FICHE MILIEU DE CULTURE MILIEUX HUGH ET LEIFSON Ces milieux permettent d’étudier la voie de dégradation du glucose I- COMPOSITION ET ROLE DES CONSTITUANTS Constituants Rôles Tryptone Source d’azote Bleu de bromothymol Indicateur de pH Eau, chlorure de sodium Source de minéraux Agar Agent gélifiant pH 7,1 ATTENTION ! LE MILIEU NE CONTIENT PAS DE GLUCOSE, IL DOIT ETRE AJOUTE AU MOMENT DE L’ENSEMENCEMENT II- TECHNIQUE • • • • • • Ajouter la solution de glucose (10 %) dans les milieux de HL en ρ xV surfusion, afin d’obtenir une concentration finale de 1% Vglucose = finale de glucose final du tube ρinitiale du glucose Refroidir les tubes dans un bain d’eau froide Ensemencer les milieux par piqûre centrale au fil droit Recouvrir l’un des 2 tubes d’environ 0,5 mL de paraffine liquide de manière à assurer l’anaérobiose Dévisser un peu les bouchons des tubes. Incuber. III- LECTURE OBSERVATION INTERPRETATION CONCLUSION Acidification du milieu en présence d’O 2 BACTERIE OXYDATIVE DU GLUCOSE Acidification forte du Pas d’acidification du milieu en présence milieu et en absence d’O 2 BACTERIE FERMENTATIVE DU GLUCOSE Alcalinisation du milieu (utilisation des peptones) BACTERIE INERTE VIS-A-VIS DU GLUCOSE
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