Antitrombin III Hitachi 917 Applikationsnot Riktlinje för bestämning av Antitrombin III i serum/plasma på Hitachi 917 Allmän information Avsedd användning Applikationsnoten är avsedd för kvantitativ bestämning av antitrombin III i humant provmaterial med turbidimetri på Hitachi 917 (1, 2). Mätområde Ungefär 0,06-0,50 g/L beroende på kalibratorns specifika lot. I händelse av efterkoncentration eller -spädning kan området utökas till 0,03-1,0 g/L. Referensintervall 0,21-0,30 g/L (3). Det rekommenderas att referensintervallet för den lokala populationen fastställs. Instrumentinställningar Instrumentprogrammering utförs i enlighet med “Instrumentinställningar” på sidan 3. Reagenser Antikropp Reaktionsbuffert Utspädningsvätska Kalibrator Kontroll Prover Human heparin-plasma eller EDTA-plasma. Värdena för humant serum är ungefär 10 % högre än värdena för plasma. Stabil i 7 dagar vid 2-8 ºC. Kalibrator Spädning av standarder utförs automatiskt av instrumentet. Reaktionsbuffert (R1) Reaktionsbufferten är bruksfärdig. Ombordstabiliteten är 28 dagar. Antikropp (R3) Förspäd antikroppen 1:3,10 (t.ex. 5000 µL antikropp + 10500 µL utspädningsvätska). Filtrering genom ett 0,22 µm membranfilter rekommenderas om, i sällsynta fall, den förspädda antikroppen verkar lätt grumlig. Stabilitet hos den outspädda antikroppen: Se utgångsdatum på etiketten. Stabilitet hos den förutspädda antikroppen: 28 dagar vid 2-8 °C. Ombordstabiliteten: 28 dagar. Kodnr Q 0103 S 2006 S 2005 OUID OWSY Namn DakoCytomation Polyclonal Rabbit Anti-Human Antithrombin III DakoCytomation Reaction Buffer 3 DakoCytomation Dilution Buffer 1 Dade Behring N Protein Standard PY Dade Behring N/T Protein Control PY Kapacitet: 1 mL förutspädd antikropp är ekvivalent till cirka 18 kyvettavläsningar av standarder eller prover. Reagensflaskans dödvolym skall beaktas vid beräkning av nödvändig mängd reagens. Kalibreringsstabilitet Omkalibrering rekommenderas var 28:e dag eller vid byte av reagenssats, när en ny antikroppsspädning bereds, antikroppsspädningen filtreras eller kvalitetskontrollen faller utanför det område som etablerats av det enskilda laboratoriet. Felsökning Försök omkalibrera om resultatet är oacceptabelt. Kontrollera reagenser och procedur. Om problemen kvarstår kontakta instrumentleverantören eller DakoCytomation teknisk service. (109349-001) 30 190.Q0103.01/SE/SUM/24.03.04 s. 1/3 DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17 Antitrombin III Hitachi 917 Resultatdata Sensitivitet Ett OD-värde på ungefär 0,3 på Hitachi 917 motsvarar en koncentration på cirka 0,5 g/L antitrombin III. Detektionsgräns Detektionsgränsen uppskattas till 0,025 g/L. Precision Precisionen uppskattades genom att testa prover vid 3 olika antitrombin III (ATIII)-nivåer med ANOVA-analys med 6 körningar vardera med en ny kalibrering och 6 bestämningar i varje körning. AT III Standardavvikelsen (g/L) Medelvärde (g/L) Inom körning Mellan körning Totalt Total CV (%) n 1 0,23 0,004 0,007 0,008 3,5 36 2 0,30 0,011 0,009 0,014 4,7 36 3 0,36 0,005 0,013 0,014 3,8 35 Prover Noggrannhet Återvinning av 85-115 % av antitrombin III kan förväntas för Dade Behring Protein Control PY, kodnr OWSY N/T. Linjäritet Analysen är linjär i området 0,06-0,50 g/L. Säkerhetsområde Inget antigenöverskott hittades för antitrombin III-koncentrationer upp till 1,9 g/L. Interferens Ingen interferens hittas vid koncentrationer upp till 5 g/L hemoglobin och 600 mg/L bilirubin. Triglycerid orsakar interferens. Alla medel beskrivna i referens 4 undersöktes enligt rekommendationerna i referens 4. Ingen interferens observerades, utom för Intralipid. Metodjämförelse Bestämning av antitrombin III enligt denna applikationsnot jämfördes med andra kommersiella turbidimetriska analyser. Data kan fås på begäran. Referenser 1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: Method optimization: Basic principles for quantitative determination human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab 2001;39:1098-1109. 2. Hitachi 917 manual(s). 3. Tietz NW. Clinical guide to laboratory tests. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1995 p. 64-7. 4. Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-85. (109349-001) 30 190.Q0103.01/SE/SUM/24.03.04 s. 2/3 DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17 Antitrombin III Hitachi 917 Instrumentinställningar (Programvaruversion 7146020-02-48) Analyze Assay/Time/Point Wave (2nd/Primary) S.Vol (Normal) S.Vol (Decrease) S.Vol (Increase) Diluent Reagent (R1) T1 Reagent (R2) T2 Reagent (R3) T3 Reagent (R4) T4 Abs. Limit Prozone Limit Cell Detergent 2Point End 0 340 8.0 0.0 4.0 0.0 16.0 0.0 00301* 250 0 0 0 50 20 0 0 32000 Increase 32000 34 Detergent 1 10 15 34 0 0 0 0 0 901* 901* 901* 901* 0 0 0 0 2 Analysis Upper Calib Calibration Type Point Weight Logit-Log 4P 6 0 Span Point 4 Auto Calibration Blank Span 2 Point Full Time out 0 0 0 0 Change over Lot Bottle SD Limit Duplicate Limit Sensitivity Limit S1 ABS Limit 999 99 -99999 -32000 % 99999 32000 32000 Abs Range Application Code Report Name Data Mode Control Interval Intrument Factor (Y=ax+b) Technical Limit** Repeat Limit* Expected Value (Male) (Female) (Default) 901* ATIII On Board * a= 1.0 st. 2 st. 6 st. 2 st. 6 100 100 Y Y 100 100 Y Y Male Unit g/L b= -99999 -99999 -99999 -99999 -99999 -99999 Range 1 99999 99999 99999 99999 99999 99999 0.0 Cancel (1) (2) (3) (4) (5) (6) 0 0 0 0 0 -+++ +++ ++++ Others <Standard> Calibration Code** (1) 001 Position* 1 (2) 003 0.2500 X C(cal) 3 Concentration*** 0.00 Sample Pre. Dil. 8.0 0.0 0 35.0 8.0 105 (3) 003 0.5565 X C(cal) 3 (4) 003 1.0000 X C(cal) 3 (5) 003 1.5839 X C(cal) 3 (6) 003 2.1833 X C(cal) 3 4.5 0.0 0 8.0 0.0 0 12.5 0.0 0 17.0 0.0 0 Utspädningsvätska – kodnr S 2005 R1 – kodnr S 2006 R3 – kodnr Q 0103, spädd 1:3,10. (109349-001) [*] Fastställt av kunden. [**] Den beräknade relativa koncentrationen av Std.2 och Std.6. [***] Kalibrator, kodnr OUID. Koncentrationen beräknas som faktorn gånger kalibratorvärdet för den specifika satsen (C(cal), uttryckt i g/L på OUID Analytical Value Sheet). Antal decimaler angivna för Std.1 definierar antalet decimaler i utskriften. Två decimaler rekommenderas. 30 190.Q0103.01/SE/SUM/24.03.04 s. 3/3 DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
© Copyright 2024