FICHE MILIEU DE CULTURE GELOSE DL (Desoxycholate Lactose) Le milieu DL est à la fois : o Un milieu sélectif des Enterobactéries (bacille Gram -) o Un milieu différentiel (mise en évidence de l’utilisation de lactose) Il est préférentiellement utilisé pour la mise en évidence des coliformes (bacilles gram -, fermentant le lactose avec production de gaz). I- COMPOSITION ET ROLE DES CONSTITUANTS Constituants Peptone trypsique de viande (10 g) Lactose (10 g) Désoxycholate de sodium (0,5 g) Citrate de sodium (2 g) Chlorure de sodium (5 g) Rouge neutre (0,03 g) Agar (15g) Eau qsp 1L Rôle Source d'azote et d’énergie Source de carbone et d’énergie Agent sélectif (inhibiteur des Gram +) Agent sélectif (inhibiteur des Gram +) Source de minéraux Indicateur pH Agent gélifiant Solvant du milieu pH= 7,1 Incubation 24h à 30°C (coliformes) ou 44°C (coliformes thermotolérants) II- LECTURE ETUDE DU DEVELOPPEMENT EN PRESENCE DE DESOXYCHOLATE ETUDE DE L’UTILISATION DU LACTOSE OBSERVATION INTERPRETATION RESULTAT Pas de développement bactérien Bactérie sensible à la présence de désoxycholate Bactéries Gram + Développement bactérien Bactérie résistante à la présence de désoxycholate Bactéries Gram – Colonies rouge-foncé (virage de l’indicateur coloré) Acidification du milieu due à la fermentation du lactose SUSPICION DE COLIFORMES Colonies incolores (pas de virage de l’indicateur coloré) Pas d’acidification du milieu Bactérie LACTOSE - Bactérie LACTOSE + Procéder au comptage des colonies rouge-foncé de diamètre égal ou supérieur à 0,5 mm pour chaque boîte.
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