Brocolizando el ADN EXTRACCIÓN DEL ADN Grupo: Nucleótidos / 1º Bachillerato PROFESORA: MÓNICA AZPILICUETA AMORÍN | COLEGIO INTERNACIONAL SEK - ATLÁNTICO Resumen: Sin querer, siempre que nos hablan del ADN, en nuestras mentes aparece una imagen de una molécula coloreada, exageradamente grande, la cual debe ser exageradamente difícil poder extraerla y como no poder estudiarla. Sin embargo, nada más lejos de la realidad, con la ayuda de materiales que podemos encontrar en cualquier laboratorio escolar, o es más, en casa, podemos extraer esta maravillosa molécula y sentirnos como un agente del CSI. Palabras clave: Extracción, ADN, brócoli y doble hélice. Introducción: El ácido desoxirribonucleico, abreviado como ADN, constituye el material genético de los organismos. Material que constituyen los genes de los cromosomas de dichos organismos. Los cromosomas, formados mayoritariamente por ADN y por unas proteínas especiales llamadas histonas, se localizan en el núcleo de las células eucariotas, donde se encuentran protegidos por la doble membrana nuclear. El brócoli pertenece a una de las más valoradas Brassicas (ver anexo 1) debido a su empleo en la cocina. Es por ello que en los últimos años ha constituido una especie interesante a la hora de estudiarla en profundidad para poder mejorar sus características organolépticas haciéndola más atractiva para sus consumidores. El brócoli, se trata de una especie diploide cuya composición cromosómica es: 2n = 18 cromosomas. Y es precisamente el ADN de esos cromosomas el que vamos a explicar cómo podemos extraerlo y observarlo. Materiales: Brócoli Batidora de mano Vaso de precipitados Tijeras Embudo Pipeta Pasteur Tubo de ensayo Alcohol Detergente Sal Agua Líquido de lentillas (enzimas) Brocolizando el ADN 1 Método: 1. Coger una cuchara de muestra del brócoli y mezclarlo con una muestra de agua de igual volumen. 2. Batir la mezcla vigorosamente. 3. Echar un sexto de la mezcla obtenida de detergente líquido a la mezcla. 4. Dejar actuar unos 10 minutos. 5. Verter a un tubo de ensayo hasta un tercio de su capacidad la mezcla obtenida reservar el resto por si fuera necesario posteriormente. 6. Añadir una disolución salina, como limpia-lentillas. 7. Por último, agregar el alcohol hasta mitad de su capacidad, con cuidado, para ello hacer escurrir el alcohol por la pared del tubo de ensayo lentamente 8. El ADN se elevará hasta la interfase (ver anexo 2), con una pipeta Pasteur extraer el ADN. Muestra de Brócoli + agua Batir fuertemente Echar Echar detergente líquido Reposar 10 minutos Solución salina. Limpialentillas Agregar alcohol Resultados: Adherida a la pipeta Pasteur retiramos una larga y pegajosa molécula blanquecina que efectivamente era el ADN. Pudimos observar que dicha sustancia presenta una gran facilidad para formar grumos, aunque realmente se trata de un larguísimo filamento. En el precipitado del vaso, se localizaban las proteínas y las grasas que habíamos roto tras todo el procedimiento. Mientras que en la parte superior de la mezcla observamos el alcohol. Conclusión: En contra de lo que todos nosotros pensábamos al principio, realmente la extracción del ADN es sencilla de llevar a la práctica. Lo que resulta mucho más complicado es poder secuenciarlo para poder estudiarlo y descubrir las secuencias que codifican para las proteínas que conforman en organismo estudiado. Sin embargo, mientras íbamos poniendo en práctica nuestro protocolo, nos surgieron varias dudas / intrigas, que debido a la falta de tiempo no hemos podido poner en práctica, pero que serán futuras mejoras de nuestro trabajo. En concreto queremos saber si el empleo de detergente en polvo da el mismo resultado o mejor que si empleamos detergente líquido, también nos asaltó la duda de ver si obteníamos el mismo resultado empleando como muestra las hojas del brócoli. Brocolizando el ADN 2 Agradecimientos: Queremos agradecer a Mónica Azpilicueta, nuestra profesora de Biología y Geología ya que nos prestó su ayuda desde el primer momento para que diseñáramos y pusiéramos en práctica nuestro experimento. Anexos: Anexo 1 – Clasificación del brócoli Reino Phylum Subphylum División Subdivisión Clase Subclase Orden Familia Vegetal Traqueofitas Pteropsidas Spermatophyta Angiosperma Dicotiledónea Diapétala Papaverales (Roedales) Cruciferae (Brassicaceae) Anexo 2 – Interfase Como se puede apreciar en la siguiente imagen. La interfase es la zona que podemos localizar entre el alcohol (parte superior de la mezcla) y el filtrado (parte inferior). Bibliografía: http://www.madrimasd.org/experimentawiki/feria/Extracci%C3%B3n_de_ADN_de_tejidos_ve getales http://www.neoteo.com/extraccion-casera-de-adn-15213/ http://www.corpoica.org.co/SitioWeb/WebBac/Documentos/ELCULTIVOCRUCIFERAS.pdf Brocolizando el ADN 3 GRUPO 2 / NUCLEÓTIDOS Castro Cernadas, Emma Currás Mallo, Patricia Gayoso Rey, Cristina Esperanza Gil Paixao, Guilherme González Serantes, Mª Elena López Redondo, Álvaro Antonio Louzán Cores, Manuel Padín Crespo, Eladio Jesús Piñeiro Novas, Álvaro Prieto González, Fernando Quinta Junquera, Andrea Reiriz Pouseu, Andrea Rodiño Lusquiños, Martín Soutullo Fernández, José Vázquez Rodríguez, Alfonso
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