Cystatin C
Immage 800
Bruksmerknad
Retningslinje for bestemmelse av
Cystatin C i serum/plasma
på Immage 800
Generell informasjon
Tiltenkt bruk
Bruksmerknaden er beregnet for kvantitativ bestemmelse av cystatin C i humant prøvemateriale ved bruk av NIPIA
(Near Infrared Particle ImmunoAssay) på Immage 800 (1, 2).
Måleområde
Ca. 0,4–7,5 mg/l avhengig av det spesifikke partiet til kalibratoren.
Referanseintervall
0,59–1,03 mg/l. Det anbefales å bestemme referanseintervaller for den lokale populasjonen.
Instrumentinnstillinger
Instrumentprogrammering utføres i henhold til Instrumentinnstillinger på side 3.
Reagenser
Antistoff
Reaksjonsbuffer
Kalibrator
Kontroller
Fortynner
Prøver
Humant serum, heparinplasma eller EDTA-plasma.
Stabil i 2 dager ved 2–8 ºC.
Stabil i minst 3 måneder ved –20 ºC.
Frosne prøver skal helst tines ved 37 ºC og blandes godt før analysen.
Kalibrator
Fortynning av standarder utføres manuelt i enten Dako-fortynningsbuffer 1 for turbidimetri/nefelometri eller NaCl-løsning
154 mmol/l (0,9 % w/v)
Reaksjonsbuffer (R1)
Reaksjonsbufferen er klar til bruk.
Antistoff (R2)
Immunpartikkelløsningen er klar til bruk.
Stabilitet ved 2–8 °C: Se spesifikasjonsblad og utløp på etiketten.
Kode
LX004
S2361
X7912
X7913
S2005
Navn
Cystatin C Immunoparticles (ERM-DA471/IFCC Standardized)
Dako-reaksjonsbuffer 9 for turbidimetri/nefelometri
Cystatin C Calibrator (ERM-DA471/IFCC Standardized)
Cystatin C Control Set (ERM-DA471/IFCC Standardized)
Dako-fortynningsbuffer 1 for turbidimetri/nefelometri
NaCl-løsning 154 mmol/l (0,9 % w/v)
Kapasitet: 1 ml immunpartikkelløsning tilsvarer omtrent 29 kyvetteavlesinger av standarder eller prøver. Dødvolumet til
reagensflasken skal legges til ved kalkulering av nødvendig reagensmengde.
Kalibreringsstabilitet
Det anbefales å kalibrere på nytt hver 8. uke, når reagenspartier endres, eller når kvalitetskontrollresultatene faller
utenfor det området som er fastsatt av det enkelte laboratoriet.
Feilsøking
Prøv å kalibrere på nytt hvis ytelsen er uakseptabel. Kontroller reagenser og prosedyre. Hvis problemet vedvarer,
må du ta kontakt med instrumentleverandøren eller Dakos tekniske service.
(124540-001)
D18966NO_001_LX004.01/PHC/2013.10 s.1/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Danmark | Tlf. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR-nr. 33 21 13 17
Cystatin C
Immage 800
Ytelsesdata
Følsomhet
En nominell verdi for Immage 800 på omtrent 10,0 på Immage 800 tilsvarer en konsentrasjon på omtrent 7,0 mg/l
cystatin C.
Påvisningsgrense
Den beregnede påvisningsgrensen er 0,09 mg/l.
Presisjon
Presisjonen ble beregnet ved ANOVA-analyse ved bruk av to kontroller og to serum-cystatin C-nivåer i fem kjøringer,
hver med en ny kalibrering og seks bestemmelser i hver kjøring.
Cystatin C
Gjennomsnitt
sverdi (mg/l)
Prøver
Standardavvik
(mg/l)
Innen
kjøringen
Mellom
kjøringer
Totalt
Total CV (%)
n
Cystatin C Control 1,
kode X7913
4,26
0,057
0,063
0,085
2,0
30
Cystatin C Control 2,
kode X7913
1,17
0,034
0,036
0,050
4,2
30
Prøve med lavt humant
serumnivå
1,08
0,035
0,038
0,051
4,8
30
Prøve med høyt humant
serumnivå
6,05
0,045
0,100
0,110
1,8
30
Nøyaktighet
En gjenvinning av cystatin C på 90–110 % kan forventes for Dako Cystatin C Control 1, kode X7913 og Dako Cystatin
C Control 2, kode X7913.
Linearitet
Analysen er lineær i området 0,4–7,0 mg/l.
Sikkerhetsområde
Ingen antigenoverflod finnes for cystatin C-konsentrasjoner under 21 mg/l.
Interferens
Ingen interferens finnes ved konsentrasjoner på opptil 5 g/l hemoglobin, 600 mg/l bilirubin, 16 g/l intralipid og
1200 IE/ml av revmatoid faktor.
Metodesammenligning
Bestemmelser av cystatin C ifølge denne bruksmerknaden ble sammenlignet med andre kommersielle
turbidimetriske analyser. Data er tilgjengelige på forespørsel.
Referanser
1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: Method optimization: Basic principles for quantitative determination of
human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab Med
2001; 39:1098-1109.
2. Immage 800 Operations manual.
(124540-001)
D18966NO_001_LX004.01/PHC/2013.10 s.2/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Danmark | Tlf. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR-nr. 33 21 13 17
Cystatin C
Immage 800
Instrumentinnstillinger
Prosedyre:
1.
Programmer en brukerdefinert reagens med parametrene som er oppført nedenfor. Se kapittel 5 i brukerhåndboken for IMMAGEimmunhistokjemisystemet hvis du vil ha mer detaljert informasjon.
2.
Overfør Dako Antibody Reagent (LX004) til rom A i en ny brukerdefinert kassett.
3.
Overfør Dako Reaction Buffer 9 (S2361) til rom B i kassetten. Se merknad nedenfor.
4.
Gi kjemien navnet CYST
5.
Kalibratorverdien avhenger av partiet. Når du bruker Dako Cystatin C Calibrator (kode X7912), må følgende fortynningsserie forberedes
manuelt i henhold til fortynningsskjemaet som vises nedenfor.
Standard
Nr. (i)
X7912
µL
Std. (1)
Std. (2)
Std. (3)
Std. (4)
Std. (5)
Std. (6)
[
[
[
[
[
[
20
20
40
75
90
100
NaCl 0,9 %
µL
]
]
]
]
]
]
[
[
[
[
[
[
360
180
120
100
60
0
]
]
]
]
]
]
f(i)
Kons.
faktor
f(1)
f(2)
f(3)
f(4)
f(5)
f(6)
0,0526
0,1000
0,2500
0,4286
0,6000
1,0000
C(i)
Konsentrasjon
[0,0526 x C(Cal)
[0,1000 x C(Cal)
[0,2500 x C(Cal)
[0,4286 x C(Cal)
[0,6000 x C(Cal)
[1,0000 x C(Cal)
]
]
]
]
]
]
Konsentrasjonen av cystatin C i standardene (C(i)) (mg/l) beregnes fra cystatin C-konsentrasjonen (C(Cal)) (mg/l)
som er angitt for det spesifikke partiet i kalibratoren (X7912) og den relative konsentrasjonsfaktoren (f(i)) ved
multiplisering, dvs. C(i) = f(i) x C(Cal) . Se verdiarket hvis du vil ha nøyaktig verdi for C(Cal) til gjeldende parti.
Protokollinformasjon:
Kjem. Navn
Partinummer
Reagensserienummer
Prøve- eller
fortynningsvolum
Reaksjonsbuffervolu
m
Volum på rom A
Volum på rom B
Brukerdefinert modell:
CYST
XXXXXX
XXXXXXX
Enheter
Protokoll
Utløpsdato for reagens
mg/l
Ikke-konkurrerende NIPIA
XX/XX/XX
5 µl
Økning
1
0 µl
33 µl
195 µl
Cal-fortynning
Prøvefortynning
Reaksjonstid
1:1
1:1
1,5 minutter
Kalibrering ved 4 parameterlogistikk
Merknad:
Det maksimale fyllevolumet til rom A og B i UDR-kassetten er på 8,0 ml og har et dødvolum på 250 µl. Mens systemet dispenserer 195 µl med
buffer fra rom B i henhold til protokollen beskrevet ovenfor, aspirerer det et totalt volum på 205 µl for å unngå væskeforurensning. Derfor kan ca. 37
tester kjøres når kassetten er fylt helt opp. Det anbefales å overvåke reagensbruken og fylle opp rom B og A på nytt etter behov til alle de 300
testene fra kassetten har blitt brukt.
(124540-001)
D18966NO_001_LX004.01/PHC/2013.10 s.3/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Danmark | Tlf. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR-nr. 33 21 13 17