Betalaktamresistens hos H. influenzae
AFA-kurset 2015 Betalaktamresistens hos Haemophilus influenzae og pneumokokker Dagfinn Skaare Mikrobiologisk avdeling Sykehuset i Vestfold HF November 2015 Agenda Del 1 Betalaktamantibiotika og resistens Del 2 Utførelse, tolkning og rapportering av resistensbestemmelse A. Haemophilus influenzae B. Streptococcus pneumoniae Del 3 Demonstrasjon DEL 1 Betalaktamantibiotika og resistens Betalaktamer • Penicilliner, cefalosporiner, monobaktamer, karbapenemer • Betalaktamring • Binder seg til penicillin-bindende proteiner (PBP) og hemmer syntese av peptidoglykan Illustrasjon: Wikipedia Peptidoglykan • Livsviktig struktur i celleveggen hos bakterier • Nett av sukkerkjeder bundet sammen av peptidkjeder • Sammenbinding katalyseres av PBP (transpeptidase) PBP: Transpeptidase Betalaktamer hemmer PBP Resistensmekanismer • Betalaktamase – Vanlig hos H. influenzae, ikke påvist hos S.pneumoniae – Overførbart gen (plasmid, ICE) – Kun resistens mot penicilliner (penicillinase) – Hemmes av betalaktamasehemmere • Endret PBP (ett eller flere) – Vanlig hos H. influenzae og S.pneumoniae – Spontane punktmutasjoner og rekombinasjon – Kan påvirke alle betalaktamer, men i ulik grad – Hemmes ikke av betalaktamasehemmere Betalaktamase Betalaktamringen åpnes her (hydrolyse) Illustrasjon: Wikipedia Betalaktamasehemmere hemmer betalaktamaser (klavulansyre, tazobactam) Inaktivt molekyl Endret PBP Eksempel: Endret PBP3 (rPBP3) hos H. influenzae Endret form på bindingsstedet hindrer binding av betalaktamer → Mindre hemming → Redusert effekt Trinnvis utvikling Ampicillin-S/R Cefotaxime-S Ceftriaxone-S R517H / N526K I / II Low First stage KTG Ampicillin-R Cefotaxime-S/R Ceftriaxone-S Ampicillin-R Cefotaxime-R Ceftriaxone-R + S385T III-like / III High Second stage KTG + SSN Skaare et al. Eurosurveillance 2014 + L389F III-like+ / III+ High+ rPBP3 Third stage KTG + SSN + SSN Resistensovervåkning www.antibiotikaresistens.no http://ecdc.europa.eu/en/activities/surveillance/EARS-Net/Pages/index.aspx H. influenzae (luftveier) 17.3% 13.4% 9.1% Cefotaxime R: 0.6% NORM 2014 H. influenzae (invasive) NORM 2014 S. pneumoniae (luftveier) I/R 5.9% I/R 1.3% NORM 2014 S. pneumoniae (invasive) I/R 5.5% I/R 0.7% NORM 2014 S. pneumoniae (invasive) Benzylpenicillin I/R EARS-Net 2013 DEL 2 A Betalaktamresistens hos H. influenzae • NordicAST (www.nordicast.org) – Brytningspunkttabell 5.1 (2015-04-20) – Haemophilus influenzae og betalaktamresistens (2015-03-20) – Påvisning av betalaktamase hos Staphylococcus spp., Enterococcus faecalis, Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis, Neisseria gonorrhoeae og Neisseria meningitidis (2015-03-20) Påvisning av betalaktamase Betalaktamase positive isolater rapporteres R for penicilliner uten betalaktamasehemmer (uansett MIC) www.nordicast.org Screening rasjonale • To resistensmekanismer • Tre tester Betalaktamase Endret PBP Begge mekanismer Penicillin lapp R R R Betalaktamasetest + - + Cefalosporin lapp S R R 3 M X C 0 Sensitivitet/spesifisitet for påvisning av endret PBP: PG1 96.2% / 94.0% CEC30* 77.9% / 92.0% CXM30* 85.6% / 88.0% Skaare et al. JCM 2015 *Korrigerte tall Algoritme Test Mekanisme Tolkning PG1 Ingen Alle betalaktamer: S bla Endret PBP Ampicillin (meningi@): R Cefuroxim: R Øvrige: S/I/R med lapp eller MIC CEC30 eller CXM30 Betalaktamase Ampicillin, amoxicillin: R Øvrige: S Betalaktamase Ampicillin, amoxicillin, cefuroxim: R og endret PBP Øvrige: S/I/R med lapp eller MIC Endringer i 2015 • Cefuroxim alternativ til cefaklor • Ved positiv screening for endret PBP: – Lapp sidestilt med MIC for S/I/R-kategorisering – Resultat ampicillin (iv) gjelder også for amoxicillin (po) – Ta forbehold ved S for aminopenicilliner – Ampicillin alltid R ved meningitt PG1 < 6 mm Betalaktamasetest + CEC30 < 6 mm = rPBP3 Utfordringer • • • • Varierende innhold i PG1 lapp CEC30 lavere sensitivitet/spesifisitet enn PG1 Ta hensyn til all vekst Slørvekst er sikkert tegn på endret PBP, men varierer på MHF fra ulike leverandører • Obs synergi fra nabolapper • Falskt S vanlig ved resistensbestemmelse av aminopenicilliner med lapp og gradienttest DEL 3 Demonstrasjon DEL 2 B Betalaktamresistens hos S. pneumoniae • NordicAST (www.nordicast.org) – Brytningspunkttabell 5.1 (2015-04-20) – Streptococcus pneumoniae. Påvisning av nedsatt penicillinkänslighet (2015-03-20) Benzylpenicillin brytningspunkter: Meningitt: S≤0.06 / R>0.06 Øvrige infeksjoner: S≤0.06 / R>2 <8 mm Screening: Oxacillin 1 µg (OX1) 8-19 mm ≥20 mm http://www.eucast.org/ast_of_bacteria/calibration_and_validation/ http://www.eucast.org/ast_of_bacteria/calibration_and_validation/ http://www.eucast.org/ast_of_bacteria/calibration_and_validation/ Algoritme Test Sone Tolkning OX1 ≥20 mm Alle betalaktamer: S 8-‐19 mm Ampicillin, amoxicillin, amoxicillin-‐ klavulansyre, piperacillin-‐tazobactam, cefepim, cefotaxim, ceRriaxon, ceRarolin, ceRobiprol: S Fenoxymetylpenicillin: R Benzylpenicillin (meningi@): R Øvrige: S/I/R med MIC <8 mm Fenoxymetylpenicillin: R Benzylpenicillin (meningi@): R Øvrige: S/I/R med MIC Del 3 Demonstrasjon TIGR4 (A2-34) OX1: 25 mm (S) OX1 ≥20: Alle betalaktamer: S Benzylpenicillin: 0.03 mg/L (S/S) Cefotaxim: 0.016 mg/L (S) ATCC 49619 OX1: 8 mm (R) OX1 8-19 mm: Fenoxymetylpenicillin: R Benzylpenicillin (meningitt): R Ampicillin, amoxi, pip-tazo, cefotaxim, ceftriaxon etc: S Øvrige: MIC Benzylpenicillin: 0.25 mg/L (I/R) Cefotaxim: 0.125 mg/L (S) A2-35 OX1: <6 mm OX1 <8 mm: Fenoxymetylpenicillin: R Benzylpenicillin (meningitt): R Øvrige: MIC Benzylpenicillin: 4 mg/L (R/R) Cefotaxim: 1 mg/L (I) Del 3 Demonstrasjon ATCC 49766 PG1: 18 mm = S Betalaktamase: Negativ CEC30: 29 mm = S Ingen resistensmekanismer Alle betalaktamer = S AMP2: 21 mm = S AMC3: 24 mm = S CTX5: 37 mm = S ATCC 49247 PG1: <6 mm = R Betalaktamase: Negativ CEC30: 12 mm = R Mekanisme: Endret PBP Cefuroxim: R Ampicillin (meningitt): R Øvrige: Lapp eller MIC AMP2: 8 mm = R AMC3: 8 mm = R CTX5: 30 mm = S RAF-M 284 PG1: <6 mm = R Betalaktamase: Positiv CEC30: 26 mm = S Mekanisme: Bla Bla-følsomme penicilliner: R Øvrige betalaktamer: S AMP2: <6 mm = R AMC3: 16 mm = S CTX5: 36 mm = S SiV-A23 PG1: <6 mm = R Betalaktamase: Positiv CEC30: <6 mm = R Endret PBP og Bla Bla-følsomme penicilliner: R Cefuroxim: R Øvrige: Lapp/MIC AMP2: <6 mm = R AMC3: <6 mm = R CTX5: 22 mm = R
© Copyright 2024