1. No category

Alfa-1-mikroglobulin
Beckman Coulter AU-systemer
Bruksmerknad
Retningslinje for bestemmelse av
Alfa-1-mikroglobulin (protein HC) i urin
på Beckman Coulter AU systemer
Generell informasjon
Følgende alfa-1-mikroglobulin-bruk har blitt fastsatt på AU480 og gjelder for AU400-, AU600-, AU640-, AU2700-,
AU5400- og AU680-systemer ved bruk av samme instrumentinnstillinger.
Tilsiktet bruk
Bruksmerknaden er beregnet for kvantitativ bestemmelse av alfa-1-mikroglobulin i humant urinprøvemateriale ved bruk
av turbidimetri på Beckman Coulter AU-systemer (1, 2).
Måleområde
Ca. 2,5-100,0 mg/L avhengig av den spesifikke loten til kalibratoren.
Referanseintervall
0 -7 mg/L (3). Det anbefales å bestemme referanseintervallet for den lokale populasjonen.
Instrumentinnstillinger
Instrumentprogrammering utføres i henhold til "Instrumentinnstillinger" på side 3.
Reagenser
Antistoff
Reaksjonsbuffer
Diluent
Kalibrator
Kontroller
Prøver
Human urin.
Stabil i 10 dager ved 2-8 ºC.
Det anbefales ikke å fryse prøvene før analysen.
Kalibrator
Dako Human Urine Protein Calibrator, kode X0975 fortynnes manuelt ved bruk av følgende fortynningsserie.
Ytelsesdata for Beckman Coulter AU480
Kode
Q0495
S2007
S2005
X0975
X0976
X0977
Standard
Nr. (i)
Std. (1)
Std. (2)
Std. (3)
Std. (4)
Std. (5)
Std. (6)
Navn
Dako Polyclonal Rabbit Anti-Human Alpha-1-Microglobulin
Dako Turbidimetry/Nephelometry Reaction Buffer 1
Dako Turbidimetry/Nephelometry Dilution Buffer 1
Dako Human Urine Protein Calibrator
Dako Human Urine Protein Low Control
Dako Human Urine Protein High Control
X0975
µL
[
[
[
[
[
[
10
20
50
100
280
350
NaCl
µL
]
]
]
]
]
]
[
[
[
[
[
[
390
380
310
200
140
0
]
]
]
]
]
]
f(i)
Kons.
faktor
C(i)
Konsentrasjon
f(1)
f(2)
f(3)
f(4)
f(5)
f(6)
0,0250
0,0500
0,1389
0,3333
0,6667
1,0000
[0,0250 x C(Cal)
[0,0500 x C(Cal)
[0,1389 x C(Cal)
[0,3333 x C(Cal)
[0,6667 x C(Cal)
[1,0000 x C(Cal)
]
]
]
]
]
]
Konsentrasjon av alfa-1-mikroglobulin i standardene (C(i)) (mg/L) kalkuleres fra alfa-1-mikroglobulinkonsentrasjonen
(C(Cal)) (mg/L) som er oppgitt for den spesifikke loten av kalibratoren (X0975) og den relative konsentrasjonsfaktoren
(f(i)) gjennom multiplikasjon, dvs. C(i) = f(i) x C(Cal). Se spesifikasjonsarket for nøyaktig C(Cal)-verdi på aktuell lot.
Reaksjonsbuffer (R1)
Reaksjonsbufferen er klar til bruk. Stabilitet om bord er 30 dager.
Antistoff (R2)
Antistoffet er klart til bruk.
Hvis antistoffet ser ut til å være noe turbid, anbefales filtrering gjennom et 0,22 µm membranfilter.
Stabilitet ved 2-8 °C: Se spesifikasjonsblad og utløp på etiketten.
Stabilitet om bord er 30 dager.
Kapasitet: 1 mL antistoff tilsvarer omtrent 18 kyvetteavlesinger av standarder eller prøver. Dødvolumet til
reagensflasken skal legges til ved kalkulering av nødvendig reagensmengde.
Kalibreringsstabilitet
Det er anbefalt å rekalibrere hver 30. dag eller når reagensloter endres, når antistoffet filtreres eller når
kvalitetskontrollresultatene faller utenfor det området som er fastsatt av det enkelte laboratoriet.
Feilsøking
Hvis ytelsen er uakseptabel, prøv å rekalibrere. Kontroller reagenser og prosedyre. Hvis problemet vedvarer, ta
kontakt med instrumentleverandøren eller Dako tekniske service.
(122562-001)
D09604NO_001_Q0495.01/PHC/2012.06 s. 1/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Alfa-1-mikroglobulin
Beckman Coulter AU-systemer
Ytelsesdata
Sensitivitet
En OD-verdi på omtrent 0,25 på Beckman Coulter AU480 tilsvarer en alfa-1-mikroglobulinkonsentrasjon på 100 mg/L.
Påvisningsgrense
Påvisningsgrensen er anslått til 0,72 mg/L.
Presisjon
Presisjonen ble beregnet ved bruk av to kontroller og to urinprøver av ANOVA analyse av 3 kjøringer, hver med en ny
kalibrering og 6 bestemmelser i hver kjøring.
A1M
Gjennomsnittsverdi
(mg/L)
Prøver
Standardavvik
(mg/L)
Innen
kjøringen
Mellom
kjøringer
Sum
Total CV (%)
n
Urine Low Control,
Kode X0976
16,4
0,20
0,80
0,83
5,0
18
Urine High Control,
Kode X0977
81,9
0,46
3,11
3,14
3,8
18
Prøve med lavt
humant urinnivå
11,2
0,22
0,47
0,52
4,6
18
Prøve med høyt
humant urinnivå
48,5
0,31
1,76
1,79
3,7
18
Nøyaktighet
En gjenvinning av alfa-1-mikroglobulin på 85–115 % kan forventes for Dako Urine Protein Low Control, kode
X0976, og Dako Urine Protein High Control, kode X0977.
Linearitet
Analysen er lineær i området 2,5-100 mg/L.
Sikkerhetsområde
Ingen antigenoverflod finnes for alfa-1-mikroglobulinkonsentrasjoner på opptil 1194 mg/L.
Interferens
Ingen kryssreaksjon med kjente proteiner har blitt observert.
Ingen interferens finnes ved konsentrasjoner på opptil 5 g/L kreatinin, 50 g/L urea, 100 g/L glukose, 25 mmol/L kalsium
og 20 g/L albumin.
Prøver som inneholder hemoglobin og/eller bilirubin kan gi en for høy verdi av alfa-1-mikroglobulin i den nedre enden
av måleområdet.
Metodesammenligning
Bestemmelser av alfa-1-mikroglobulin ifølge denne bruksmerknaden ble sammenlignet med andre kommersielle
turbidimetriske analyser. Data er tilgjengelig på forespørsel.
Referanser
1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: Method optimization: Basic principles for quantitative determination
of human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab
Med 2001; 39:1098-1109.
2. Olympus AU manual(s).
3. Tencer J, Thysell H, Grubb A. Analysis of proteinuria: reference limits for urine excretion of albumin, protein
HC, Immunoglobulin G, κ- and λ-immunoreactivity, orosomucoid and α1-antitrypsin. Scan J Clin Lab Invest
1996;56:691-700.
(122562-001)
D09604NO_001_Q0495.01/PHC/2012.06 s. 2/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Alfa-1-mikroglobulin
Beckman Coulter AU-systemer
Instrumentinnstillinger
Specific test parameters
Sample vol.
Pre-Diluent Rate
Rgt. Volume R1(R1-1)
R2(R2-1)
15.0 µL
1
∇
180 µL
50
µL
Common Rgt. Type
None
Wavelength
Pri 410 ∇nm
Method
END ∇
Reaction Slope
+
∇
Measuring Point 1 First
10
Measuring Point 2 First
Liniearity Limit
%
lag time Check
∇
Dilution
0
µl
Dilution
0
µl
Dilution
Name
Sec
Last
Last
20
None
OD limit
Min OD
-0.1000
Reagent OD limit
First
Low -0.1000
Last
Low -0.1000
Max OD
2.5000
High
High
2.5000
2.5000
High
B
B
100
0
0
µl
∇nm
27
Dynamic range Low
Correlation Factor A
Factor for Maker A
2.50
1
1
On-board stability
LIH Influence Check
Lipemia
Icterus
Hemolysis
30
Day
∇
∇
∇
∇
2
∇
0
Hour
+
∇
Yes
∇
Lot/Lot
∇
Calibration specific
Calibration Type:
6AB
<Calibration Parameters>
Calibrator
Point 1
*
∇
Point 2
*
∇
Point 3
*
∇
Point 4
*
∇
Point 5
*
∇
Point 6
*
∇
Point 7
∇
Point 8
∇
Point 9
∇
Point 10
∇
∇
Formula:
OD
Conc
**
**
**
**
**
**
Fortynningsvæske – Kodenr. S2005
Counts:
Low
High
-0.1000
2.5000
-0.1000
2.5000
-0.1000
2.5000
-0.1000
2.5000
-0.1000
2.5000
-0.1000
2.5000
Slope Check
Allowance Range Check
ο Reagent Blank
ο Calibration
Advanced Calibration
Operation
Interval (RB/ACAL)
<Point Cal. For
No. of Correction Points
Master Curve>
Calibrator
OD
Point-1
∇
Point-2
∇
MB Type Factor:
∇
SPLINE
∇
Use Master Curve
OD Range
Low
High
Conc
1-Point Calibration Point
R1 – Kodenr. S2007
None
∇
∇
ο Lot Calibration
Stability
Rgt Blank
Calibration
30
30
Day
Day
0
0
ο with Conc-0
R2 – Kodenr. Q0495.
[*]
Definert av kunden.
[**]
Konsentrasjon av de 6 standardene som ble oppnådd med fortynning av Dako Human Urine Protein Calibrator, kodenr. X0975.
(122562-001)
Hour
Hour
D09604NO_001_Q0495.01/PHC/2012.06 s. 3/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17