
®
SYBR : Molecular Probes
Der Marker ist gelöst in einfach konzentriertem
Gelladepuffer (Tris-HCl, pH 7,5, 10 mM;
EDTA 10 mM; Glycerin 10 %; EvaGreen®;
Orange G, Xylencyanol) und kann direkt
eingesetzt werden. Die Konzentration beträgt
1 µg DNA / 10 µl Markerlösung.
Probenauftrag:
Die übliche Beladung für MINI- oder MIDIGele beträgt 5 µl (500 ng) pro Spur.
Detektion:
Wir empfehlen Ethidiumbromid-Breitbandfilter
oder SYBR® Green-Filter.
 Anregungsmaximum (DNA-gebunden):
ca. 320 nm (UV), 470-500 nm (Blaulicht)
 Emissionsmaximum (DNA-gebunden):
525 nm
Lagerung:
Die optimale Lagerungstemperatur liegt bei
-20 °C. Wiederholtes (>10-mal) Auftauen und
Einfrieren schadet dem Marker und ist zu
vermeiden. Gegebenenfalls den Marker in
Portionen aliquotieren. Aktuell verwendete
Marker-Aliquots können kurzzeitig (einige
Wochen) bei +4 °C gelagert werden.
Vor Licht geschützt lagern!
Hinweise:
Die 100 bp-DNA-Fluoro-Leiter ist sehr gut
kombinierbar mit der 20 bp- oder der 50 bpDNA-Fluoro-Leiter (Best.-Nr. 8262 oder
8263). Man erhält eine vielfältig einsetzbare
Leiter für den kleinen Fragmentbereich.
100 bp-DNA-Fluoro-Leiter
8264.1
500 µl
Mass (ng) /
µg Marker
100
100
100
100
100
100 bp DNA Fluoro Ladder
150
(ready-to-use)
100
100
The fragments of this marker are
prestained with the fluorescent dye
EvaGreen®.
The marker was generated by PCR
amplification based on Lambda phage as
template DNA. Following PCR, the DNA
was purified, spectroscopically measured
and used for marker mixture in the
amounts given below.
Fragment sizes1
(in bp)
1000
900
800
700
600
500
400
300
200
100
DNA mass (ng/µl
marker solution)
10
10
10
10
10
15
10
10
10
10
1
Taking the sequencing accuracy as a basis, we can
guarantee an error rate of <1 % when indicating
fragment sizes.
Delivery includes: 20 bp DNA Fluoro
Ladder, 50 µg in 500 µl [100 ng/µl]
100
100
Figure:
5 µl of 100 bp DNA Fluoro Ladder on 2.4 % agarose
Application:
Our DNA Fluoro Ladders are prestained with
the fluorescent dye EvaGreen®. They are
optimised for direct loading on unstained
agarose gels. Due to the low membrane
permeability of the dye, the marker is non
mutagenic and non-toxic. It can be excited by
UV- and blue light making it a superior
replacement for the widely used dyes
ethidium bromide or SYBR® Green.
The 100 bp DNA Fluoro Ladder is an ideal
addition to the with EvaGreen® prestained
gel loading buffer Roti®-Load DNAstain 2
(Art. No. 5784).
The marker is solubilised in 1x concentrated
sample buffer (Tris HCl, pH 7.5, 10 mM;
EDTA 10 mM; glycerol 10 %; EvaGreen®;
orange G, xylene cyanole) and may be
applied directly to the gel. The concentration
is 1 µg DNA / 10 µl marker solution.
®
EvaGreen : Biotium
®
SYBR : Molecular Probes
Sample application:
The standard loading of MINI or MIDI gels is
5 µl (500 ng) per lane.
Detection:
We recommend use of broadband ethidium
bromide or SYBR® Green foto filters.
 Excitation maximum (bound to DNA):
ca. 320 nm (UV), 470-500 nm (blue light)
 Emission maximum (bound to DNA):
525 nm
Storage:
Optimal storage temperature is -20 °C.
Repeated (>10 times) thawing and freezing
will damage the marker and should be
avoided. If necessary aliquote the marker in
portions. Short term storage (few weeks) may
be done at +4 °C. Store in the dark!
Please note:
The 100 bp DNA Fluoro Ladder is highly
compatible with the 20 bp or 50 bp DNA
Fluoro Ladder (Art. No. 8282 or 8263). They
result in a versatile range of DNA marker
bands for analysis of small DNA fragments.
100 bp DNA Fluoro Ladder
8264.1
500 µl
Carl Roth GmbH + Co. KG
Schoemperlenstraße 3-5
76185 Karlsruhe
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e.d. 12/2014