LABEX Användarmöte
20-21 november 2012
Stockholm
Anti-IgA i gelteknik
En snabbtest för ökad patientsäkerhet
Cecilia Pardi, Överläkare – KITM Tranfusionsmedicin
Sahlgrenska Universitetssjukhuset
Vårt tankesätt på TM Sahlgrenska…
• Patientsäkerhet är ett mål som medför en dynamisk process med
ständig förbättring och utveckling
• Att förebygga och att snabbt tolka och hantera akuta
transfusionsreaktioner är en utmaning
• Att optimera resurser är en utmaning
• TM Sahlgrenska har försökt genom åren att skapa ett register av
patienter med känd IgA brist
• 2011 infördes en snabbtest för identifiering av patienter med
antikroppar mot IgA
Selektiv IgA brist
Selektiv IgA-brist är en av de vanligaste primära immunbristsjukdomarna.
• S-IgA< 0,07 g/L med normal nivå s-IgM och normal/ förhöjd nivå s- IgG hos
patient > än 4 år då andra orsaker till hypogammaglobulinemi kan uteslutas.
• 1/600 genomsnittigt i den kaukasiska befolkningen
1/143 i den arabiska halvön
1/18000 i Japan
• Genetisk backgrund ej tydligt definierad. Ökad benägenhet i släkten har
observerats och speciellt mamma-barn.
• 20% har ökad infektionsfrekvens: bakterier * ÖLI:er, pneumoni
* Magtarminfektioner
• Ökad frekvens allergier, autoimmuna sjukdomar.
Vissa maligniteter kan vara associerade med IgA brist.
En del patienter bildar antikroppar mot IgA som kan
ge upphov till allvarliga komplikationer vid transfusion av
blodkomponenter.
Allergisk reaktion (svår)
Ångest, klåda, feber, frossa, oro, ansiktsrodnad,
takykardi, blodtrycksfall, anafylaxi.
Anafylaxi
Akut, svår, snabbt insättande systemisk överkänslighetsreaktion
från flera organsystem, potentiellt livshotande.
Alltid: objektiv respiratorisk, kardiovaskulär och/eller kraftig
allmänpåverkan.
FALL 1
Vinter 2010
• 16-åring flicka inkommer med akut leversvikt
läkemedelinducerad
• Anafylaktisk reaktion uppstår vid transfusion av 1
plasmaenhet
• Plasmabyte behövs och jourhavande läkare TM kontaktas för
beslut om hur fortsatt behov av plasma skall handläggas
• Patientens mamma har IgA brist enligt info från PAL
• IgA fattig plasma lämnas ut och plasmabyte utförs
utan komplikation
• Prov skickas till Immunologen för bestämning av
total IgA och anti-IgA i fall IgA- brist dokumenteras
Utfall: normal nivå s–IgA.
FALL 2
Vinter 2010
• Medelålders man inkommer akut under natten med
misstänkt aortaruptur
• IgA brist enligt PAL, okänd på TM
• Information om antikroppar mot IgA saknas
• Patienten förs till operation
• Grundbeställning: 10 ery+ 10 plasma enh.
• ”Vanliga” blodkomponenter lämnas ut
• Patienten transfunderas utan komplikation
• Prov skickas till Immunologen för bestämning av total IgA och
antikroppar mot IgA
Utfall: Total IgA brist (≤ 21 ug/L bedöms som total brist)
Anti-IgA 6 Enh/mL svagt pos (≤5 bedöms som neg)
ID-PaGIA Anti-IgA Antibody Test
• Rödfärgade polymerpartiklar är sensibiliserade med IgA av
humant ursprung.
• Om patientprov innehåller antikroppar mot IgA
förekommer en antigen/antikropp reaktion med synlig
agglutination som avläses makroskopiskt.
ID-PaGIA IgA deficiency test
• Rödfärgade partiklar är sensibiliserade med
kaninantikropp mot humant IgA.
• Om patientens serum/plasma innehåller IgA
förekommer synlig agglutination.
Utförande
10 ul serum
eller plasma
50 ul polymerpartiklar
5m inkubation rum t +
10 m centifugering
Avläsning
Våren 2010 - Validering/Utvärdering av
IgA deficiency och anti-IgA Antibody test
Våra mål
• Vem: patienter (ej screening av blodgivare)
• När: - svår allergisk reaktion vid transfusion av
blodkomponenter
- känd IgA brist när information om antikroppar
mot IgA saknas
• Varför: beslut om transfusionspolicy i akut läge
Plan
Sammanlagt 46 prover analyserades varav:
• 6 blodgivare (friska individer/kontroll)
• 40 patienter: *1 partiell brist med svaga antikroppar
*4 partiell brist utan antikroppar
*26 total brist med antikroppar (varierande styrka)
* 8 total brist utan antikroppar
* 1 pool med IgA antikroppar och med
svaga antikroppar mot IgA (int. ktr. i bruk på
Immunologen)
Proverna analyserades blint i gelteknink och kontrollerades
successivt mot utfallet från FEIA (fluorescence enzyme
immunoassay) utförd på Immunologen.
Total-IgA: värden ≤ 21 ug/L bedöms som total IgA brist
Anti-IgA: <5 enh/mL bedöms som neg
6-50 enh/mL bedöms som svagt pos
≥ 50 enh/mL bedöms som pos
Resultat
Typ
Antal
IgA
Anti-IgA
Avvikelser
Blodgivare
6
Pos
Neg
-----
Partiell brist/ svaga ak
1
Neg
Pos
-----
Partiell utan ak
4
Pos
Neg
-----
Total brist utan ak
8
Neg
Neg
-----
Total brist med ak
23
Neg
Pos
-----
” sv. ak. (10 och 7 U/mL FEIA)
2
Neg
Neg
Falskt neg anti-IgA
” sv. Ak ( 6U/mL FEIA)
1
Pos
Neg
Falskt pos IgA
Falskt neg anti-IgA
(15ug/L)
Pool med IgA och anti-IgA (ktr.)
1
Pos
Bl.bild
-----
Bedömning
• IgA deficiency test: lämplig för identifiering av total IgA brist
(1 falskt pos av 34)
Ej lämplig för identifiering av partiell IgA brist ( 4 av 5 pat är
pos)
• Anti-IgA test: lämplig för identifiering av anti-IgA (av 28
analyserade var 3 falskt neg; de hade väldigt svaga ak strax
över detektionsgräns med FEIA)
Anti-IgA antibody test
• Specificitet 100%
• Sensitivitet 89,3%
• Reproducerbarhet 100%
Utgångna kort (2 mån) testades, pos och neg ktr ua:
samma utfall som ovan.
Slutsatser efter Utvärdering
• IgA deficiency test infördes ej vid det tillfället (lämplig i annat
sammanhang t ex screening av blodgivare för total IgA brist).
• Anti-IgA test infördes under förutsättning att:
Jourhavande läkare kontaktas för beslut om utförande,
bedömning av resultat, transfusionspolicy och beslut om
fortsatt utredning krävs.
Arbetsflöde vid känd IgA brist
• Samarbete med Immunologen för överföring av information om
nyupptäckta patienter med IgA brist med eller utan antikroppar
mot IgA.
• IgA brist +antikroppar mot IgA  Brevlåda på ”skärm” med
blodrekommendationer (tvättade erytrocyter/trombocyter, IgA
fattig plasma).
• IgA brist utan antikroppar mot IgA  Brevlåda på ”skärm” att
sätta anti-IgA i gelteknik vid transfusionsbehov och kontakt med
jourhavande läkare.
Svår allergisk reaktion, IgA status okänd…
Anti-IgA i gelkort
Om pos: misstänkt IgA brist med anti-IgA
Fortsatt utredning med
automatiserad FEIA
Beslut om fortsatt
transfusionspolicy utifrån
resultat
Uppföljning
23 patienter har utretts sedan feb 2011 varav:
(11 med tranfusionsreaktion , 12 med IgA brist)
• 17 neg för antikroppar mot IgA
• 6 pos för antikroppar mot IgA
varav:
• 8 neg har konfirmerats med FEIA (kval. ktr.)
• 4 pos har konfirmerats med FEIA (kval. ktr.)
* 1 patient som upprepat haft måttlig transfusionsreaktion vid
transfusion av vanliga blodkomponenter (ej typisk anafylaktisk
reaktion) var pos mot IgA i gelteknik och har successivt visat sig
ha partiell IgA brist och svaga antikroppar mot IgA med FEIA.
* 4 patienter utredda pga svår transfusionskomplikation, var
neg för antikroppar mot IgA i gelteknik och har transfunderats
med ”vanliga blodkomponenter” u.a. vid fortsatt blodbehov.
Neg resultat för antikroppar mot IgA har successivt erhållits
även med FEIA.
Konklusion
• ID –PaGIA Anti-IgA Antibody test har visat sig ha hög
specificitet och känslighet .
• Att kunna erhålla ett resultat på 20 minuter har särskild
betydelse i ett akut läge då detta ger möjlighet att snabbt
fatta beslut om transfusionspolicy med fokus på
patientsäkerhet.
• Det är också värdefullt med tanke på att tillgången till
tvättade/IgA-fattiga blodkomponenter är begränsad och
utgör en organisatorisk utmaning, framför allt vid transfusion
av stora volymer på kort tid.