Ceruloplasmin
Cobas MIRA Plus
Applikationsnot
Riktlinje för bestämning av
Ceruloplasmin i serum/plasma
på Cobas MIRA Plus
Allmän information
Avsedd användning
Applikationsnoten är avsedd för kvantitativ bestämning av ceruloplasmin i humant provmaterial genom turbidimetri på
Cobas MIRA Plus (1, 2).
Mätområde
Ungefär 0,06-1,3 g/L beroende på kalibratorns specifika sats. I händelse av efterkoncentration eller -spädning kan
området utökas till 0,06-3,9 g/L.
Referensintervall
0,2-0,6 g/L (3). Det rekommenderas att referensintervallet för den lokala populationen fastställs.
Instrumentinställningar
Instrumentprogrammering utförs i enlighet med “Instrumentinställningar” på sidan 3.
Reagenser
Antikropp
Reaktionsbuffert
Utspädningsvätska
Kalibrator
Kontroller
Prover
Humant serum eller heparin-plasma.
Stabil i 7 dagar vid 2-8 ºC.
Stabil i 3 månader vid –20 ºC (om fryst enbart en gång).
Frysta prover skall tinas vid 37 ºC och blandas väl före analysen.
Kalibrator
Spädning av standarder utförs automatiskt av instrumentet.
Reaktionsbuffert
Reaktionsbufferten är bruksfärdig.
Antikropp
Förspäd antikroppen 1:2,20 (t.ex. 1000 µL antikropp + 1200 µL utspädningsvätska).
Filtrering genom ett 0,22 µm membranfilter rekommenderas om, i sällsynta fall, den förspädda antikroppen verkar lätt
grumlig.
Stabilitet hos den outspädda antikroppen: Se utgångsdatum på etiketten.
Stabilitet hos den förutspädda antikroppen: 28 dagar vid 2-8 °C.
Kodnr
Q 0121
S 2008
S 2005
X 0908
X 0939
X 0940
Namn
DakoCytomation Polyclonal Rabbit Anti-Human Ceruloplasmin
DakoCytomation Reaction Buffer 2
DakoCytomation Dilution Buffer 1
DakoCytomation Human Serum Protein Calibrator
DakoCytomation Human Serum Protein Low Control
DakoCytomation Human Serum Protein High Control
Kapacitet: 1 mL förutspädd antikropp är ekvivalent till cirka 20 kyvettavläsningar av standarder eller prover.
Reagensflaskans dödvolym skall beaktas vid beräkning av nödvändig mängd reagens.
Kalibreringsstabilitet
Omkalibrering rekommenderas var 28:e dag eller vid byte av reagenssats, när en ny antikroppsspädning bereds,
antikroppsspädningen filtreras eller kvalitetskontrollen faller utanför det område som etablerats av det enskilda
laboratoriet.
Felsökning
Försök omkalibrera om resultatet är oacceptabelt. Kontrollera reagenser och procedur. Om problemen kvarstår
kontakt instrumentleverantören eller DakoCytomation teknisk service.
(109301-001)
30 133.Q0121.01/SE/SUM/06.04.04 s. 1/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Ceruloplasmin
Cobas MIRA Plus
Resultatdata
Sensitivitet
Ett OD-värde på ungefär 0,13 på Cobas MIRA Plus motsvarar en koncentration av cirka 1,3 g/L ceruloplasmin.
Detektionsgräns
Detektionsgränsen uppskattas till 0,002 g/L.
Precision
Precisionen uppskattades genom testning vid 3 olika ceruloplasmin (CER) -nivåer genom ANOVA-analys av 6
körningar vardera med en ny kalibrering och 6 bestämningar i varje körning.
CER
Standardavvikelse
(g/L)
Medelvärde
(g/L)
Inom
körning
Mellan
körning
Totalt
Total CV
(%)
n
1
0.27
0.005
0.007
0.009
3.3
36
2
0.33
0.006
0.006
0.009
2.6
30
3
0.61
0.008
0.019
0.021
3.4
34
Sera
Noggrannhet
En återvinning av ceruloplasmin på 85-115 % kan förväntas för DakoCytomation Human Serum Protein Low Control,
kodnr X 0939, och DakoCytomation Human Serum Protein High Control, kodnr X 0940.
Linjäritet
Analysen är linjär i området 0,06-1,3 g/L.
Säkerhetsområde
Inget antigenöverskott hittas för ceruloplasminkoncentrationer upp till 5 g/L (den högsta testade koncentrationen).
Interferens
Ingen interferens hittas vid koncentrationer upp till 7 g/L hemoglobin, 600 mg/L bilirubin, och 15 g/L triglycerid.
Alla medel beskrivna i referens 4 undersöktes enligt rekommendationerna i referens 4. Ingen interferens observerades,
utom för Intralipid vid 10 g/L.
Metodjämförelse
Bestämning av ceruloplasmin enligt denna applikationsnot jämfördes med andra kommersiella turbidimetriska
analyser. Data kan fås på begäran.
Referenser
1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: Method optimization: Basic principles for quantitative determination of
human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab Med
2001;39:1098-1109.
2. Operator´s Manual Cobas MIRA Plus, Roche Diagnostic Systems.
3. Dati F, Schumann G, Thomas L, Aguzzi F, Baudner S, Bienvenu J, et al. Consensus of a group of professional
societies and diagnostic companies on guidelines for interim reference ranges for 14 proteins in serum based
on the standardization against the IFCC/BCR/CAP Reference Material (CRM 470). Eur J Clin Chem Clin
Biochem 1996;34:517-20.
4. Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their
concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-85.
(109301-001)
30 133.Q0121.01/SE/SUM/06.04.04 s. 2/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Ceruloplasmin
Cobas MIRA Plus
Instrumentinställningar (Programvaruversion 9215)
P2
TESTS
CER
ROUTINE
/15-JUL-95
GENERAL
MEASUREMENT MODE
REACTION MODE
CALIBRATION MODE
REAGENT BLANK
CLEANER
:
:
:
:
:
ABSORB
D-R-S-SR1
LOGIT/LOG5
REAG/DIL
NO
WAVELENGTH
DECIMAL POSITION
UNIT
:
:
:
340 nm
2
g/l
ANALYSIS
DILUENT
NAME:
DIL1
FACTOR:
15.00
TIME:
NO
STD:
MAIN DIRECT
[*]
MAIN STD:
(15.00 × C(Cal)) g/l
POS:
1
FACT.STD-1:
3.50
2:
3:
7.00
4:
5:
21.10
6:
7:
NO
8:
POST DIL. FACTOR
:
CONC.FACTOR:
SAMPLE
DILUENT
REAGENT
START R1
DILUTION
TEST
RANGE
NORM.
RANGE
NUMBER OF
CALC. STEP A
READINGS
CALIBRATION
CALIB.
BLANK
REAG. RANGE
1
40.0
H2O
50.0
CYCLE:
VOLUME:
1
200
CYCLE:
VOLUME:
NAME:
VOLUME:
5
50.0
H2O
20.0
LOW:
HIGH:
LOW:
HIGH:
STEPS :
:
FIRST:
INTERVAL:
LOW:
HIGH:
LOW:
HIGH:
BLANK RANGE
STANDARDS[**]
1:
3:
5:
7:
NO
REPLICATE
DEVIATION
CORRECTION STD
CONTROL
CS1 POS:
CS2 POS:
CS3 POS:
3.00
NO
CYCLE:
VOLUME:
NAME:
VOLUME:
CALCULATION
SAMPLE
LIMIT:
REAC.
DIRECTION:
CHECK:
ANTIGEN
EXCESS:
CONVERS.
FACTOR:
OFFSET:
1.29
0.64
0.21
2:
4:
6:
8:
:
:
:
4.70
12.30
80.00
NO
µl
µl
µl
µl
µl
NO
INCREASE
ON
NO
1.00000
0.00000
OFF
ON
NO
NO
1
ENDPOINT
4
LAST: 16
ON REQUEST
NO
NO
NO
NO
0.96
0.37
0.06
g/l
g/l
g/l
NO
SINGLE
5.0 %
NO
NO
NO
NO
DIL 1 – kodnr S 2005
REAGENS – kodnr S 2008
START R1 – kodnr Q 0121, förspädd 1:2,20.
[*]
Kalibrator, kodnr X 0908. Koncentrationen beräknas som faktorn gånger kalibratorvärdet för den specifika satsen (C(cal), uttryckt i g/L på
X 0908 Analytical Value Sheet).
[**]
Dessa värden matas inte in. De beräknas automatiskt av instrumentet från "MAIN STD" och "FACT.STD" i avsnittet "ANALYSIS" av
instrumentinställningarna. Värdena varierar en aning med kalibratorvärdet.
(109301-001)
30 133.Q0121.01/SE/SUM/06.04.04 s. 3/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17