NIPPON GENE CO., LTD. URL http://www.nippongene.com ホットスタート PCR 用耐熱性 DNA ポリメラーゼ Code No. 313-07044 319-07041 315-07043 Hot-Start Gene Taq 容量 50 units 250 units 250 units×4 Chemically-Modified Hot-Start DNA Polymerase 保存－20℃ 本品は、宿主菌由来の DNA の混入を極力抑えた Taq DNA ポリメラーゼである「Gene Taq FP」に化学的な修飾を施すことにより、特異性の向上に有効なホットスタート PCR を可能としました。 PCR サイクルに入る前に 95℃、5 分間の熱処理によって酵素の活性化処理を行ってください。活性 2.5 units/μl 分子量 68 kDa 起源 Thermus aquaticus YT1 活性定義 1 unit は、activated calf thymus DNA をプライマー/鋳型として 74℃、30 分間に 10 nmol のデオキシヌクレオチドを酸不溶性沈殿物に取り込む酵素活性とする。本酵素 10 units と 1 μg の λ/HindⅢを 74℃、1 時間反応させてもアガロースゲル電気泳動パタ純度ーンに変化は認められない。ポリメラーゼ活性以外の活性・ 5'→3'エキソヌクレアーゼ活性を有していない。(Taq DNA ポリメラーゼの N 末端を一部欠失させてあるため) ・ 3'→5'エキソヌクレアーゼ活性を有していない。・ターミナルトランスフェラーゼ活性を有しており、得られた PCR 産物は TA クローニングに使用できる。構成本品には、10×Brilliant Buffer および 10×Gene Taq Universal Buffer の 2 種類の反応バッファーを添付している。 10×Brilliant Buffer は Hot-Start Gene Taq に最適化させており、短鎖 DNA（特に 1.5 kb 以下）の増幅において有効な反応バッファーである。 Code No. 313-07044 ・ Hot-Start Gene Taq (2.5 units/μl) ・ dNTP Mixture (2.5 mM each) ・ 10×Gene Taq Universal Buffer (15 mM Mg ) ・ 50 units ×1 本 2+ 2+ 10×Brilliant Buffer (20 mM Mg ) Code No. 319-07041 Code No. 315-07043 250 units ×1 本 250 units ×4 本 160μl ×1 本 800μl ×1 本 800μl ×4 本 1 ml ×1 本 1 ml ×1 本 1 ml ×4 本 200μl ×1 本 1 ml ×1 本 1 ml ×4 本（酵素形状） 20 mM Tris-HCl（pH8.0）, 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 0.5% Tween 20, 1 mM DTT, 50% Glycerol 販売元製造元和光純薬工業株式会社株式会社ニッポンジーン TEL 0120-052-099 TEL (076) 451-6548 FAX 0120-052-806 FAX (076) 451-6547 E-mail [email protected] E-mail [email protected] URL URL http：//www.nippongene.com http：//www.wako-chem.co.jp 本品は、試薬（試験研究用）として販売しているものです。医薬品の用途には使用しないでください。 For research use only NIPPON GENE CO., LTD. URL http://www.nippongene.com プロトコール例ご使用になる PCR 機器やプライマー配列、鋳型 DNA などにより PCR 反応の至適条件は異なります。本プロトコールはあくまで参考データとしてご使用ください。 (1) 2-Step PCR (2) 3-Step PCR ゲノム DNA を鋳型とした、約 500 bp のフラグメントの 2-Step PCR プロトコール例。 Template DNA 10×Brilliant buffer dNTP Mixture (2.5 mM each) Primer-forward (10 pmol/μl) Primer-reverse (10 pmol/μl) Hot-Start Gene Taq (2.5 units/μl) Total (d.d.H2O up to) ↓ 95℃ 5 min. 95℃ 30 sec. 30 cycles 68℃ 90 sec. 68℃ 3 min. 4℃ ↓ 電気泳動（PCR products 5μl）ゲノム DNA を鋳型とした、約 500 bp のフラグメントの 3-Step PCR プロトコール例。 50‐100 ng 5μl 4μl 1μl 1μl 0.5μl 50μl Template DNA 10×Brilliant buffer dNTP Mixture (2.5 mM each) Primer-forward (10 pmol/μl) Primer-reverse (10 pmol/μl) Hot-Start Gene Taq (2.5 units/μl) Total (d.d.H2O up to) ↓ 95℃ 5 min. 95℃ 30 sec. 60℃ 30 sec. 35 cycles 72℃ 60 sec. 72℃ 3 min. 4℃ ↓ 50‐100 ng 5μl 4μl 1μl 1μl 0.5μl 50μl 電気泳動（PCR products 5μl） NOTICE TO PURCHASER: LIMITED LICENSE Use of this product is covered by one or more of the following US patents and corresponding patent claims outside the US: 6,127,155, 5,677,152 (claims 1 to 23 only), 5,773,258 (claims 1 and 6 only), and claims outside the US corresponding to expired US Patent No. 5,079,352. The purchase of this product includes a limited, non-transferable immunity from suit under the foregoing patent claims for using only this amount of product for the purchaser's own internal research. No right under any other patent claim and no right to perform commercial services of any kind, including without limitation reporting the results of purchaser's activities for a fee or other commercial consideration, is conveyed expressly, by implication, or by estoppel. This product is for research use only. Diagnostic uses under Roche patents require a separate license from Roche. Further information on purchasing licenses may be obtained by contacting the Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA. 20110422KM For research use only