Antitrombin III
Hitachi 917
Applikationsnot
Riktlinje för bestämning av
Antitrombin III i serum/plasma
på Hitachi 917
Allmän information
Avsedd användning
Applikationsnoten är avsedd för kvantitativ bestämning av antitrombin III i humant provmaterial med turbidimetri på
Hitachi 917 (1, 2).
Mätområde
Ungefär 0,06-0,50 g/L beroende på kalibratorns specifika lot. I händelse av efterkoncentration eller -spädning kan
området utökas till 0,03-1,0 g/L.
Referensintervall
0,21-0,30 g/L (3). Det rekommenderas att referensintervallet för den lokala populationen fastställs.
Instrumentinställningar
Instrumentprogrammering utförs i enlighet med “Instrumentinställningar” på sidan 3.
Reagenser
Antikropp
Reaktionsbuffert
Utspädningsvätska
Kalibrator
Kontroll
Prover
Human heparin-plasma eller EDTA-plasma. Värdena för humant serum är ungefär 10 % högre än värdena för plasma.
Stabil i 7 dagar vid 2-8 ºC.
Kalibrator
Spädning av standarder utförs automatiskt av instrumentet.
Reaktionsbuffert (R1)
Reaktionsbufferten är bruksfärdig. Ombordstabiliteten är 28 dagar.
Antikropp (R3)
Förspäd antikroppen 1:3,10 (t.ex. 5000 µL antikropp + 10500 µL utspädningsvätska).
Filtrering genom ett 0,22 µm membranfilter rekommenderas om, i sällsynta fall, den förspädda antikroppen verkar lätt
grumlig.
Stabilitet hos den outspädda antikroppen: Se utgångsdatum på etiketten.
Stabilitet hos den förutspädda antikroppen: 28 dagar vid 2-8 °C.
Ombordstabiliteten: 28 dagar.
Kodnr
Q 0103
S 2006
S 2005
OUID
OWSY
Namn
DakoCytomation Polyclonal Rabbit Anti-Human Antithrombin III
DakoCytomation Reaction Buffer 3
DakoCytomation Dilution Buffer 1
Dade Behring N Protein Standard PY
Dade Behring N/T Protein Control PY
Kapacitet: 1 mL förutspädd antikropp är ekvivalent till cirka 18 kyvettavläsningar av standarder eller prover.
Reagensflaskans dödvolym skall beaktas vid beräkning av nödvändig mängd reagens.
Kalibreringsstabilitet
Omkalibrering rekommenderas var 28:e dag eller vid byte av reagenssats, när en ny antikroppsspädning bereds,
antikroppsspädningen filtreras eller kvalitetskontrollen faller utanför det område som etablerats av det enskilda
laboratoriet.
Felsökning
Försök omkalibrera om resultatet är oacceptabelt. Kontrollera reagenser och procedur. Om problemen kvarstår
kontakta instrumentleverantören eller DakoCytomation teknisk service.
(109349-001)
30 190.Q0103.01/SE/SUM/24.03.04 s. 1/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Antitrombin III
Hitachi 917
Resultatdata
Sensitivitet
Ett OD-värde på ungefär 0,3 på Hitachi 917 motsvarar en koncentration på cirka 0,5 g/L antitrombin III.
Detektionsgräns
Detektionsgränsen uppskattas till 0,025 g/L.
Precision
Precisionen uppskattades genom att testa prover vid 3 olika antitrombin III (ATIII)-nivåer med ANOVA-analys med 6
körningar vardera med en ny kalibrering och 6 bestämningar i varje körning.
AT III
Standardavvikelsen
(g/L)
Medelvärde
(g/L)
Inom
körning
Mellan
körning
Totalt
Total CV
(%)
n
1
0,23
0,004
0,007
0,008
3,5
36
2
0,30
0,011
0,009
0,014
4,7
36
3
0,36
0,005
0,013
0,014
3,8
35
Prover
Noggrannhet
Återvinning av 85-115 % av antitrombin III kan förväntas för Dade Behring Protein Control PY, kodnr OWSY N/T.
Linjäritet
Analysen är linjär i området 0,06-0,50 g/L.
Säkerhetsområde
Inget antigenöverskott hittades för antitrombin III-koncentrationer upp till 1,9 g/L.
Interferens
Ingen interferens hittas vid koncentrationer upp till 5 g/L hemoglobin och 600 mg/L bilirubin. Triglycerid orsakar
interferens.
Alla medel beskrivna i referens 4 undersöktes enligt rekommendationerna i referens 4. Ingen interferens observerades,
utom för Intralipid.
Metodjämförelse
Bestämning av antitrombin III enligt denna applikationsnot jämfördes med andra kommersiella turbidimetriska
analyser. Data kan fås på begäran.
Referenser
1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: Method optimization: Basic principles for quantitative determination
human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab
2001;39:1098-1109.
2. Hitachi 917 manual(s).
3. Tietz NW. Clinical guide to laboratory tests. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1995 p. 64-7.
4. Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their
concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-85.
(109349-001)
30 190.Q0103.01/SE/SUM/24.03.04 s. 2/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Antitrombin III
Hitachi 917
Instrumentinställningar (Programvaruversion 7146020-02-48)
Analyze
Assay/Time/Point
Wave (2nd/Primary)
S.Vol (Normal)
S.Vol (Decrease)
S.Vol (Increase)
Diluent
Reagent (R1) T1
Reagent (R2) T2
Reagent (R3) T3
Reagent (R4) T4
Abs. Limit
Prozone Limit
Cell Detergent
2Point End
0
340
8.0
0.0
4.0
0.0
16.0
0.0
00301*
250
0
0
0
50
20
0
0
32000
Increase
32000
34
Detergent 1
10
15
34
0
0
0
0
0
901*
901*
901*
901*
0
0
0
0
2 Analysis
Upper
Calib
Calibration Type
Point
Weight
Logit-Log 4P
6
0
Span Point
4
Auto Calibration
Blank
Span
2 Point
Full
Time out
0
0
0
0
Change over
Lot
Bottle
SD Limit
Duplicate Limit
Sensitivity Limit
S1 ABS Limit
999
99
-99999
-32000
%
99999
32000
32000 Abs
Range
Application Code
Report Name
Data Mode
Control Interval
Intrument Factor (Y=ax+b)
Technical Limit**
Repeat Limit*
Expected Value
(Male)
(Female)
(Default)
901*
ATIII
On Board
*
a=
1.0
st. 2
st. 6
st. 2
st. 6
100
100
Y
Y
100
100
Y
Y
Male
Unit
g/L
b=
-99999
-99999
-99999
-99999
-99999
-99999
Range 1
99999
99999
99999
99999
99999
99999
0.0
Cancel
(1)
(2)
(3)
(4)
(5)
(6)
0
0
0
0
0
-+++
+++
++++
Others
<Standard>
Calibration Code**
(1)
001
Position*
1
(2)
003
0.2500
X C(cal)
3
Concentration***
0.00
Sample
Pre.
Dil.
8.0
0.0
0
35.0
8.0
105
(3)
003
0.5565
X C(cal)
3
(4)
003
1.0000
X C(cal)
3
(5)
003
1.5839
X C(cal)
3
(6)
003
2.1833
X C(cal)
3
4.5
0.0
0
8.0
0.0
0
12.5
0.0
0
17.0
0.0
0
Utspädningsvätska – kodnr S 2005
R1 – kodnr S 2006
R3 – kodnr Q 0103, spädd 1:3,10.
(109349-001)
[*]
Fastställt av kunden.
[**]
Den beräknade relativa koncentrationen av Std.2 och Std.6.
[***]
Kalibrator, kodnr OUID. Koncentrationen beräknas som faktorn gånger kalibratorvärdet för den specifika satsen (C(cal), uttryckt
i g/L på OUID Analytical Value Sheet). Antal decimaler angivna för Std.1 definierar antalet decimaler i utskriften. Två
decimaler rekommenderas.
30 190.Q0103.01/SE/SUM/24.03.04 s. 3/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17