Gevinst ved bruk av
virusdyrkning
• Vårt viruslaboratorium.
• Cellelinjene vi bruker i dyrkningsbrettene.
• Hvilke prøver såes ut og hva slags virus
finner vi.
• Gevinst/ fordeler vi får ved dyrkning av
virus.
Virusdyrkning
• Få laboratorier som bruker dyrkning av
virus i diagnostikken.
• En fagansvarlig bioingeniør
• Vintersesongen: 3 bioingeniører
• Ser etter cytopatisk effekt (CPE) hos de
ulike cellelinjene, som er forårsaket av
virus fra pasientprøver.
Humane embryonale fibroblaster
(HE-celler)
• Begrenset levetid
• Tilsendt fra FHI ved bestilling
• Virus som gir god CPE på denne
cellelinjen:
– Herpes Simplex
– Enterovirus
– Cytolomegavirus
Trondheim Malignt Gliom
(TMG-celler)
• Cellelinjen ble i 1983 etablert fra en pasient med
gliablastom (glioma multiforme)
• Mange virus gir tydelig CPE på TMG
• Virus som gir god CPE på denne cellelinjen:
– Adenovirus
– RS-virus
– Herpes simplex
– Influensavirus
Apenyre celler
(LLC-MK2)
• Etablert i 1955
• Hurtigvoksende og robuste
• Virus som gir god CPE på denne
cellelinjen:
– Influensavirus
– Parotittvirus
– Parechovirus
Negativ
kontroll
Cellebrett
10-dagers
Luftveis
HE
HE
HE
HE
HE
LLC
LLC
LLC
LLC
LLC
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
HE
HE
HE
HE
HE
LLC
LLC
LLC
LLC
LLC
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
HE
HE
HE
HE
HE
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
LLC
LLC
LLC
LLC
LLC
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
3-ukers
HE
HE
HE
HE
HE
HE
HE
HE
HE
HE
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
HE
HE
HE
HE
HE
HE
HE
HE
HE
HE
TMG
TMG
TMG
TMG
TMG
Grad av CPE
HE
LLC-MK2
TMG1-12
Adenovirus (typevariasjon)
+++
++
+++
Astrovirus
-
-
-
Norovirus
-
-
-
Cytomegalovirus
+++
-
(+)
Enterovirus (typevariasjon)
++(+)
+
+(+)
Herpes simplex virus 1, 2
+++
++
+++
Humant metapneumovirus
+
+(+)
+
Influensavirus A
+
+
++
Influensavirus B
+
+
+
Rhinovirus
(+)
-
-
RS-virus A, B
+(+)
++
+++
Parainfluensavirus 1, 2, 3
+(+)
+(+)
++
Varicella-zoster virus
+
?
+
Epstein Barr
-
-
-
Våre kriterier for utsåing av
prøver til virusdyrkning:
- Prøver fra inneliggende pasienter med
luftveissymptomer
- Prøver fra inneliggende pasienter der
det er mistanke om Enterovirus og
Parechovirus.
- Urin, fostervann og morsmelk såes ut
m.h.p CMV.
Utsåing av prøver
Antall prøver sådd ut i 2014: ca. 6000
Antall prøver positiv dyrkning 2014: 702
Funnet på Virusdyrkning før PCR
(juni til september): 21
Respiratorisk syncitialt virus (RS)
TMG-celler
Luftveisvirus
• Alle luftveisprøver blir farget med en blanding av
antistoff.
• Detekterer virus som ikke gir visuelle
celleforandringer
• Fluorescens tilstede
 spesifikk farging
Pasient 1:
• Sykdomshistorie: Barn ca. 1 år. Snørrete, noe
oksygenbehov ( fra Barn Intensiv)
• Nasopharyxaspirat
• PCR-analyser: LUFT
(dvs 14 luftveisvirus + Mycoplasma
pneumomiae, Chlamydophila pneumoniae
(TWAR), B.pertussis)
• Virusdyrkning: CMV positiv
Pasient 2:
• Sykdomshistorie: 1,5 år innlagt, Feber, store
tonsiller
• Halssekret
• PCR-analyse: B. pertussis, M. pneumoniae,
TWAR.
• Virusdyrkning: HSV
Pasient 3:
• Sykdomshistorie: Inneliggende pasient
med hoste og feber
• Halssekret
• PCR-analyse: B. pertussis, M.
pneumoniae, TWAR.
• Virusdyrkning: Influensa A
Fordeler ved bruk av virusdyrkning
• Kvalitetssikkert
– PCR finner kun det man analyserer på
– Pre-analytiske feil kan oppstå
Fordeler ved bruk av virusdyrkning
Influensavirus
• Des.2012: Vekst av influensa B
Negativ på PCR
• QCMD analysert med gode resultater
Infl.B HA-PCR
Fordeler ved bruk av virusdyrkning
• PCR-kontroller
• ADV, ENT  lenge pos. PCR  «ikke» klinisk
betydning
– dyrkning pos  mulig klinisk betydning
Takk for oss