CEDIA® Cocaine OFT Assay (EU)
CEDIA® Cocaine OFT Assay (EU) Kun for in vitro-diagnostikk (Brukes sammen med Oral-Eze® Oral Fluid Collection System (oppsamlingssystem for oralvæske)) 10014734 (sett med 3 x 17 ml) 10014740 (sett med 65 ml) Beregnet bruk Thermo Scientific CEDIA Cocaine OFT Assay (OFT-analyse for kokain) skal brukes til kvalitativ og semikvantitativ påvisning av bensoylekgonin i human oralvæske med grenseverdi for fortynnet konsentrasjon på 10 ng/ml. Prøven må bare samles inn med Oral-Eze® oppsamlingssystem for oralvæske. Analysen kalibreres mot bensoylekgonin og utføres med Olympus AU680-analysatoren. Denne enheten til in vitro-diagnostikk skal bare brukes i kliniske laboratorier. CEDIA® OFT-analyse gir bare et foreløpig analytisk testresultat. Det må brukes en spesifikk, alternativ metode for å få et bekreftet analyseresultat. Gasskromatografi/massespektrometri (GC/MS) og væskekromatografi med dobbel massespektrometri (LC-MS/MS) er foretrukne bekreftelsesmetoder.(1-3) Kliniske vurderinger og faglig skjønn må legges til grunn ved all testing for ulovlige narkotiske stoffer, særlig når man benytter foreløpige positive resultater. Sammendrag og forklaring av testen Innsamlingen av oralvæske er mindre invasiv, og det kreves ingen form for spesialutstyr. Oralvæske inneholder for det meste det opprinnelige stoffet, og er derfor en bedre indikator på nylig stoffbruk. Kokain og dets viktigste metabolitter, bensoylekgonin (BE) og ekgoninmetylester er primæranalyttene som dukker opp i oralvæske etter adminstrering av kokain intravenøst eller ved inhalasjon.(4) Kokain havner i spyttet gjennom passiv diffusjon, og konsentrasjonen er mye høyere i spytt enn i plasma. Kokain kan påvises i oralvæske innen 2 timer etter kokaininntak, mens metabolittene har lengre halveringstid og kan påvises i flere timer. Påvisningsnivåene for kokain og metabolitten BE er avhengig av dose, og i tilfeller av kronisk misbruk kan de være til stede i oralvæsken i 12–36 timer.(5) CEDIA OFT-analyse for kokain bruker rekombinant DNA-teknologi til å produsere et unikt homogent enzymimmunanalysesystem.(6) Analysen er basert på det bakterielle enzymet -galaktosidase, som er genetisk fremstilt i to inaktive fragmenter. Disse fragmentene gjenforbindes spontant og danner et fullt aktivt enzym som i analyseformatet splitter et substrat og genererer en fargeendring som kan måles spektrofotometrisk. I analysen konkurrerer analytten i prøven med analytten konjugert i ett inaktivt fragment (enzymdonor) av -galaktosidase, om antistoffbindingssteder. Hvis det finnes analytt i prøven, bindes den til antistoffet slik at det inaktive enzymfragmentet kan danne aktive enzymer. Hvis det ikke finnes analytt i prøven, bindes antistoffet til analytten konjugert på det inaktive fragmentet. Dette hemmer gjendannelse av inaktive -galaktosidasefragmenter, og det dannes ikke noe aktivt enzym. Mengden aktivt enzym som dannes, og resulterende absorbansendringer, er direkte proporsjonal med analyttmengden i prøven. Reagenser 1 EA-rekonstitusjonsbuffer Inneholder buffersalter, 0,4 mg/l polyklonalt anti-bensoylekgonin-antistoff fra kanin, stabilisator og konserveringsmiddel. 1aEA-reagens Inneholder 0,171 g/l enzymakseptor (mikrobisk), buffersalter og konserveringsmiddel. 2 ED-rekonstitusjonsbuffer Inneholder salter, stabilisatorer og konserveringsmiddel. 2aED-reagens Inneholder 0,3 mg/l -enzymdonor (mikrobisk) konjugert til bensoylekgoninderivat, 1,67 g/l klorofenolrødt--D-galaktopyranosid, stabilisatorer, detergent og konserveringsmiddel. Unngå å puste inn støv/tåke/damp/sprut. Tilsølte arbeidsklær må ikke fjernes fra arbeidsplassen. Benytt vernehansker/vernebriller/ansiktsskjerm. Ved utilstrekkelig ventilasjon skal åndedrettsvern benyttes. VED HUDKONTAKT: Vask med mye såpe og vann. VED INNÅNDING: Hvis det blir tungt å puste, skal offeret bæres ut i frisk luft og legges i en hvilestilling som gjør det komfortabelt å puste. Ved hudirritasjon eller utslett: Søk legehjelp. Ved symptomer i luftveiene: Kontakt et GIFTINFORMASJONSSENTER eller lege. Vask kontaminerte klær før gjenbruk. Innhold/beholder skal avhendes i henhold til lokale/regionale/nasjonale/internasjonale bestemmelser. Denne testen er kun for in vitro-diagnostikk. Reagensene er skadelige hvis de svelges. Ikke bruk reagenser etter utløpsdatoen. Klargjøring og oppbevaring av reagens Se avsnittet under for preparasjon av løsningene. Ta settet ut av kjøleskapet (2–8 °C) umiddelbart før løsningene skal klargjøres. Hvis du søler ved et uhell, må du gjøre rent og kaste materiale i samsvar med laboratoriets standardprosedyrer og lokale og nasjonale bestemmelser. Hvis emballasjen er skadet ved mottak, må du kontakte representanten for teknisk støtte (se baksiden av dette pakningsvedlegget). Klargjør løsningene i følgende rekkefølge for å minimere mulig kontaminasjon. R2 enzymdonorløsning Koble flaske 2a (ED-reagens) til flaske 2 (ED-rekonstitusjonsbuffer) med en av de vedlagte adapterne. Bland ved å snu forsiktig på flasken, slik at alt lyofilisert materiale fra flaske 2a overføres til flaske 2. Pass på at det ikke skummer. Koble flaske 2a og adapteren fra flaske 2 og kast dem. Sett hetten på flaske 2 og la den stå ca. 5 minutter ved romtemperatur (21–25 °C). Bland på nytt. Noter rekonstitueringsdatoen på flaskeetiketten. Sett flasken direkte ireagensrommet i analysatoren eller i kjøleskap (2–8 °C) og la den stå 30 minutter før bruk. R1 enzymakseptorløsning Koble flaske 1a (EA-reagens) til flaske 1 (EA-rekonstitusjonsbuffer) med en av de vedlagte adapterne. Bland ved å snu forsiktig på flasken, slik at alt lyofilisert materiale fra flaske 1a overføres til flaske 1. Pass på at det ikke skummer. Koble flaske 1a og adapteren fra flaske 1 og kast dem. Sett hetten på flaske 1 og la den stå ca. 5 minutter ved romtemperatur (21–25 °C). Bland på nytt. Noter rekonstitueringsdatoen på flaskeetiketten. Sett flasken direkte i reagensrommet i analysatoren eller i kjøleskap (2–8 °C) og la den stå 30 minutter før bruk. MERKNAD 1: Komponentene i dette settet skal brukes som en integrert enhet. Ikke bland komponenter fra ulike partier. MERKNAD 2: Unngå krysskontaminering av reagenser ved å bruke riktig reagenshette på riktig reagensflaske. R2-løsningen (enzymdonoren) skal være guloransje i fargen. Rød eller rødlilla farge tyder på at reagensen er forurenset og må kasseres. MERKNAD 3: R1- og R2-løsningen må holde samme temperatur som reagensrommet i analysatoren før analysen utføres. Se det analysatorspesifikke bruksarket for ytterligere informasjon. Ytterligere materialer som er nødvendige (men som ikke følger med) Reagensene skal oppbevares ved 2–8 °C. MÅ IKKE FRYSES. Se utløpsdatoen på esken eller flaskeetikettene med hensyn til stabiliteten til de uåpnede komponentene. Beskrivelse av settet 10016864CEDIA Multi-Drug OFT Negative Calibrator (negativ OFT-kalibrator for flere narkotiske stoffer) 10016865 CEDIA Multi-Drug Calibrator 1 (kalibrator for flere narkotiske stoffer 1) 10016866 CEDIA Multi-Drug Calibrator 2 (kalibrator for flere narkotiske stoffer 2) 10016867 CEDIA Multi-Drug Calibrator 3 (kalibrator for flere narkotiske stoffer 3) 10016868 CEDIA Multi-Drug Calibrator 4 (kalibrator for flere narkotiske stoffer 4) 10016869 CEDIA Multi-Drug Control Set (kontrollsett for flere narkotiske stoffer) R1-løsningen: 60 dager nedkjølt i analysator eller ved 2–8 °C. R2-løsningen: 60 dager nedkjølt i analysator eller ved 2–8 °C. 96100-050 96100-500 96105-050 96105-500 Oral-Eze Collection Device (innsamlingsenhet) (50 pr. eske) Oral-Eze Collection Device (innsamlingsenhet) (500 pr. eske) Oral-Eze Sample Extractor (prøveekstraktor) (50 pr. eske) Oral-Eze Sample Extractor (prøveekstraktor) (500 pr. eske) Forholdsregler og advarsler FARE: Pulverreagens inneholder ≤ 56 % w/w bovint serumalbumin (BSA), ≤ 2 % w/w natriumazid. Væskereagens inneholder ≤ 1,0 % bovint serum, ≤ 0,3 % natriumazid og ≤ 0,1 % legemiddelspesifikt antistoff (kanin). H317 – Kan utløse en allergisk hudreaksjon. H334 – Kan gi allergi eller astmasymptomer eller pustevansker ved innånding. EUH032 – Kontakt med syrer frigjør meget giftig gass. Innsamling og behandling av prøver Oralvæskeprøver er egnet for bruk i CEDIA Cocaine OFT Assay (OFT-analyse for kokain). Samle inn oralvæskeprøver ved hjelp av Oral-Eze Oral Fluid Collection System (system til oralvæskeinnsamling). Det må sørges for å ivareta oralvæskeprøvens kjemiske integritet fra innsamling til analyse ved å sette hette på prøveglassene, oppbevare prøvene ved 2–8 °C eller ved romtemperatur (21–25 °C) og teste innen 21 dager etter innsamling. Oralvæskeprøvene skal behandles som om de er potensielt smittefarlige. Prøver med pH 5–9 er egnet for testing med denne analysen. Fremgangsmåte for behandling av Oral-Eze-prøver 1. Merk prøveglasset med riktig identifikasjon. 2.Kontroller prøvetakingsdatoen på prøveglasset for å sikre at det ikke er gått mer enn 21 dager siden prøven ble tatt. 3. Åpne hetten og trykk på puten for å presse ut prøven. 4. Sett hetten på prøveglasset igjen, og prøven er klar til testing. 5. Sørg for at oralvæskeprøvene holder en temperatur på 4–37 °C under forsendelse. 6. Prøvene kan oppbevares ved romtemperatur (21–25 °C) i 21 dager. De bør lagres ved 2–8 °C. Fremgangsmåte for analyse Forskjellige vanlige, reseptfrie legemidler og strukturelt ikke-relaterte forbindelser ble testet for kryssreaktivitet i analysen. De kryssreaktive løsningene ble preparert ved å tilsette forbindelsen til negativ oralvæske ved de konsentrasjonene som er oppgitt i tabellen nedenfor. Alle forbindelsene testet negativt og viste ingen kryssreaktivitet. Oral-Eze-enheten til oralvæskeinnsamling inneholder en konserverende buffer som fortynner den ublandede oralvæskeprøven. Kalibrator- og kontrollnivåer er satt til fortynnede nivåer. MERK: Ved korrelasjon av Oral-Eze-resultatet fra analysen eller det assosierte LC-MS/MSbekreftelsesresultatet med en verdi for ublandet oralvæske, skal resultatet fra Oral-Eze-prøven multipliseres med en faktor 3. 1. Pipetter de behandlede oralvæskeprøvene og kontrollene til merkede prøveglass og plasser glassene i prøveringen på Olympus AU680-analysatoren. 2. Last inn reagenser (reagens 1 og reagens 2) i reagensrommet i analysatoren. 3. Pipetter kalibratorer til merkede glass og last glassene inn i prøveringen på analysatoren. 4.Programmer kjøringsoppsettet med 570 nm som primær bølgelengde og 660 nm som sekundær bølgelengde. Se parameterarket for detaljerte instruksjoner om hvordan du programmerer analysatoren. Kvalitetskontroll og kalibrering I henhold til god laboratoriepraksis skal kontroller testes hver dag det testes pasientprøver og hver gang det utføres kalibrering. Kalibrer testene på nytt hvis det skiftes reagenser eller hvis kontrollresultatene ligger utenfor etablerte grenseverdier. Påse at kontrollresultatene er innenfor det etablerte området, som fastsatt av laboratoriets prosedyrer og retningslinjer. Hvis resultatene faller utenfor de etablerte områdene, er analyseresultatene ugyldige. Alle påkrevde kvalitetskontroller skal utføres i samsvar med lokale og sentrale forskrifter og vedtak. Hvert laboratorium bør etablere sine egne kalibrerings- og kontrollrutiner. Forbindelser Testet konsentrasjon (ng/ml) Kokain OFT-analyse Negativ/positiv Acetaminofen 600.000 Negativ Acetylsalisylsyre 600.000 Negativ Alprazolam 10.000 Negativ Amobarbital 10.000 Negativ Amoxicillin 80.000 Negativ Amfetamin 80.000 Negativ Ampicillin 10.000 Negativ Atropin 10.000 Negativ Fenetylamin 10.000 Negativ Bupropion 10.000 Negativ Kvalitative resultater Grenseverdikalibratoren (kalibrator 2) brukes som referanse for å skjelne ”positive” fra ”negative” prøver. Prøver som gir en responsverdi som er lik eller større enn responsverdien for grenseverdikalibratoren, anses som positive. Prøver som gir en responsverdi på mindre enn responsverdien fra grenseverdikalibratoren, anses som negative. Se analysatorens spesifikke applikasjonsark for ytterligere informasjon. Butabarbital 10.000 Negativ Butalbital 10.000 Negativ Koffein 20.000 Negativ Captopril 600.000 Negativ Semi-kvantitative resultater Det kjøres en standardkurve ved hjelp av alle kalibratorene for å estimere relative konsentrasjoner av stoffet i prøvene. Se analysatorens spesifikke applikasjonsark for detaljert informasjon. Klordiazepoksid 80.000 Negativ Klorpromazin 10.000 Negativ Cimetidin 200.000 Negativ Klonazepam 10.000 Negativ Klorazepat 10.000 Negativ Kodein 40.000 Negativ Resultater og forventede verdier Begrensninger Et positivt resultat fra denne analysen angir bare forekomst av bensoylekgonin, og samsvarer ikke nødvendigvis med graden av fysiologiske og psykologiske virkninger. Det kan hende at andre stoffer og/eller faktorer (f.eks. tekniske eller prosedyremessige) enn dem som er undersøkt i spesifisitetsstudien, kan påvirke testen og forårsake feilaktige resultater. Spesifikke ytelsesegenskaper Typiske ytelsesresultater oppnådd på Olympus AU680-analysatoren vises nedenfor. Resultatene som oppnås i ditt laboratorium, kan avvike fra disse dataene. Presisjon Prøvene som inneholdt varierende mengder av bensoylekgonin ble testet i kvalitativ og semikvantitativ modus ved bruk av CLSI (EP05-A2)-presisjonsprotokoll. Prøvene ble randomisert og testet med seks replikater to ganger daglig i fem dager. Totalt N = 60. Resultatene er oppsummert i tabellen nedenfor. Kvalitativ analyse: Prøver Resultatgjennomsnitt (mA/min) Innenfor kjøring Totalt kjøring SD % CV SD % CV Kotinin 10.000 Negativ Cyclizin 10.000 Negativ Dextrometorfan 10.000 Negativ Diacetylmorfin 10.000 Negativ Diazepam 40.000 Negativ Digoksin 40.000 Negativ Difenhydramin 10.000 Negativ Enalapril 40.000 Negativ Fluoksetin 200.000 Negativ Gentisinsyre 10.000 Negativ Kontroll, lav 490 3,5 0,7 7,6 1,5 Hydrokodon 10.000 Negativ Grenseverdikalibrator 536 3,7 0,7 8,9 1,7 Hydromorfon 10.000 Negativ Kontroll, høy 567 3,4 0,6 8,7 1,5 Ibuprofen 200.000 Negativ Imipramin 8.000 Negativ l-efedrin 10.000 Negativ % CV Tyroksin 200.000 Negativ Lidokain 10.000 Negativ Semi-kvantitativ analyse: Prøver Innenfor kjøring Resultatgjennomsnitt (ng/ml) SD % CV Totalt kjøring SD Kontroll, lav 5,5 0,3 6,2 0,5 9,4 Grenseverdikalibrator 11,8 0,5 4,1 1,1 9,0 Loperamid 10.000 Negativ Kontroll, høy 18,1 1,1 5,9 1,2 6,7 Medazepam 10.000 Negativ Petidin 10.000 Negativ Spesifisitet og kryssreaktivitet Metabolitter av kokain ble testet for kryssreaktivitet i analysen. Den potensielt kryssreaktive forbindelsen ble tilsatt negativ oralvæske ved de oppgitte konsentrasjonene og testet i kvalitativ og semi-kvantitativ modus. Konsentrasjonene oppgitt nedenfor produserte deretter et resultat som var tilnærmet likt grenseverdikalibratoren. Testet konsentrasjon (ng/ml) Kokain OFT-analyse Negativ/positiv Kokaetylen 17 Positiv Kokain 17 Positiv Ekgonin 1.900 Positiv Ekgoninmetylester 20.000 Positiv Forbindelser 2 Metadon 80.000 Negativ Metamfetamin 80.000 Negativ Metoprolol 10.000 Negativ Morfin 20.000 Negativ Naproksen 10.000 Negativ Nikotinamid 10.000 Negativ Nikotin 10.000 Negativ Nifedipin 500.000 Negativ Endogene/eksogene stoffer og pH-interferens (Forts.) Forbindelser Testet konsentrasjon (ng/ml) Kokain OFT-analyse negativ/positiv Norklordiazepoksid 10.000 Negativ Nordiazepam 10.000 Negativ Penicillin 10.000 Negativ Den potensielle interferensen fra flere endogene og eksogene stoffer og pH-verdi med påvisningsnøyaktigheten fra prøvene som inneholdt bensoylekgonin ved lav og høy kontrollkonsentrasjon, ble testet i analysen. De interfererende stoffene ble tilsatt negativ oralvæske ved konsentrasjonene som er oppgitt i tabellen nedenfor. Prøvene ble testet i både kvalitativ og semi-kvantitativ modus. Det ble ikke observert noen interferens med de interfererende stoffene og pH-prøvene ved lave og høye kontrollkonsentrasjoner. Stoffer Testet konsentrasjon (ng/ml) Kontroll, lav OFT-analyse for kokain Kontroll, høy Pentobarbital 10.000 Negativ Fensyklidin 5.000 Negativ Kontroll, lav 5 Negativ I/T 15 I/T Positiv Fenobarbital 40.000 Negativ Kontroll, høy Fenylefrin 10.000 Negativ Kotinin 0,01 mg/ml Negativ Positiv Fenylpropanolamin 10.000 Negativ Prokainamid 10.000 Negativ Prokain 10.000 Negativ Nikotin 0,005 mg/ml Negativ Positiv Hemoglobin 0,05 mg/ml Negativ Positiv Humant serumalbumin 8,0 mg/ml Negativ Positiv Propoksifen 40.000 Negativ Natriumklorid 8,0 mg/ml Negativ Positiv Pseudoefedrin 10.000 Negativ Kolesterol 15 mg/ml Negativ Positiv Kinidin 10.000 Negativ Acetaminofen 0,1 mg/ml Negativ Positiv Ranitidin 200.000 Negativ Acetylsalisylsyre 0,1 mg/ml Negativ Positiv Salbutamol 10.000 Negativ Koffein 0,1 mg/ml Negativ Positiv Salisylatsyre 100.000 Negativ Ibuprofen 0,1 mg/ml Negativ Positiv Secobarbital 80.000 Negativ Kaffe 2 % v/v Negativ Positiv Temazepam 10.000 Negativ Melk 1 % v/v Negativ Positiv ∆ -THC 10.000 Negativ Appelsinjus 2 % v/v Negativ Positiv 11-nor-Δ9-THC-COOH 5.000 Negativ Tranebærjus 2 % v/v Negativ Positiv Teofyllin 10.000 Negativ Brus (Cola) 2 % v/v Negativ Positiv Tolmetin 10.000 Negativ Tannpasta 2 % v/v Negativ Positiv Verapamil 200.000 Negativ Munnskyllevann 2 % v/v Negativ Positiv Negativ Te 2 % v/v Negativ Positiv Gebisslim 2 % v/v Negativ Positiv pH 5–9 Negativ Positiv 9 Zomepirac 10.000 Metodesammenligning 42 oralvæskeprøver fra rehabiliteringsklinikk ble innsamlet ved hjelp av Oral-Eze Oral Fluid Collection Device. Oralvæskeprøvene ble testet med CEDIA Cocaine OFT Assay (OFT-analyse for kokain) og med LC-MS/MS-metoden. Kvalitativ analyse: Det totale samsvaret mellom CEDIA OFT-analyse for kokain og LC-MS/ MS med en grenseverdi på 10 ng/ml er 95,2 %. Sammenligning av prøveresultater fra CEDIA OFT-analyse for kokain med LC-MS/MS viste 100,0 % sensitivitet og 90,9 % spesifisitet. Kvalitativ LC-MS/MS (ng/ml) CEDIA + - + 20 2* - 0 20 *Diskordante prøver var negative ifølge LC-MS/MS. Semi-kvantitativ analyse: Det totale samsvaret mellom CEDIA OFT-analyse for kokain og LC-MS/MS med en grenseverdi på 10 ng/ml er 95,2 %. Sammenligning av prøveresultater fra CEDIA OFT-analyse for kokain med LC-MS/MS viste 100,0 % sensitivitet og 90,9 % spesifisitet. Semi-kvantitativ LC-MS/MS (ng/ml) CEDIA + - + 20 2* - 0 20 *Diskordante prøver var negative ifølge LC-MS/MS. 3 Referanser 1. Cone, E. J., et al. (2002). Oral Fluid Testing for Drugs of Abuse: Positive Prevalence Rates by Intercept (TM) Immunoassay Screening and GC-MS-MS Confirmation and Suggested Cutoff Concentrations. Journal of Analytical Toxicology, 26, 541-547. 2. Maurer, H. H. (2005). Advances in Analytical Toxicology: The Current Role of Liquid Chromatography-Mass Spectrometry in Drug Quantification in Blood and Oral Fluid. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 381, 110-118. 3. Lambert, W. E., et al. (2002). Simultaneous, quantitative determination of opiates, amphetamine, cocaine and Benzoylecgonine in oral fluid by liquid chromatography quadrupole-time -of- flight mass spectrometry. Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci., 779, 321-30. 4. Cone, E. J., Darwin, W. D., & Oyler, J. M. (1997). Cocaine disposition in saliva following intravenous, intranasal and smoking administration. Journal of Analytical Toxicology, 21, 465-475 5. Cone, E. J., & Weddington, W. W. (1989). Prolonged occurrence of cocaine in human saliva and urine after chronic use. Journal of Analytical Toxicology, 13, 65-72. 6. Henderson, D. R., et al. (1986). CEDIA, A New homogeneous Immunoassay System Clin. Chem., 32, 1637-1641. Microgenics Corporation 46500 Kato Road Fremont, CA 94538 USA Kundestøtte og teknisk støtte for USA: 1-800-232-3342 B·R·A·H·M·S GmbH Neuendorfstrasse 25 16761 Hennigsdorf, Germany Oppdateringer knyttet til pakningsvedlegg finner du på: www.thermoscientific.com/diagnostics Andre land: Kontakt din Thermo Fisher Scientific-representant. AU680® er et varemerke for Beckman, Coulter Inc. og dets datterselskaper. CEDIA® er et registrert varemerke for Roche Diagnostics. 10018131INS-2-NO 2016 03 4
© Copyright 2024