01.06.15 Biologiske medikamenter – serumkonsentrasjonsmålinger Overlege, dr. med. Knut E. A. Lundin Endoscopy Unit, Dept of Transplantation medicine Centre for Immune Regulation Oslo University Hospital, Rikshospitalet Medical Faculty, University of Oslo Immune treatment of IBD Disclosures • • • • • MSD Hospira Orion pharma Abbvie TakedaNycomed • • • • Regeneron ImmusanT Alvine PharmaceuAcals GlaxoSmithKline EMA certified expert B cell receptor (Ig) sequence • TNF-‐α • Interleukin 2 • Interferon γ • MAP kinase inhibitor • Interleukin 12/23 • α4β7 integrin • Interleukin 6, 10, 11 • Etc etc • Both small molecules, cytokines, antisense, mAb,growth factors Immunoglobulins as anAgens fonc-02-00159-g002.jpg 892 × 1 185 bildepunkter 08.01.14 21:35 • Immunoglobulins very good anAgens • Protein sequence foreign to the immune system • Clinical immunogenicity against IFX – RA approx 10% – Psoriasis 20-‐50% – Crohns 50-‐60% http://c431376.r76.cf2.rackcdn.com/35762/fonc-02-00159-r2/image_m/fonc-02-00159-g002.jpg 6 Side 1 av 1 1 s of Response and loss of Infliximab response Infliximab • Intravenous administration • 30% of patients are primary non1,2 • Dosage responders 5mg/kg every 8wks • Trough (TL) = drug level in • 50%levels of patients lose clinical serum just before benefit over next timeiv(secondary mary non- nical ndary 01.06.15 • Intravenous administration • Dosage 5mg/kg every 8wks • Trough levels (TL) = drug level in serum just before next iv non-responders)1,2 FarmakokineAkk – trough / peak / • Loss of profile response ”mellommåling” can be Pharmacokinetic of infliximab: managed clinically by FarmakokineAkk Pharmacokinetic profile of infliximab: ween iv – Increasing dose – Decreasing intervals between iv tients rapy3 seen in 5-18% of IBD patients under maintenance therapy3 loss of response infliximab (ATI) are • to Antibodies to infliximab (ATI) are oss of Adapted from Tracey D. et al., Pharm & Ther 2008 Adapted from Tracey D. et al., Pharm & Ther 2008 Infliximab 7 8 AJG 2011; 3. Cassinotti A, Travis 1. Allez S, IBD M2009 et al., JCC 2010; 2. Yanai H, Hanauer SB, AJG 2011; 3. Cassinotti A, Travis S, IBD 2009 clinical condary • Intravenous administration • Dosage 5mg/kg every 8wks • Trough levels (TL) = drug level in serum just before next iv be Pharmacokinetic profile of infliximab: rimary non- FarmakokineAkk AnA-‐adalimumab 121 RA pasienter. 40 mg adalimumab q 2 uke. 21 pasienter med anA-‐ adalimumab e 28 uker. EULAR respondere hadde mindre anA-‐ ada og høyere ada nivå. between iv ab (ATI) are patients herapy3 Adapted from Tracey D. et al., Pharm & Ther 2008 Bartelds et al Ann Rheum Dis 2007 9 SB, AJG 2011; 3. Cassinotti A, Travis S, IBD 2009 11 12 Maser et al Clin Gastro Hepatol 2006 2 01.06.15 • 155 patients had HACA and IFX conc measured • 177 tests • Indications: Loss of response 49 %, partial response 22 %, hypersensitivity 10 % 13 14 Afif et al. Am J Gastro 2010 Serum konsentrasjons måling 2008-‐2014 • ForsikAg start 2008 – Gastrolab RH • Innsamling og analyse frem Al 2014 – ELISA basert system (mye pipedering) Gut 2014 – Støde fra MSD • Fra 2014 “automaAsk” analyse på OUS Radiumhospitalet -‐ stordrif ELISA for måling av serumkonsentrasjon ELISA-‐metode for måling av anA-‐TNF-‐α i serum. Ternant et al. Ther Drug Monit 2006 1.Micro(ter plate (96-‐brønner) inkuberes med humant TNF-‐α. Vask x 4 2. Gjenværende proteinbindende steder i brønnene blokkeres med PBS-‐buffer (lsaM bovint serum albumin. Vask x 4 3. TilseMer standarder (0.25-‐40 ng/ml), kjente kontroller og ukjente prøver (fortynnet 1/100) i duplikat. Vask x 4 4. TilseMer HRPan( human IgG, Fc-‐spesifikk Vask x 4 5. TilseMer substrat TMB (tetramethylbenzidine) 6. TilseMer stopp reagens (syre) 7. Avleses på ELISA-‐leser ved 450 nm Uspesifikk bakgrunns-‐binding blir testet ved hver ukjent prøve, ved å inkubere med PBS-‐buffer i stedet for TNF-‐α (punkt1) . Det er oppservert uspesifikk binding i serum fra RA pasienter. Analysen tar 2 dager. HRP-conjugated secondary antibody Anti-TNF agent (drug) TNF-molecule 18 3 01.06.15 Known amount added to nil-‐serum DiluAon 1:2 of three sera 19 20 Knut E. A. Lundin Knut E. A. Lundin Konklusjon -‐ take home message Intra-‐assay correlaAon • Vi Albyr gode medikamentanalyser som gir valide resultater • Mange pasienter har for lave eller for høye medikamentkonsentrasj oner 21 Knut E. A. Lundin 22 DELFIA assay 41% 20% • Gjentade målinger sammenfaller med større andel pasienter i “terapeuAsk vindu” TR-‐Fluorometry of Eu DELFIA 4 01.06.15 TIME-‐RESOLVED FLUOROMETRY OUS RADIUM HOSPITALET • Tar i mot prøver fra alle rekvirenter • Analysekostnad noe under HELFO takst NOK 85 (ikke medrenget arbeidskostnader) • Kostnad hvis kit ca NOK 350 pr prøve • Ønsker volum • Seder opp anA-‐drug anAbody ved lave konsentrasjoner Oppsummering og konklusjoner Gastropasienter analysert på DNR siste 6.mnder • Serumkonsentrasjonsmåling av biologiske legemidler Infliksimab mg/L • Infliksimab (3-‐8 mg/L), ca 1400 prøver: 50 45 40 • 40 % av målingene 3-‐8 mg/L • 30 % < 3 mg/L • 30 % > 8 mg/L 35 30 25 Infliksimab mg/L 20 15 10 5 • Adalimumab (5-‐12 mg/L), ca 830 prøver: 0 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 Adalimumab mg/L • 50 % av målingene 5-‐12 mg/L • 30 % < 5 mg/L • 20 % > 12 mg/L 45 40 35 30 25 Adalimumab mg/L 20 15 10 5 – Avdekker mange pasienter med uAlsiktet høye eller for lave konsentrasjoner – AnA-‐drug anAbodies aktuelt men kons. vikAgst – Klinisk meget nyrg verktøy – Stort prøvevolum – Robuste analyser – Norge ledende land i utviklingen – Intet negaAvt signal vedr bioAlsvarende 0 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 Takk Al • Jorunn Bratlie • Merete Gedde-‐Dahl • Magne Rekvik • Nils Bolstad • David Worren • Stein Bergan • Jørgen Jahnsen • Bjørn Moum • Samarbeidende gastroenterologer • Anne Gils 5
© Copyright 2024