Gevinst ved bruk av virusdyrkning • Vårt viruslaboratorium. • Cellelinjene vi bruker i dyrkningsbrettene. • Hvilke prøver såes ut og hva slags virus finner vi. • Gevinst/ fordeler vi får ved dyrkning av virus. Virusdyrkning • Få laboratorier som bruker dyrkning av virus i diagnostikken. • En fagansvarlig bioingeniør • Vintersesongen: 3 bioingeniører • Ser etter cytopatisk effekt (CPE) hos de ulike cellelinjene, som er forårsaket av virus fra pasientprøver. Humane embryonale fibroblaster (HE-celler) • Begrenset levetid • Tilsendt fra FHI ved bestilling • Virus som gir god CPE på denne cellelinjen: – Herpes Simplex – Enterovirus – Cytolomegavirus Trondheim Malignt Gliom (TMG-celler) • Cellelinjen ble i 1983 etablert fra en pasient med gliablastom (glioma multiforme) • Mange virus gir tydelig CPE på TMG • Virus som gir god CPE på denne cellelinjen: – Adenovirus – RS-virus – Herpes simplex – Influensavirus Apenyre celler (LLC-MK2) • Etablert i 1955 • Hurtigvoksende og robuste • Virus som gir god CPE på denne cellelinjen: – Influensavirus – Parotittvirus – Parechovirus Negativ kontroll Cellebrett 10-dagers Luftveis HE HE HE HE HE LLC LLC LLC LLC LLC TMG TMG TMG TMG TMG HE HE HE HE HE LLC LLC LLC LLC LLC TMG TMG TMG TMG TMG HE HE HE HE HE TMG TMG TMG TMG TMG TMG TMG TMG TMG TMG TMG TMG TMG TMG TMG LLC LLC LLC LLC LLC TMG TMG TMG TMG TMG 3-ukers HE HE HE HE HE HE HE HE HE HE TMG TMG TMG TMG TMG HE HE HE HE HE HE HE HE HE HE TMG TMG TMG TMG TMG Grad av CPE HE LLC-MK2 TMG1-12 Adenovirus (typevariasjon) +++ ++ +++ Astrovirus - - - Norovirus - - - Cytomegalovirus +++ - (+) Enterovirus (typevariasjon) ++(+) + +(+) Herpes simplex virus 1, 2 +++ ++ +++ Humant metapneumovirus + +(+) + Influensavirus A + + ++ Influensavirus B + + + Rhinovirus (+) - - RS-virus A, B +(+) ++ +++ Parainfluensavirus 1, 2, 3 +(+) +(+) ++ Varicella-zoster virus + ? + Epstein Barr - - - Våre kriterier for utsåing av prøver til virusdyrkning: - Prøver fra inneliggende pasienter med luftveissymptomer - Prøver fra inneliggende pasienter der det er mistanke om Enterovirus og Parechovirus. - Urin, fostervann og morsmelk såes ut m.h.p CMV. Utsåing av prøver Antall prøver sådd ut i 2014: ca. 6000 Antall prøver positiv dyrkning 2014: 702 Funnet på Virusdyrkning før PCR (juni til september): 21 Respiratorisk syncitialt virus (RS) TMG-celler Luftveisvirus • Alle luftveisprøver blir farget med en blanding av antistoff. • Detekterer virus som ikke gir visuelle celleforandringer • Fluorescens tilstede spesifikk farging Pasient 1: • Sykdomshistorie: Barn ca. 1 år. Snørrete, noe oksygenbehov ( fra Barn Intensiv) • Nasopharyxaspirat • PCR-analyser: LUFT (dvs 14 luftveisvirus + Mycoplasma pneumomiae, Chlamydophila pneumoniae (TWAR), B.pertussis) • Virusdyrkning: CMV positiv Pasient 2: • Sykdomshistorie: 1,5 år innlagt, Feber, store tonsiller • Halssekret • PCR-analyse: B. pertussis, M. pneumoniae, TWAR. • Virusdyrkning: HSV Pasient 3: • Sykdomshistorie: Inneliggende pasient med hoste og feber • Halssekret • PCR-analyse: B. pertussis, M. pneumoniae, TWAR. • Virusdyrkning: Influensa A Fordeler ved bruk av virusdyrkning • Kvalitetssikkert – PCR finner kun det man analyserer på – Pre-analytiske feil kan oppstå Fordeler ved bruk av virusdyrkning Influensavirus • Des.2012: Vekst av influensa B Negativ på PCR • QCMD analysert med gode resultater Infl.B HA-PCR Fordeler ved bruk av virusdyrkning • PCR-kontroller • ADV, ENT lenge pos. PCR «ikke» klinisk betydning – dyrkning pos mulig klinisk betydning Takk for oss
© Copyright 2024