Cystatin C
Generell bruksmerknad
Bruksmerknad
Generell retningslinje for bestemmelse av
Cystatin C i serum/plasma
Generell informasjon
Tilsiktet bruk
Bruksmerknaden er beregnet for kvantitativ bestemmelse av cystatin C i humant prøvemateriale ved bruk av
instrumenter som det ikke finnes noen spesifikk retningslinje for (1).
Ytelsen på et instrument som ble valgt av kunden, skal valideres.
Måleområde
Ca. 0,4–7,5 mg/L avhengig av den spesifikke loten til kalibratoren. I tilfelle postkonsentrasjon eller -fortynning kan
området utvides.
Referanseintervall
0,59–1,03 mg/L. Det anbefales å bestemme referanseintervallet for den lokale populasjonen.
Instrumentinnstillinger
Retningslinjer for instrumentprogrammering presenteres i "Forslag på instrumentinnstillinger..." på side 3.
Reagenser
Antistoff
Reaksjonsbuffer
Kalibrator
Kontroller
Diluent
Prøver
Humant serum, heparinplasma eller EDTA-plasma.
Stabil i 2 dager ved 2–8 ºC.
Stabil i minst 3 måneder ved –20 ºC.
Frosne prøver skal helst tines ved 37 ºC og blandes godt før analysen.
Kalibrator
Fortynning av standarder utføres enten automatisk av instrumentet slik som indikert, eller så gjøres det manuelt.
Reaksjonsbuffer
Reaksjonsbufferen er klar til bruk. Stabilitet om bord er 12 uker ved 2–12 ºC.
Antistoff
Immunopartikkelløsning er klar til bruk.
Stabilitet ved 2–8 ºC: Se spesifikasjonsbladet og utløpsdatoen på etiketten.
Stabilitet om bord: 12 uker ved 2–12 ºC.
Kode
LX004
S2361
X7912
X7913
Navn
Dako Cystatin C Immunoparticles (ERM-DA471/IFCC Standardized)
Dako Reaction Buffer 9
Dako Cystatin C Calibrator (ERM-DA471/IFCC Standardized)
Dako Cystatin C Control Set (ERM-DA471/IFCC Standardized)
NaCl-løsning 154 mmol/L (0,9 % w/v)
Kapasitet: 1 mL immunopartikkelløsning tilsvarer omtrent 10 kyvetteavlesinger av standarder eller prøver når 100 µL
immunopartikkelløsning brukes per test. Dødvolumet til reagensflasken skal vurderes ved kalkulering av nødvendig
reagensmengde.
Kalibreringsstabilitet
Det er anbefalt å rekalibrere hver 8. uke eller når reagensloter endres, en ny antistoffortynning klargjøres eller
kvalitetskontrollresultatene faller utenfor det området som er fastsatt av det enkelte laboratoriet. Kalibreringsstabiliteten
bør imidlertid valideres på det enkelte instrumentet.
Feilsøking
Hvis ytelsen er uakseptabel, prøv å rekalibrere. Kontroller reagenser og prosedyre. Hvis problemet vedvarer, ta
kontakt med instrumentleverandøren eller Dako tekniske service.
(122228-001)
D06212NO_001 30 134.LX004.01/NO/PHC/2011.12 s. 1/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Cystatin C
Generell bruksmerknad
Et eksempel på ytelsesdata på Hitachi 917
Sensitivitet
En OD-verdi på omtrent 0,50 på Hitachi 917 tilsvarer en cystatin C-konsentrasjon på ~7,5 mg/L.
Påvisningsgrense
Den beregnede påvisningsgrensen er 0,02 mg/L.
Presisjon
Presisjonen ble beregnet ved ANOVA-dataanalyse ved bruk av to kontroller og to serum-cystatin C-nivåer i fem
kjøringer, hver med en ny kalibrering og 6 bestemmelser i hver kjøring.
Cystatin C
Gjennomsnittsverdi
(mg/L)
Prøver
Cystatin C Control 1,
Kode X7913
Cystatin C Control 2,
Kode X7913
Prøve med lavt
humant serumnivå
Prøve med høyt
humant serumnivå
Standardavvik
(mg/L)
Total CV (%)
Innen
kjøringen
Mellom
kjøringer
Sum
4,39
0,054
0,030
0,062
1,4
36
1,13
0,008
0,016
0,018
1,6
36
0,96
0,008
0,013
0,015
1,6
36
5,21
0,019
0,032
0,037
0,7
36
n
Nøyaktighet
En gjenvinning av cystatin C på 90–110 % kan forventes for Dako Cystatin C Control 1, kode X7913 og Dako Cystatin C
Control 2, kode X7913.
Linearitet
Analysen er lineær i området 0,4–7,5 mg/L.
Sikkerhetsområde
Ingen antigenoverflod finnes for cystatin C-konsentrasjoner under 22 mg/L
Interferens
Ingen interferens finnes ved konsentrasjoner på opptil 5 g/L hemoglobin, 600 mg/L bilirubin, 16 g/L intralipid og
1600 IE/mL av revmatoid faktor.
Metodesammenligning
Bestemmelse av cystatin C ifølge denne bruksmerknaden ble sammenlignet med andre kommersielle
turbidimetriske analyser. Data er tilgjengelig på forespørsel.
Referanser
1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: Method optimization: Basic principles for quantitative determination of
human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab Med
2001;39:1098-1109.
(122228-001)
D06212NO_001 30 134.LX004.01/NO/PHC/2011.12 s. 2/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Cystatin C
Generell bruksmerknad
Forslag på instrumentinnstillinger for humant serum-cystatin C
Spesielle anbefalinger
A primary wavelength of approximately 546 nm and a secondary
wavelength of approximately 700 nm should be used.
The following reaction mode is recommended:
1. Mixing of (diluted) sample and reaction buffer.
2. Incubation (until stable readings are obtained).
3. Addition of the immunoparticle reagent.
4. Blanking (first reading) immediately after mixing all reagents.
5. Measuring signals during reaction until an end-point is obtained.
Parameter
Suggestion
Light path (mm)
Incubation time (s)
Sample dilution (Dil. factor)
Volume of prediluted sample (µL)
Sample volume (µL) (=Neat)
Diluent+Flush (for Sample+Reag) (µL)
Reaction buffer volume (µL)
PEG-conc. in Reac. buffer (%)
PEG-conc. in incubation volume (%)
Incubation volume (µL)
Antibody dilution (Ab dil. factor)
Volume of diluted antibody (µL)
Antibody volume (µL) (=Neat)
Diluent+Flush (for Antibody) (µL)
Total volume (µL)
Reaction time (s)
Total analysis time (s)
Forhold
Sample vol.(Neat)
Antibody vol.(Neat)
Relasjon
PEG - conc. in incub. vol.(%) * Sample vol.(Neat)
Incub. vol.
Forhold
Sample vol.(Neat)
Total vol.
PEG-conc. in Total volume (%)
Standarder
10
120
1
5
5
0
385
1
0.987
390
1
85
85
25
500
300
420
0.06
[0.05 - 0.06]
0.013
[0.09 - 0.013]
0.0100
[0.0085 - 0.0105]
0.77
Dilution factor
Std 1 (Highest conc.)
Std 2
Std 3
Std 4
Std 5
Std 6 (Lowest conc.)
1.00
1.43
2.57
5.21
9.35
18.18
[0.70 – 0.80]
fi Relative
conc. factor
1.000
0.700
0.389
0.192
0.107
0.055
[ ] Indikerer et akseptabelt område som finnes på ulike instrumenter.
fi Er den relative konsentrasjonsfaktoren som brukes til å kalkulere relativ konsentrasjon (RC(i)) for cystatin C i standardene fra en spesifikk lot med
kalibrator (C(Cal)); RC(i) = fi x C(Cal) .
(122228-001)
D06212NO_001 30 134.LX004.01/NO/PHC/2011.12 s. 3/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17